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水稻OsSRT基因的克隆及功能分析

中文摘要第3-5页
Abstract第5-7页
第1章 前言第11-21页
    1.1 蛋白质相关修饰的分类第11-14页
        1.1.1 蛋白质的磷酸化第11-12页
        1.1.2 蛋白质的糖基化第12-13页
        1.1.3 蛋白质的泛素化第13-14页
        1.1.4 蛋白质的乙酰化第14页
    1.2 HDACs的概述第14-19页
        1.2.1 组蛋白去乙酰化酶的分类第15-17页
        1.2.2 底物的专一性第17-18页
        1.2.3 亚细胞定位第18页
        1.2.4 HDACs的组织表达第18-19页
        1.2.5 HDACs的胁迫应答第19页
    1.3 本课题研究的目的及意义第19-20页
    1.4 实验技术路线第20-21页
第2章 材料与方法第21-42页
    2.1 实验材料第21-26页
        2.1.1 植物材料第21页
        2.1.2 工程菌株及载体第21页
        2.1.3 常用试剂以及抗生素第21-22页
        2.1.4 主要实验仪器及设备第22页
        2.1.5 试验所需引物序列第22-23页
        2.1.6 试验主要溶液及培养基的配置第23-26页
    2.2 试验方法第26-42页
        2.2.1 植物材料的培养及RNA的提取第26-27页
        2.2.2 OsSRT目的基因片段的克隆第27-31页
        2.2.3 利用Gateway技术进行表达载体的构建第31-35页
        2.2.4 植物表达载体转化农杆菌第35-36页
        2.2.5 利用农杆菌实现拟南芥的遗传转化第36-37页
        2.2.6 转基因植株的分子鉴定第37-38页
        2.2.7 转基因植株的抗逆性分析第38页
        2.2.8 逆境胁迫转基因拟南芥渗透调节物质测定:第38-40页
        2.2.9 植物材料抗氧化物酶活性测定第40-42页
第3章 结果与分析第42-66页
    3.1 实验材料的培养第42-43页
        3.1.1 水稻幼苗的培养第42页
        3.1.2 拟南芥幼苗的培养第42-43页
    3.2 RNA的提取第43-44页
    3.3 水稻OsSRT基因的克隆第44-47页
        3.3.1 RT-PCR扩增OsSRT基因的ORF片段第44页
        3.3.2 目的基因OsSRT阳性重组子的鉴定第44-47页
    3.4 植物表达载体的构建第47-50页
        3.4.1 TOPO中间载体的构建及鉴定第47-48页
        3.4.2 植物表达载体的构建及阳性克隆的鉴定第48-50页
    3.5 植物表达载体的农杆菌的遗传转化第50-52页
        3.5.1 农杆菌目的基因的PCR验证第50-51页
        3.5.2 阳性克隆的质粒酶切鉴定第51-52页
    3.6 转基因拟南芥的筛选与鉴定第52-53页
        3.6.1 转基因拟南芥T0代的筛选第52页
        3.6.2 转基因拟南芥T2纯合株系的鉴定第52-53页
    3.7 转基因植物的分子检测第53-54页
    3.8 逆境胁迫下转基因植株的表现第54-55页
        3.8.1 植株逆境处理生长状况的测定第54-55页
    3.9 逆境胁迫下对转基因植株渗透调节物质的影响第55-61页
        3.9.1 渗透调节物质标准曲线的制作第55-56页
        3.9.2 胁迫处理对转基因植株脯氨酸含量的影响第56-58页
        3.9.3 胁迫处理下对转基因植株可溶性蛋白的影响第58-61页
    3.10 胁迫处理对转基因植株抗氧化系统的影响第61-66页
        3.10.1 盐胁迫对转基因植株抗氧化系统的影响第61-62页
        3.10.2 干旱胁迫下对转基因植株抗氧化系统的影响第62-63页
        3.10.3 氧化胁迫对转基因植物抗氧化物酶的影响第63-66页
第4章 讨论第66-68页
    4.1 载体的选择第66页
    4.2 试验结果分析第66页
    4.3 试验思路的分析第66-67页
    4.4 后期试验测定指标的选择第67页
    4.5 未来试验设计思路第67-68页
结论第68-70页
参考文献第70-77页
致谢第77-78页

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