| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 英文缩写词语表 | 第9-14页 |
| 引言 | 第14-15页 |
| 第一篇 文献综述 | 第15-41页 |
| 第一章 裂谷热概述 | 第15-25页 |
| 1.1 病原学 | 第15-17页 |
| 1.2 流行病学 | 第17-20页 |
| 1.2.1 传染源 | 第17页 |
| 1.2.2 传播媒介 | 第17-18页 |
| 1.2.3 易感对象 | 第18-19页 |
| 1.2.4 流行特点 | 第19页 |
| 1.2.5 流行历史与分布 | 第19-20页 |
| 1.3 临床症状 | 第20-21页 |
| 1.4 病理特点 | 第21-22页 |
| 1.5 诊断 | 第22-23页 |
| 1.5.1 临床综合诊断 | 第22页 |
| 1.5.2 病原学诊断 | 第22页 |
| 1.5.3 血清学诊断 | 第22-23页 |
| 1.5.4 分子生物学诊断 | 第23页 |
| 1.6 防治措施 | 第23-25页 |
| 1.6.1 RVFV的潜在生物安全危险性 | 第23-24页 |
| 1.6.2 防控措施 | 第24页 |
| 1.6.3 治疗措施 | 第24-25页 |
| 第二章 裂谷热疫苗研究进展 | 第25-29页 |
| 2.1 灭活疫苗 | 第25-26页 |
| 2.2 弱毒疫苗 | 第26-27页 |
| 2.2.1 Smithburn疫苗 | 第26页 |
| 2.2.2 Clone 13 疫苗 | 第26页 |
| 2.2.3 MP-12 疫苗 | 第26-27页 |
| 2.3 基因工程疫苗 | 第27-29页 |
| 2.3.1 亚单位和核酸疫苗 | 第27页 |
| 2.3.2 载体疫苗 | 第27页 |
| 2.3.3 病毒样颗粒疫苗 | 第27-28页 |
| 2.3.4 复制子颗粒 | 第28-29页 |
| 第三章 病毒样颗粒研究进展 | 第29-41页 |
| 3.1 VLP概述 | 第29-30页 |
| 3.2 病毒样颗粒的生产系统 | 第30-35页 |
| 3.2.1 细菌表达系统 | 第31-32页 |
| 3.2.2 酵母表达系统 | 第32页 |
| 3.2.3 昆虫细胞表达系统 | 第32-33页 |
| 3.2.4 哺乳动物细胞表达系统 | 第33-34页 |
| 3.2.5 植物细胞表达系统 | 第34页 |
| 3.2.6 无细胞生产系统 | 第34-35页 |
| 3.3 VLP的免疫学特性 | 第35-36页 |
| 3.4.VLP在疫苗研究中的应用 | 第36-41页 |
| 3.4.1 重组乙肝疫苗 | 第37页 |
| 3.4.2 人乳头瘤病毒疫苗 | 第37-38页 |
| 3.4.3 流感病毒样颗粒 | 第38页 |
| 3.4.4 人细小病毒VLPs | 第38页 |
| 3.4.5 诺瓦克病毒VLPs | 第38-39页 |
| 3.4.6 PCV-2 VLP疫苗 | 第39页 |
| 3.4.7 VLP作为治疗性疫苗 | 第39-41页 |
| 第二篇 试验研究 | 第41-86页 |
| 第一章 RVFV假病毒包装及中和试验方法的建立 | 第41-55页 |
| 1.1 材料 | 第41-42页 |
| 1.1.1 试剂 | 第41-42页 |
| 1.1.2 细菌、质粒、细胞 | 第42页 |
| 1.1.3 仪器和设备 | 第42页 |
| 1.2 方法 | 第42-47页 |
| 1.2.1 表达RVFV结构蛋白的重组质粒的构建与鉴定 | 第42-44页 |
| 1.2.2 假病毒的包装与鉴定 | 第44-46页 |
| 1.2.3 假病毒感染滴度的测定 | 第46-47页 |
| 1.2.4 假病毒感染的抑制实验 | 第47页 |
| 1.2.5 假病毒中和试验方法的建立 | 第47页 |
| 1.3 结果 | 第47-53页 |
| 1.3.1 RVFV目的基因扩增结果 | 第47-48页 |
| 1.3.2 RVFV重组质粒的鉴定结果 | 第48-49页 |
| 1.3.3 假病毒的获得与鉴定 | 第49-50页 |
| 1.3.4 假病毒感染滴度的测定 | 第50-51页 |
| 1.2.5 假病毒感染的抑制实验 | 第51-52页 |
| 1.2.6 假病毒中和试验方法的建立 | 第52-53页 |
| 1.4 讨论 | 第53-54页 |
