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NOD1/2-RIP2信号通路参与副猪嗜血杆菌感染PK-15细胞调控机制的研究

摘要第6-8页
Abstract第8-9页
缩略词表第10-12页
1 文献综述第12-20页
    1.1 副猪嗜血杆菌病第12页
    1.2 NOD信号通路第12-17页
        1.2.1 NLRs结构第13-14页
        1.2.2 NOD1/2-RIP2信号通路第14-16页
        1.2.3 NOD1/2 与疾病第16-17页
    1.3 副猪嗜血杆菌(HPS)感染与炎症反应第17-20页
        1.3.1 HPS感染PK-15细胞激活NF-κB和MAPKs(p38/JNK)信号通路第17-18页
        1.3.2 HPS感染产生趋化因子第18-20页
2 研究目的和意义第20-21页
3 材料与方法第21-34页
    3.1 试验材料第21-25页
        3.1.1 细胞、菌株、质粒和序列第21-22页
        3.1.2 主要药品与试剂盒第22-23页
        3.1.3 主要培养基及其配制第23-24页
        3.1.4 主要溶液的配制第24-25页
        3.1.5 主要实验器材第25页
    3.2 试验方法第25-34页
        3.2.1 细菌培养第25页
        3.2.2 大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法)第25-26页
        3.2.3 质粒的制备与鉴定第26-28页
        3.2.4 细胞的转染实验第28-29页
        3.2.5 Western Blot检测细胞中目的蛋白的表达第29-30页
        3.2.6 细胞、感染细菌的细胞样品总RNA的提取第30-31页
        3.2.7 c DNA的合成第31页
        3.2.8 SYBR Green I实时定量PCR第31-32页
        3.2.9 相对m RNA表达水平的计算第32页
        3.2.10 双荧光素酶检测实验第32-33页
        3.2.11 统计学分析第33-34页
4 结果与分析第34-43页
    4.1 HPS感染PK-15细胞后NOD1/2 蛋白表达和RIP2磷酸化水平分析第34-36页
        4.1.1 HPS感染PK-15细胞后NOD1/2 蛋白表达的动力学分析第34-35页
        4.1.2 HPS感染PK-15细胞后RIP2蛋白表达及其磷酸化水平分析第35-36页
    4.2 NOD1/2-RIP2与HPS感染PK-15细胞激活NF-ΚB和MAPKS信号通路的分析第36-40页
        4.2.1 NOD1、NOD2和RIP2干扰分子的干扰效率检测第36-38页
        4.2.2 NOD1/2、RIP2基因干扰对HPS感染PK-15细胞后NF-κB启动子活性的影响第38-39页
        4.2.3 NOD1/2、RIP2基因干扰对HPS感染PK-15细胞后P65的磷酸化水平的影响第39-40页
        4.2.4 NOD1/2、RIP2基因干扰对HPS感染PK-15细胞后MAPKs通路中P38、JNK和ERK磷酸化水平的影响第40页
    4.3 NOD1/2、RIP2基因干扰对HPS感染PK-15细胞后CCL4、CCL5和IL-8表达的影响第40-43页
5 讨论第43-48页
    5.1 HPS感染PK-15细胞激活NOD1/2-RIP2信号通路分子机制的研究第43-44页
    5.2 HPS感染PK-15细胞激活NOD1/2 表达的研究第44页
    5.3 HPS感染PK-15细胞激活NOD1/2 信号通路和TLRS互联作用的研究第44-48页
6 结论第48-49页
参考文献第49-57页
致谢第57页

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