中文摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
第1章 前言 | 第11-21页 |
1.1 蛋白质相关修饰的分类 | 第11-14页 |
1.1.1 蛋白质的磷酸化 | 第11-12页 |
1.1.2 蛋白质的糖基化 | 第12-13页 |
1.1.3 蛋白质的泛素化 | 第13-14页 |
1.1.4 蛋白质的乙酰化 | 第14页 |
1.2 HDACs的概述 | 第14-19页 |
1.2.1 组蛋白去乙酰化酶的分类 | 第15-17页 |
1.2.2 底物的专一性 | 第17-18页 |
1.2.3 亚细胞定位 | 第18页 |
1.2.4 HDACs的组织表达 | 第18-19页 |
1.2.5 HDACs的胁迫应答 | 第19页 |
1.3 本课题研究的目的及意义 | 第19-20页 |
1.4 实验技术路线 | 第20-21页 |
第2章 材料与方法 | 第21-42页 |
2.1 实验材料 | 第21-26页 |
2.1.1 植物材料 | 第21页 |
2.1.2 工程菌株及载体 | 第21页 |
2.1.3 常用试剂以及抗生素 | 第21-22页 |
2.1.4 主要实验仪器及设备 | 第22页 |
2.1.5 试验所需引物序列 | 第22-23页 |
2.1.6 试验主要溶液及培养基的配置 | 第23-26页 |
2.2 试验方法 | 第26-42页 |
2.2.1 植物材料的培养及RNA的提取 | 第26-27页 |
2.2.2 OsSRT目的基因片段的克隆 | 第27-31页 |
2.2.3 利用Gateway技术进行表达载体的构建 | 第31-35页 |
2.2.4 植物表达载体转化农杆菌 | 第35-36页 |
2.2.5 利用农杆菌实现拟南芥的遗传转化 | 第36-37页 |
2.2.6 转基因植株的分子鉴定 | 第37-38页 |
2.2.7 转基因植株的抗逆性分析 | 第38页 |
2.2.8 逆境胁迫转基因拟南芥渗透调节物质测定: | 第38-40页 |
2.2.9 植物材料抗氧化物酶活性测定 | 第40-42页 |
第3章 结果与分析 | 第42-66页 |
3.1 实验材料的培养 | 第42-43页 |
3.1.1 水稻幼苗的培养 | 第42页 |
3.1.2 拟南芥幼苗的培养 | 第42-43页 |
3.2 RNA的提取 | 第43-44页 |
3.3 水稻OsSRT基因的克隆 | 第44-47页 |
3.3.1 RT-PCR扩增OsSRT基因的ORF片段 | 第44页 |
3.3.2 目的基因OsSRT阳性重组子的鉴定 | 第44-47页 |
3.4 植物表达载体的构建 | 第47-50页 |
3.4.1 TOPO中间载体的构建及鉴定 | 第47-48页 |
3.4.2 植物表达载体的构建及阳性克隆的鉴定 | 第48-50页 |
3.5 植物表达载体的农杆菌的遗传转化 | 第50-52页 |
3.5.1 农杆菌目的基因的PCR验证 | 第50-51页 |
3.5.2 阳性克隆的质粒酶切鉴定 | 第51-52页 |
3.6 转基因拟南芥的筛选与鉴定 | 第52-53页 |
3.6.1 转基因拟南芥T0代的筛选 | 第52页 |
3.6.2 转基因拟南芥T2纯合株系的鉴定 | 第52-53页 |
3.7 转基因植物的分子检测 | 第53-54页 |
3.8 逆境胁迫下转基因植株的表现 | 第54-55页 |
3.8.1 植株逆境处理生长状况的测定 | 第54-55页 |
3.9 逆境胁迫下对转基因植株渗透调节物质的影响 | 第55-61页 |
3.9.1 渗透调节物质标准曲线的制作 | 第55-56页 |
3.9.2 胁迫处理对转基因植株脯氨酸含量的影响 | 第56-58页 |
3.9.3 胁迫处理下对转基因植株可溶性蛋白的影响 | 第58-61页 |
3.10 胁迫处理对转基因植株抗氧化系统的影响 | 第61-66页 |
3.10.1 盐胁迫对转基因植株抗氧化系统的影响 | 第61-62页 |
3.10.2 干旱胁迫下对转基因植株抗氧化系统的影响 | 第62-63页 |
3.10.3 氧化胁迫对转基因植物抗氧化物酶的影响 | 第63-66页 |
第4章 讨论 | 第66-68页 |
4.1 载体的选择 | 第66页 |
4.2 试验结果分析 | 第66页 |
4.3 试验思路的分析 | 第66-67页 |
4.4 后期试验测定指标的选择 | 第67页 |
4.5 未来试验设计思路 | 第67-68页 |
结论 | 第68-70页 |
参考文献 | 第70-77页 |
致谢 | 第77-78页 |