摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第1章 绪论 | 第14-38页 |
1.1 研究的目的与意义 | 第14-15页 |
1.2 细胞自噬 | 第15-29页 |
1.2.1 自噬的主要调控分子 | 第16-23页 |
1.2.2 参与自噬调控的miRNAs分子 | 第23-27页 |
1.2.3 细胞自噬在癌症化学治疗中的作用 | 第27-29页 |
1.3 AR信号通路与PC的雄激素治疗 | 第29-33页 |
1.3.1 AR信号通路 | 第29-31页 |
1.3.2 靶向AR信号通路在PC治疗中的作用 | 第31-33页 |
1.4. 雷公藤红素治疗前列腺癌的临床前研究 | 第33-36页 |
1.5 本论文的主要研究内容及技术路线 | 第36-38页 |
1.5.1 研究内容 | 第36-37页 |
1.5.2 技术路线 | 第37-38页 |
第2章 实验材料与实验方法 | 第38-50页 |
2.1 实验材料 | 第38-41页 |
2.1.1 细胞系 | 第38页 |
2.1.2 菌株 | 第38页 |
2.1.3 载体 | 第38-39页 |
2.1.4 抗体 | 第39页 |
2.1.5 各类实验其他试剂 | 第39-40页 |
2.1.6 实验仪器 | 第40页 |
2.1.7 常用网站和软件 | 第40-41页 |
2.2 实验方法 | 第41-50页 |
2.2.1 细胞培养 | 第41页 |
2.2.2 细胞转染 | 第41-42页 |
2.2.3 稳定表达外源质粒的细胞系的筛选 | 第42页 |
2.2.4 荧光素酶载体的构建及检测 | 第42-43页 |
2.2.5 Western Blot | 第43页 |
2.2.6 核酸提取 | 第43-45页 |
2.2.7 RT-PCR | 第45-46页 |
2.2.8 实时定量PCR反应 | 第46页 |
2.2.9 血液DNA提取 | 第46-47页 |
2.2.10 载体构建 | 第47-48页 |
2.2.11 MTT实验 | 第48页 |
2.2.12 染色质免疫沉淀实验 | 第48-49页 |
2.2.13 统计学分析 | 第49-50页 |
第3章 AR负调控雷公藤红素诱导的细胞自噬 | 第50-64页 |
3.1 引言 | 第50页 |
3.2 雷公藤红素在前列腺癌细胞中诱导细胞自噬 | 第50-53页 |
3.3 AR负调控雷公藤红素诱导的细胞自噬 | 第53-60页 |
3.3.1 自噬诱导过程中AR蛋白的表达 | 第53-54页 |
3.3.2 沉默AR后对细胞自噬的影响 | 第54-55页 |
3.3.3 过表达AR对细胞自噬的影响 | 第55-57页 |
3.3.4 雄激素激活AR对细胞自噬的影响 | 第57-58页 |
3.3.5 抑制AR通路后凋亡对自噬的影响 | 第58-60页 |
3.4 雷公藤红素诱导保护性细胞自噬 | 第60-63页 |
3.4.1 抑制自噬对细胞增殖能力的影响 | 第60-61页 |
3.4.2 抑制自噬促进雷公藤红素诱导的细胞凋亡 | 第61-63页 |
3.5 本章小结 | 第63-64页 |
第4章 AR转录调控miR-101抑制雷公藤红素诱导的细胞自噬 | 第64-80页 |
4.1 引言 | 第64页 |
4.2 雷公藤红素处理后miRNAs表达谱分析 | 第64-66页 |
4.3 AR转录调控miR-101的表达 | 第66-72页 |
4.3.1 miR-101启动子区存在雄激素反应元件 | 第66-69页 |
4.3.2 AR转录调控miR-101的表达 | 第69-72页 |
4.4 AR转录调控miR-101抑制雷公藤红素诱导的细胞自噬 | 第72-77页 |
4.5 miR-101抑制雷公藤红素诱导的细胞自噬促进细胞死亡 | 第77-79页 |
4.6 本章小结 | 第79-80页 |
第5章 AR转录调控miR1792a负调控雷公藤红素诱导的细胞自噬 | 第80-107页 |
5.1 引言 | 第80页 |
5.2 雷公藤红素处理后miR1792a基因簇表达验证 | 第80-81页 |
5.3 miR1792a基因簇抑制雷公藤红素细胞自噬 | 第81-82页 |
5.4. AR转录调控miR1792a基因簇的表达 | 第82-87页 |
5.4.1 miR1792a基因簇启动子区存在雄激素反应元件 | 第82-84页 |
5.4.2 AR转录调控miR1792a基因簇的表达 | 第84-87页 |
5.5 AR转录调控miR1792a基因簇抑制雷公藤红素诱导的细胞自噬 | 第87-89页 |
5.6 解析miR1792a基因簇成员分子在细胞自噬中的作用 | 第89-93页 |
5.7 miR1792a基因簇抑制细胞自噬的靶基因分析 | 第93-99页 |
5.7.1 miR-20a的靶基因验证 | 第93-96页 |
5.7.2 miR-17的靶基因验证 | 第96-99页 |
5.8 miR-20a和miR-17靶向ATG7抑制雷公藤红素诱导的细胞自噬 | 第99-101页 |
5.9 miR-17和miR-20a抑制雷公藤红素诱导的细胞自噬促进细胞死亡 | 第101-106页 |
5.10 本章小结 | 第106-107页 |
结论 | 第107-109页 |
参考文献 | 第109-127页 |
附录 | 第127-131页 |
攻读博士学位期间发表的学术论文及其它成果 | 第131-133页 |
致谢 | 第133-134页 |
个人简历 | 第134页 |