| 中文摘要 | 第7-9页 |
| 英文摘要 | 第9-10页 |
| 中英文缩略语表 | 第11-12页 |
| 第一部分 蛋白酶活化受体-2(PAR_2)下调miR-125b促进肿瘤细胞迁移 | 第12-69页 |
| 引言 | 第12-16页 |
| 材料与方法 | 第16-42页 |
| 一 实验材料 | 第16-26页 |
| 二 主要仪器设备 | 第26页 |
| 三 实验方法 | 第26-41页 |
| 四 统计学方法 | 第41-42页 |
| 结果 | 第42-63页 |
| 1. PAR_2活化促进肿瘤细胞迁移 | 第42-43页 |
| 2. miR-125b在PAR_2敲降的HT29细胞系中表达水平显著上调 | 第43-45页 |
| 2.1 敲降PAR_2对HT29细胞miRNAs表达谱的影响 | 第43-44页 |
| 2.2 miR-125b在shPAR_2 CRC细胞株中表达上调 | 第44-45页 |
| 2.3 PAR_2活化下调细胞中miR-125b表达 | 第45页 |
| 3. miR-125b介导PAR_2诱导的肿瘤细胞迁移 | 第45-47页 |
| 4. 鉴定PAR_2和miR-125b共同调控的与细胞迁移相关的靶基因 | 第47-54页 |
| 4.1 miR-125b下游靶基因的初步确立 | 第47-48页 |
| 4.2 基于PAR_2敲降细胞株基因转录组分析 | 第48-49页 |
| 4.3 Gab2是miR-125b和PAR_2共同调控的下游靶基因 | 第49-54页 |
| 4.3.1 PAR_2活化/敲降对Gab2表达的影响 | 第49-50页 |
| 4.3.2 过表达/抑制miR-125b对Gab2表达的影响 | 第50-51页 |
| 4.3.3 与miR-125b互补结合的Gab2 3'UTR序列在各物种间高度保守 | 第51页 |
| 4.3.4 Luciferase Reportor验证Gab2是miR-125b的直接靶基因 | 第51-53页 |
| 4.3.5 miR-125b介导PAR_2诱导Gab2上调 | 第53-54页 |
| 5. Gab2介导PAR2诱导的细胞迁移 | 第54-55页 |
| 6. PAR_2、miR-125b、Gab2在小鼠结肠癌中的表达 | 第55-59页 |
| 6.1 AOM-DSS模型能有效模拟人的结肠炎相关结肠癌的发生和发展 | 第55-56页 |
| 6.2 PAR_2在结肠炎相关结肠癌中表达升高 | 第56-57页 |
| 6.3 miR-125b在结肠炎相关结肠癌中表达下降 | 第57-58页 |
| 6.4 Gab2在结肠炎相关结肠癌中表达上调 | 第58-59页 |
| 7. PAR_2、miR-125b、Gab2在结肠癌临床样本中的相关性研究 | 第59-61页 |
| 8. PAR_2、miR-125b、Gab2在卵巢癌临床样本中的相关性研究 | 第61-62页 |
| 9. PAR_2与Gab2在肺癌组织芯片中的相关性研究 | 第62-63页 |
| 讨论 | 第63-68页 |
| 结论 | 第68-69页 |
| 第二部分 蛋白酶活化受体-2(PAR_2)促进miR-125b下调的机制研究 | 第69-96页 |
| 引言 | 第69-74页 |
| 材料与方法 | 第74-83页 |
| 一 实验材料 | 第74-75页 |
| 二 主要仪器设备 | 第75-76页 |
| 三 实验方法 | 第76-82页 |
| 四 统计学方法 | 第82-83页 |
| 结果 | 第83-90页 |
| 1. PAR_2引起miR-125b下调与DNA甲基化无关 | 第83-85页 |
| 1.1 5'Aza-CR阻断PAR_2诱导的miR-125b表达下调 | 第83页 |
| 1.2 miR-125b启动子区CpG岛分析 | 第83-84页 |
| 1.3 PAR_2活化与miR-125b启动子甲基化无关(MSP) | 第84-85页 |
| 2. PAR_2活化与Nsun2介导的miR-125b RNA甲基化相关 | 第85-90页 |
| 2.1 PAR_2活化促进Nsun2升高 | 第85-86页 |
| 2.2 抑制Nsun2表达,pre-miR-125b2和miR-125b不再受PAR_2-AP影响 | 第86-87页 |
| 2.3 PAR_2活化增加pre-miR-125b2 m~6A形式的甲基化 | 第87-88页 |
| 2.4 抑制Nsun2表达,细胞内Gab2表达不再受PAR_2-AP影响 | 第88-89页 |
| 2.5 Nsun2在结肠癌患者组织中的表达 | 第89-90页 |
| 讨论 | 第90-95页 |
| 结论 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-105页 |
| 基金资助 | 第105-106页 |
| 博士在读期间待发表论文及参加会议 | 第106-107页 |
| 文献综述 | 第107-116页 |
| 参考文献 | 第112-116页 |
| 致谢 | 第116-117页 |
| 个人简历 | 第117-118页 |
