| 中文摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 英文缩写词表 | 第11-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-20页 |
| 1 头孢曲松的概述 | 第13-14页 |
| 1.1 头孢曲松的理化性质 | 第13-14页 |
| 1.2 头孢曲松临床应用的不良反应 | 第14页 |
| 1.3 头孢曲松在人体内的药代动力学 | 第14页 |
| 2 头孢菌素类抗生素检测方法研究进展 | 第14-18页 |
| 2.1 理化检测法 | 第15-16页 |
| 2.1.1 毛细管电泳法 | 第15页 |
| 2.1.2 可见光分光光度法 | 第15页 |
| 2.1.3 荧光光度法 | 第15页 |
| 2.1.4 高效液相色谱法 | 第15-16页 |
| 2.1.5 荷移反应分光光度法 | 第16页 |
| 2.1.6 紫外-可见分光光度法 | 第16页 |
| 2.2 微生物学检测方法 | 第16-17页 |
| 2.2.1 氯化三苯基四氮唑法 | 第16页 |
| 2.2.2 纸片法 | 第16-17页 |
| 2.2.3 牛乳发酵活性试验法 | 第17页 |
| 2.3 免疫学检测方法 | 第17-18页 |
| 2.3.1 酶联免疫吸附法(ELISA) | 第17页 |
| 2.3.2 放射免疫法(RIA) | 第17-18页 |
| 2.3.3 胶体金免疫层析技术 | 第18页 |
| 2.4 几种检测方法的比较 | 第18页 |
| 3 本研究的目的及意义 | 第18-20页 |
| 第二章 头孢曲松钠人工抗原的制备与鉴定 | 第20-27页 |
| 1 材料与方法 | 第20-23页 |
| 1.1 主要试剂 | 第20页 |
| 1.2 仪器与材料 | 第20页 |
| 1.3 主要溶液系统 | 第20-21页 |
| 1.4 头孢曲松钠人工抗原的制备 | 第21-22页 |
| 1.4.1 透析袋的预处理 | 第21页 |
| 1.4.2 免疫原的合成 | 第21-22页 |
| 1.4.3 包被原的合成 | 第22页 |
| 1.5 人工抗原的分析 | 第22-23页 |
| 1.5.1 人工抗原蛋白浓度的测定 | 第22页 |
| 1.5.2 人工抗原紫外扫描鉴定 | 第22-23页 |
| 1.5.3 人工抗原SDS-PAGE凝胶电泳鉴定 | 第23页 |
| 2 结果 | 第23-24页 |
| 2.1 人工抗原蛋白浓度测定的结果 | 第23页 |
| 2.2 人工抗原紫外扫描结果 | 第23-24页 |
| 2.3 人工抗原SDS-PAGE凝胶电泳鉴定结果 | 第24页 |
| 3 讨论 | 第24-27页 |
| 第三章 头孢曲松钠单克隆抗体的制备及鉴定 | 第27-40页 |
| 1 材料和方法 | 第27-35页 |
| 1.1 实验动物与生物材料 | 第27页 |
| 1.2 主要试剂 | 第27页 |
| 1.3 实验仪器与耗材 | 第27-28页 |
| 1.4 主要溶液系统 | 第28-29页 |
| 1.4.1 ELISA溶液 | 第28页 |
| 1.4.2 细胞培养溶液 | 第28-29页 |
| 1.4.3 纯化使用液 | 第29页 |
| 1.5 头孢曲松钠单克隆抗体的制备 | 第29-34页 |
| 1.5.1 动物免疫程序 | 第29-30页 |
| 1.5.2 ELISA筛选系统的建立 | 第30-31页 |
| 1.5.3 细胞融合与培养 | 第31-33页 |
| 1.5.4 杂交瘤细胞株的稳定性测试及建株 | 第33页 |
| 1.5.5 腹水制备 | 第33-34页 |
| 1.5.6 腹水纯化 | 第34页 |
| 1.6 单克隆抗体的鉴定 | 第34-35页 |
| 1.6.1 单克隆抗体蛋白浓度测定及其纯化回收率测定 | 第34页 |
| 1.6.2 抗体纯化效果SDS-PAGE鉴定 | 第34页 |
| 1.6.3 单克隆抗体特异性鉴定 | 第34-35页 |
| 2 结果 | 第35-38页 |
| 2.1 最佳封闭液的确定 | 第35页 |
| 2.2 包被抗原的工作浓度和阳性血清效价的确定 | 第35-36页 |
| 2.3 融合前SP2/0生长状况 | 第36页 |
| 2.4 单克隆孔杂交瘤细胞生长状态 | 第36页 |
| 2.5 单克隆抗体细胞株的建立和稳定性 | 第36页 |
| 2.6 腹水的制备 | 第36页 |
| 2.7 单克隆抗体的鉴定 | 第36-38页 |
| 2.7.1 腹水蛋白含量 | 第36-37页 |
| 2.7.2 抗体蛋白回收率 | 第37页 |
| 2.7.3 SDS-PAGE检测腹水纯化效果 | 第37-38页 |
| 2.7.4 抗体特异性鉴定 | 第38页 |
| 3 讨论 | 第38-40页 |
| 第四章 头孢曲松钠ELISA检测方法建立及初步应用 | 第40-47页 |
| 1 材料和方法 | 第40-42页 |
| 1.1 实验仪器与试剂 | 第40页 |
| 1.2 样品 | 第40页 |
| 1.3 ELSIA检测方法的建立 | 第40-41页 |
| 1.3.1 确定最佳封闭液 | 第40页 |
| 1.3.2 抗原抗体最佳工作浓度的确定 | 第40-41页 |
| 1.3.3 CiELISA标准工作曲线及相关参数 | 第41页 |
| 1.4 样品添加回收试验 | 第41-42页 |
| 1.4.1 样品处理方法 | 第41页 |
| 1.4.2 样品基质干扰 | 第41页 |
| 1.4.3 标准曲线的绘制 | 第41页 |
| 1.4.4 样品中头孢曲松钠回收率测定 | 第41-42页 |
| 2 结果 | 第42-45页 |
| 2.1 ELSIA检测方法的建立 | 第42-43页 |
| 2.1.1 最佳封闭条件的确定 | 第42页 |
| 2.1.2 抗原抗体工作浓度的确定 | 第42-43页 |
| 2.1.3 CiELISA标准工作曲线及参数 | 第43页 |
| 2.2 头孢曲松钠单克隆抗体的初步应用 | 第43-45页 |
| 2.2.1 样品基质干扰 | 第43-44页 |
| 2.2.2 样品溶液中标准曲线的绘制 | 第44-45页 |
| 2.3 样品添加回收率测定 | 第45页 |
| 3 讨论 | 第45-47页 |
| 全文结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |