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运用SDS-PAGE研究蛋白酶催化特性—一种新方法的建立

摘要第3-4页
Abstract第4页
第一章 绪论第8-19页
    1.1 胰蛋白酶第8-11页
        1.1.1 胰蛋白酶的概述第8-9页
        1.1.2 胰蛋白酶酶学性质及其活性检测第9-11页
    1.2 木瓜蛋白酶第11-14页
        1.2.1 木瓜蛋白酶的概述第11-12页
        1.2.2 木瓜蛋白酶酶学性质及其活性检测第12-14页
    1.3 牛血清白蛋白第14-15页
    1.4 蛋白酶抑制剂第15-17页
    1.5 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳第17-18页
    1.6 本研究的内容、目的和意义第18-19页
第二章 应用SDS-PAGE研究与优化胰蛋白酶的催化条件第19-30页
    2.1 实验用品第19-22页
        2.1.1 实验试剂与材料第19-20页
        2.1.2 实验仪器第20页
        2.1.3 主要实验试剂配制第20-22页
    2.2 实验方法和步骤第22-24页
        2.2.1 胰蛋白酶与酪蛋白、明胶及BSA的酶促反应第22页
        2.2.2 SDS-PAGE法研究不同温度条件下胰蛋白酶的酶促反应第22页
        2.2.3 紫外分光光度计法研究不同温度条件下胰蛋白酶的酶促反应第22页
        2.2.4 SDS-PAGE法研究不同pH条件下胰蛋白酶的酶促反应第22页
        2.2.5 紫外分光光度计法研究不同pH条件下胰蛋白酶的酶促反应第22-23页
        2.2.6 SDS-PAGE第23-24页
        2.2.7 图像分析第24页
    2.3 实验结果和讨论第24-30页
        2.3.1 胰蛋白酶与明胶、酪蛋白和牛血清白蛋白的酶促反应第24-25页
        2.3.2 SDS-PAGE法研究不同温度条件下胰蛋白酶的酶促反应第25-27页
        2.3.3 紫外分光光度计法研究不同温度条件下胰蛋白酶的酶促反应第27页
        2.3.4 SDS-PAGE法研究不同pH条件下胰蛋白酶的酶促反应第27-29页
        2.3.5 紫外分光光度计法研究不同pH条件下胰蛋白酶的酶促反应第29页
        2.3.6 讨论第29-30页
第三章 应用SDS-PAGE研究与优化木瓜蛋白酶的催化条件第30-42页
    3.1 实验用品第30-33页
        3.1.1 实验试剂与材料第30-31页
        3.1.2 实验仪器第31页
        3.1.3 主要实验试剂配制第31-33页
    3.2 实验方法和步骤第33-35页
        3.2.1 木瓜蛋白酶与酪蛋白、牛血清白蛋白的酶促反应第33页
        3.2.2 SDS-PAGE法研究不同温度条件下木瓜蛋白酶的酶促反应第33页
        3.2.3 紫外分光光度法研究不同温度条件下木瓜蛋白酶的酶促反应第33-34页
        3.2.4 SDS-PAGE法研究不同pH条件下木瓜蛋白酶的酶促反应第34页
        3.2.5 紫外分光光度法研究不同pH条件下木瓜蛋白酶的酶促反应第34页
        3.2.6 SDS-PAGE第34-35页
        3.2.7 图像分析第35页
    3.3 实验结果和讨论第35-42页
        3.3.1 木瓜蛋白酶与酪蛋白、牛血清白蛋白第35-36页
        3.3.2 SDS-PAGE研究不同温度条件下木瓜蛋白酶的酶促反应第36-38页
        3.3.3 紫外分光光度法研究不同温度条件下木瓜蛋白酶的酶促反应第38-39页
        3.3.4 SDS-PAGE法研究不同pH条件下木瓜蛋白酶的酶促反应第39-40页
        3.3.5 紫外分光光度法研究不同pH条件下木瓜蛋白酶的酶促反应第40-41页
        3.3.6 讨论第41-42页
第四章 应用SDS-PAGE研究与优化酸性蛋白酶的催化条件第42-50页
    4.1 实验用品第42-43页
        4.1.1 实验试剂与用品第42-43页
        4.1.2 实验仪器第43页
        4.1.3 实验试剂配制第43页
    4.2 实验方法与步骤第43-45页
        4.2.1 酸性蛋白酶与酪蛋白、牛血清白蛋白的酶促反应第43-44页
        4.2.2 SDS-PAGE法研究不同温度条件下酸性蛋白酶的酶促反应第44页
        4.2.3 SDS-PAGE法研究不同pH条件下酸性蛋白酶的酶促反应第44页
        4.2.4 SDS-PAGE第44-45页
        4.2.7 图像分析第45页
    4.3 结果与讨论第45-50页
        4.3.1 酸性蛋白酶与酪蛋白、牛血清白蛋白的酶促反应第45-46页
        4.3.2 SDS-PAGE法研究不同温度条件下酸性蛋白酶的酶促反应第46-47页
        4.3.3 SDS-PAGE法研究不同pH条件下酸性蛋白酶的酶促反应第47-49页
        4.3.4 讨论第49-50页
第五章 应用SDS-PAGE研究胰蛋白酶抑制剂的抑制作用机理第50-63页
    第一节 胰蛋白酶抑制剂的提取第50-58页
        5.1 实验用品第50-52页
            5.1.1 实验试剂与材料第50-51页
            5.1.2 实验仪器第51页
            5.1.3 主要实验试剂配制第51-52页
        5.2 实验方法和步骤第52-55页
            5.2.1 胰蛋白酶抑制剂粗提液的制备第52页
            5.2.2 硫酸铵盐析第52页
            5.2.3 透析与浓缩第52页
            5.2.4 DEAE-纤维素层析第52-53页
            5.2.5 G-75分离胰蛋白酶抑制剂第53页
            5.2.6 SDS-PAGE第53-55页
        5.3 实验结果与讨论第55-58页
            5.3.1 硫酸铵盐析第55页
            5.3.2 DEAE-纤维素分离胰蛋白酶抑制剂第55-56页
            5.3.3 G-75分离胰蛋白酶抑制剂第56-57页
            5.3.4 讨论第57-58页
    第二节 应用SDS-PAGE探究胰蛋白酶抑制剂对蛋白酶酶促反应的作用机理第58-63页
        5.4 实验用品第58-59页
            5.4.1 实验试剂与材料第58页
            5.4.2 实验仪器第58-59页
        5.5 实验方法和步骤第59页
            5.5.1 胰蛋白酶抑制剂存在下的胰蛋白酶的酶促反应第59页
            5.5.2 胰蛋白酶抑制剂存在下的木瓜蛋白酶的酶促反应第59页
        5.6 结果与讨论第59-63页
            5.6.1 胰蛋白酶抑制剂存在下的胰蛋白酶的酶促反应第59-62页
            5.6.2 胰蛋白酶抑制剂存在下的木瓜蛋白酶的酶促反应第62页
            5.6.3 讨论第62-63页
第六章 结论与展望第63-65页
    6.1 结论第63-64页
    6.2 展望第64-65页
参考文献第65-72页
攻读硕士期间发表的论文第72-73页
致谢第73页

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