| 1.5 小结 | 第54-55页 |
| 第二章 RVFV截断的Gn蛋白在E.coli中的表达与多克隆抗体的制备 | 第55-64页 |
| 2.1 材料 | 第55-56页 |
| 2.1.1 试剂 | 第55页 |
| 2.1.2 细菌、质粒、细胞 | 第55-56页 |
| 2.1.3 仪器和设备 | 第56页 |
| 2.1.4 实验动物 | 第56页 |
| 2.2 方法 | 第56-60页 |
| 2.2.1 引物设计 | 第56-57页 |
| 2.2.2 Gn扩增聚合酶链式反应（PCR） | 第57-58页 |
| 2.2.3 Gn片段酶切连接转化和p ET-30a-Gn的构建 | 第58页 |
| 2.2.4 p ET-30a- Gn原核表达质粒的构建 | 第58页 |
| 2.2.5 原核表达截短的Gn蛋白及SDS-PAGE | 第58页 |
| 2.2.6 原核表达蛋白截短的Gn蛋白的纯化 | 第58-59页 |
| 2.2.7 SDS-PAGE与Western Blotting检测表达蛋白 | 第59-60页 |
| 2.2.8 原核表达蛋白的免疫 | 第60页 |
| 2.3 结果 | 第60-62页 |
| 2.3.1 原核表达质粒的构建 | 第60-61页 |
| 2.3.2 原核表达截短的Gn蛋白鉴定结果 | 第61-62页 |
| 2.3.3 Western Blotting检测结果 | 第62页 |
| 2.3.4 多抗制备及滴度检测 | 第62页 |
| 2.4 讨论 | 第62-63页 |
| 2.5 小结 | 第63-64页 |
| 第三章 RVFV病毒样颗粒的构建、制备及鉴定 | 第64-75页 |
| 3.1 材料 | 第64-65页 |
| 3.1.1 病毒、细胞、载体 | 第64页 |
| 3.1.2 工具酶、试剂盒及相关试剂 | 第64-65页 |
| 3.1.3 抗体 | 第65页 |
| 3.1.4 细胞培养相关用品 | 第65页 |
| 3.1.5 常用仪器 | 第65页 |
| 3.2 方法 | 第65-68页 |
| 3.2.1 密码子优化 | 第65页 |
| 3.2.2 重组杆状病毒的构建 | 第65-66页 |
| 3.2.3 滴定重组杆状病毒滴度 | 第66页 |
| 3.2.4 浓缩纯化病毒样颗粒 | 第66-67页 |
| 3.2.5 Western blotting鉴定 | 第67页 |
| 3.2.6 间接免疫荧光鉴定 | 第67页 |
| 3.2.7 透射电镜观察 | 第67页 |
| 3.2.8 免疫电镜检测 | 第67-68页 |
| 3.3 结果 | 第68-73页 |
| 3.3.1 密码子优化结果 | 第68-69页 |
| 3.3.2. 重组杆粒鉴定结果 | 第69-70页 |
| 3.3.3 重组杆状病毒鉴定及滴度测定结果 | 第70页 |
| 3.3.4 Western blotting鉴定结果 | 第70-71页 |
| 3.3.5 间接免疫荧光鉴定结果 | 第71-72页 |
| 3.3.6 VLPs的纯化及电镜观察结果 | 第72-73页 |
| 3.4 讨论 | 第73-74页 |
| 3.5 小结 | 第74-75页 |
| 第四章 RVFV病毒样颗粒的动物试验免疫研究 | 第75-86页 |
| 4.1 材料 | 第75-76页 |
| 4.1.1 病毒和细胞 | 第75页 |
| 4.1.2 试验动物 | 第75页 |
| 4.1.3 试验试剂 | 第75-76页 |
| 4.1.4 试验仪器 | 第76页 |
| 4.2 方法 | 第76-80页 |
| 4.2.1 病毒样颗粒的制备 | 第76页 |
| 4.2.2 动物免疫 | 第76-77页 |
| 4.2.3 免疫检测 | 第77-80页 |
| 4.3 结果 | 第80-84页 |
| 4.3.1 小鼠免疫试验结果 | 第80-83页 |
| 4.3.2 马免疫试验结果 | 第83-84页 |
| 4.4 讨论 | 第84-85页 |
| 4.5 小结 | 第85-86页 |
| 创新与特色 | 第86-87页 |
| 结论 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-98页 |
| 致谢 | 第98-100页 |
| 作者简介 | 第100-101页 |
| 石河子大学博士研究生学位论文导师评阅表 | 第101页 |
