| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 英文缩略词中英文注释表 | 第14-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-23页 |
| 1.1. 概述 | 第15-16页 |
| 1.2. 脐带间质干细胞 | 第16-21页 |
| 1.2.1. 干细胞 | 第16页 |
| 1.2.2. 间质干细胞 | 第16-17页 |
| 1.2.3. 脐带间质干细胞 | 第17-18页 |
| 1.2.4. 间质干细胞的分离及鉴定 | 第18-19页 |
| 1.2.5. 间质干细胞的临床应用 | 第19-20页 |
| 1.2.6. 间质干细胞与肿瘤 | 第20-21页 |
| 1.2.7. 间质干细胞与毒理学研究 | 第21页 |
| 1.3. 尼古丁 | 第21-23页 |
| 1.3.1. 尼古丁概述 | 第21-22页 |
| 1.3.2. 尼古丁和间质干细胞 | 第22页 |
| 1.3.3. 尼古丁与肿瘤的研究 | 第22-23页 |
| 第二章 研究目的、方法、方案及意义 | 第23-26页 |
| 2.1. 研究目的 | 第23页 |
| 2.2. 研究方法 | 第23-24页 |
| 2.3. 实验设计方案 | 第24-25页 |
| 2.3.1. 间质干细胞的分离和鉴定 | 第24页 |
| 2.3.2. 尼古丁对间质干细胞生物学特性的影响 | 第24-25页 |
| 2.3.3. 尼古丁处理后的间质干细胞对A549生物特性的影响 | 第25页 |
| 2.4. 研究意义 | 第25-26页 |
| 第三章 间质干细胞的分离培养和鉴定 | 第26-39页 |
| 3.1. 试剂材料与仪器 | 第26-27页 |
| 3.1.1. 标本来源 | 第26页 |
| 3.1.2. 实验试剂和耗材 | 第26-27页 |
| 3.1.3. 实验仪器 | 第27页 |
| 3.2. 相关溶液的配制 | 第27-28页 |
| 3.2.1. L-DMEM培养液（1000 ml） | 第27-28页 |
| 3.2.2. 双抗的配制 | 第28页 |
| 3.2.3. 0.25%胰酶的配制（1000 ml） | 第28页 |
| 3.2.4. PBS的配制（1000 ml） | 第28页 |
| 3.2.5. 冻存液的配制(10 ml) | 第28页 |
| 3.3. 实验方法 | 第28-33页 |
| 3.3.1. 细胞的原代分离培养 | 第28-29页 |
| 3.3.2. 细胞的传代培养 | 第29页 |
| 3.3.3. 细胞的冻存与复苏 | 第29-30页 |
| 3.3.4. 细胞表面标记鉴定 | 第30页 |
| 3.3.5. 细胞多向分化潜能鉴定 | 第30-33页 |
| 3.4. 实验结果 | 第33-36页 |
| 3.4.1. 细胞分离培养和鉴定 | 第33-34页 |
| 3.4.2. 细胞多向分化潜能鉴定 | 第34-35页 |
| 3.4.3. 细胞表面标记鉴定 | 第35-36页 |
| 3.5. 讨论 | 第36-39页 |
| 第四章 尼古丁对脐带间质干细胞生物学特性的影响 | 第39-52页 |
| 4.1. 试剂材料与仪器 | 第39-40页 |
| 4.1.1. 实验试剂和耗材 | 第39页 |
| 4.1.2. 实验仪器 | 第39-40页 |
| 4.2. 相关溶液的配制 | 第40-41页 |
| 4.2.1. MTT的配制 | 第40页 |
| 4.2.2. 不同浓度的尼古丁的配制 | 第40页 |
| 4.2.3. Western-blot相关试剂的配制 | 第40-41页 |
| 4.3. 实验方法 | 第41-44页 |
| 4.3.1. 尼古丁对间质干细胞增殖的影响 | 第41页 |
| 4.3.2. 尼古丁对间质干细胞迁移能力的影响 | 第41页 |
| 4.3.3. 尼古丁对间质干细胞周期和凋亡的影响 | 第41-42页 |
| 4.3.4. 细胞蛋白的提取 | 第42页 |
| 4.3.5. Western-blot | 第42-43页 |
| 4.3.6. 免疫荧光 | 第43页 |
| 4.3.7. 统计分析 | 第43-44页 |
| 4.4. 实验结果 | 第44-50页 |
| 4.4.1. 尼古丁对间质干细胞增殖和形态的影响 | 第44-45页 |
| 4.4.2. 尼古丁对间质干细胞迁移能力的影响 | 第45-46页 |
| 4.4.3. 尼古丁对间质干细胞周期的影响 | 第46-47页 |
| 4.4.4. 尼古丁对间质干细胞凋亡的影响 | 第47-48页 |
| 4.4.5. 尼古丁对间质干细胞相关蛋白表达的影响 | 第48-50页 |
| 4.5. 讨论 | 第50-52页 |
| 第五章 尼古丁处理后的脐带间质干细胞对肺癌细胞株A549生物特性的影响 | 第52-63页 |
| 5.1. 试剂材料与仪器 | 第52-53页 |
| 5.1.1. 肺癌细胞株和实验裸鼠 | 第52页 |
| 5.1.2. 实验试剂和耗材 | 第52页 |
| 5.1.3. 实验仪器 | 第52-53页 |
| 5.2. 相关溶液的配制 | 第53页 |
| 5.2.1. 抗原修复液的配制 | 第53页 |
| 5.2.2. 免疫组化专用PBS的配制 | 第53页 |
| 5.3. 实验方法 | 第53-56页 |
| 5.3.1. 间质干细胞与A549共培养体系的建立 | 第53-54页 |
| 5.3.2. Transwell迁移实验 | 第54页 |
| 5.3.3. 划痕实验 | 第54页 |
| 5.3.4. 平板克隆实验 | 第54-55页 |
| 5.3.5. 裸鼠皮下致瘤 | 第55页 |
| 5.3.6. 组织切片HE染色 | 第55页 |
| 5.3.7. 免疫组化 | 第55-56页 |
| 5.3.8. 统计分析 | 第56页 |
| 5.4. 实验结果 | 第56-61页 |
| 5.4.1. 共培养下对A549迁移能力的影响 | 第56-58页 |
| 5.4.2. 共培养下对A549克隆形成能力的影响 | 第58-59页 |
| 5.4.3. 共培养促进A549体内生长 | 第59-60页 |
| 5.4.4. 肿瘤组织病理切片分析 | 第60-61页 |
| 5.5. 讨论 | 第61-63页 |
| 第六章 主要结论与展望 | 第63-64页 |
| 6.1. 主要结论 | 第63页 |
| 6.2. 展望 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文、获奖及参加会议 | 第75页 |
| 一、发表论文情况 | 第75页 |
| 二、获奖情况 | 第75页 |
| 三、参加会议情况 | 第75页 |
