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半胱氨酸蛋白酶抑制剂相关基因SRAC1的功能分析

符号说明第4-8页
中文摘要第8-10页
Abstract第10-11页
1 前言第12-31页
    1.1 植物半胱氨酸蛋白酶抑制剂简介第12-24页
        1.1.1 植物半胱氨酸蛋白酶抑制剂的结构、功能和进化第12-18页
            1.1.1.1 动物和植物中的半胱氨酸蛋白酶抑制剂保守抑制机制第13-15页
            1.1.1.2 植物半胱氨酸蛋白酶抑制剂独特的进化途径第15-18页
        1.1.2 植物半胱氨酸蛋白酶抑制剂的生物学功能第18-22页
            1.1.2.1 植物半胱氨酸蛋白酶抑制剂在植物体内的作用第18-19页
            1.1.2.2 植物半胱氨酸蛋白酶抑制剂在储存器官中调控蛋白的更新第19-21页
            1.1.2.3 植物半胱氨酸蛋白酶抑制剂在植物中的其它作用第21-22页
        1.1.3 植物半胱氨酸蛋白酶抑制剂在植物体外的作用第22-24页
    1.2 盐胁迫第24-28页
        1.2.1 盐胁迫带来的损害第25-26页
        1.2.2 耐盐的分子机制第26-28页
    1.3 ABA与种子萌发第28-31页
        1.3.1 ABA简介第28页
        1.3.2 种子萌发第28-29页
        1.3.3 ABA对种子萌发的影响第29-31页
2 材料与方法第31-44页
    2.1 实验材料第31-32页
        2.1.1 植物材料第31页
        2.1.2 菌株和质粒第31页
        2.1.3 酶及生化试剂第31页
        2.1.4 引物第31-32页
    2.2 实验方法第32-44页
        2.2.1 CTAB法提取拟南芥基因组DNA第32页
        2.2.2 植物基因组的纯化第32-33页
        2.2.3 RNA的提取第33-34页
            2.2.3.1 利用TRIZOL法提取RNA第33页
            2.2.3.2 RNA中基因组DNA的去除第33页
            2.2.3.3 RNA反转录第33-34页
        2.2.4 DNA片段的扩增与载体的构建第34-35页
            2.2.4.1 DNA片段的扩增第34页
            2.2.4.2 平末端片段加A第34页
            2.2.4.3 连接反应第34-35页
            2.2.4.4 酶切反应第35页
        2.2.5 半定量RT-PCR第35-36页
        2.2.6 大肠杆菌DH5α 感受态的制备及转化第36页
            2.2.6.1 大肠杆菌DH5α 感受态的制备第36页
            2.2.6.2 大肠杆菌细胞的转化第36页
        2.2.7 农杆菌感受态细胞的制备和转化第36-37页
            2.2.7.1 根癌农杆菌GV3101感受态细胞的制备第36-37页
            2.2.7.2 农杆菌的转化第37页
        2.2.8 小量碱法提取大肠杆菌中的质粒第37页
        2.2.9 拟南芥转化及转基因鉴定第37-38页
            2.2.9.1 拟南芥的转化第37-38页
            2.2.9.2 转基因拟南芥的鉴定第38页
        2.2.10 原核蛋白诱导第38-39页
        2.2.11 聚丙烯酰胺凝胶电泳第39-40页
            2.2.11.1 配制试剂第39页
            2.2.11.2 蛋白质凝胶电泳第39-40页
        2.2.12 蛋白纯化第40-41页
        2.2.13 测定木瓜蛋白酶活性第41-42页
        2.2.14 用Clustal比对蛋白序列第42页
        2.2.15 用Mega4构建进化树第42页
        2.2.16 网络资源第42-44页
3 结果与分析第44-54页
    3.1 拟南芥中半胱氨酸蛋白酶抑制剂超家族相关基因结构分析第44-45页
    3.2 半胱氨酸蛋白酶抑制剂超家族相关基因染色体定位分析第45-46页
    3.3 半胱氨酸蛋白酶抑制剂超家族相关基因启动子分析第46-47页
    3.4 半胱氨酸蛋白酶抑制剂超家族相关基因同源性分析第47-48页
    3.5 半胱氨酸蛋白酶抑制剂超家族蛋白质保守性分析第48-49页
    3.6 半胱氨酸蛋白酶抑制剂相关基因SRAC1克隆及超表达拟南芥的构建第49-50页
    3.7 SRAC1超表达拟南芥在萌发期对ABA不敏感第50-51页
    3.8 SRAC1超表达拟南芥在幼苗期对盐不敏感第51-52页
    3.9 SRAC1能够抑制半胱氨酸蛋白酶的活性第52-54页
4 讨论第54-56页
5 结论第56-57页
参考文献第57-67页
致谢第67页

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