| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 符号说明及缩略词 | 第10-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-23页 |
| 1.1 微生物强化采油 | 第11-12页 |
| 1.1.1 微生物强化采油概述 | 第11页 |
| 1.1.2 MEOR的作用机理 | 第11-12页 |
| 1.2 生物表面活性剂 | 第12-13页 |
| 1.2.1 生物表面活性剂概述 | 第12页 |
| 1.2.2 生物表面活性剂的应用 | 第12-13页 |
| 1.3 鼠李糖脂 | 第13-20页 |
| 1.3.1 鼠李糖脂概述 | 第13-14页 |
| 1.3.2 铜绿假单胞菌中鼠李糖脂的合成路线 | 第14-17页 |
| 1.3.3 鼠李糖脂的应用 | 第17-20页 |
| 1.4 鼠李糖脂的生产现状 | 第20-21页 |
| 1.5 鼠李糖脂产生菌的分子改造 | 第21-22页 |
| 1.6 本论文的研究目的和意义 | 第22-23页 |
| 第二章 铜绿假单胞菌鼠李糖脂高产菌株的诱变筛选及产脂条件优化 | 第23-39页 |
| 引言 | 第23页 |
| 2.1 材料和方法 | 第23-27页 |
| 2.1.1 原始菌株 | 第23-24页 |
| 2.1.2 培养基 | 第24页 |
| 2.1.3 主要仪器与试剂 | 第24页 |
| 2.1.4 实验方法 | 第24-27页 |
| 2.2 结果与分析 | 第27-37页 |
| 2.2.1 绘制的鼠李糖标准曲线 | 第27-28页 |
| 2.2.2 菌株的培养 | 第28-29页 |
| 2.2.3 铜绿假单胞菌SH6的等离子体诱变 | 第29-30页 |
| 2.2.4 铜绿假单胞菌SH6的紫外照射诱变 | 第30-31页 |
| 2.2.5 铜绿假单胞菌SH6的甲基磺酸乙酯(EMS)诱变 | 第31-33页 |
| 2.2.6 铜绿假单胞菌复合诱变 | 第33页 |
| 2.2.7 诱变结果统计 | 第33-34页 |
| 2.2.8 高产突变株EZD3的遗传稳定性及产脂培养基的优化 | 第34-35页 |
| 2.2.9 高产突变菌株EZD3的产脂培养基优化 | 第35-37页 |
| 2.3 本章小结 | 第37-39页 |
| 第三章 利用强启动子构建铜绿假单胞菌鼠李糖脂高产菌株 | 第39-67页 |
| 引言 | 第39-40页 |
| 3.1 材料和方法 | 第40-48页 |
| 3.1.1 菌株及质粒 | 第40-41页 |
| 3.1.2 培养基 | 第41页 |
| 3.1.3 主要仪器、试剂及工具酶 | 第41页 |
| 3.1.4 实验方法 | 第41-48页 |
| 3.1.4.1 提取铜绿假单胞菌SH6的基因组DNA | 第41-42页 |
| 3.1.4.2 目的基因扩增 | 第42-43页 |
| 3.1.4.3 目的基因和内源启动子的融合 | 第43-44页 |
| 3.1.4.4 重组质粒构建 | 第44-46页 |
| 3.1.4.5 转化铜绿假单胞菌及相应的验证 | 第46-47页 |
| 3.1.4.6 利用三亲杂交将目的基因随机插入铜绿假单胞EDZ3基因组 | 第47-48页 |
| 3.1.4.7 鼠李糖脂产量的测定 | 第48页 |
| 3.2 结果与分析 | 第48-65页 |
| 3.2.1 铜绿假单胞菌SH6的基因组提取 | 第48-49页 |
| 3.2.2 扩增铜绿假单胞菌SH6的鼠李糖基转移酶结构基因 | 第49-50页 |
| 3.2.3 扩增czcC基因和pilG基因的启动子,分别与鼠李糖基的转移酶基因中结构基因融合 | 第50页 |
| 3.2.4 重组质粒的构建 | 第50-57页 |
| 3.2.5 重组质粒用于转化铜绿假单胞菌 | 第57-64页 |
| 3.2.6 重组菌株1号-P.Aeruginosa-APA1的产脂培养基碳源优化 | 第64-65页 |
| 3.3 小结 | 第65-67页 |
| 全文总结与展望 | 第67-69页 |
| 1. 首次使用等离子体-紫外-EMS复合诱变法筛选获得稳定遗传的铜绿假单胞菌高产鼠李糖脂诱变茵株 | 第67页 |
| 2. 首次选择铜缘假单胞菌本源启动子对鼠李糖基转移酶基因进行过表达，明显提髙了鼠李糖脂的产量 | 第67-68页 |
| 展望 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-77页 |
| 攻读学位期间撰写的论文 | 第77-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 附件 | 第80页 |
