| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第1章 绪论 | 第7-14页 |
| 1.1 本课题的来源及研究意义 | 第7页 |
| 1.2 基质金属蛋白酶 3（MMP-3）的基本介绍 | 第7-8页 |
| 1.2.1 MMP-3 的编码基因及结构 | 第7-8页 |
| 1.2.2 MMP-3 的生物学功能 | 第8页 |
| 1.3 放射性肠纤维化的发病机理 | 第8-9页 |
| 1.3.1 结构细胞及相关细胞因子参与放射性肠纤维化的发生 | 第8-9页 |
| 1.3.2 免疫细胞及相关细胞因子参与放射性肠纤维化发生 | 第9页 |
| 1.4 MMP-3 与放射性肠纤维化 | 第9-12页 |
| 1.4.1 放射性肠纤维化的发生及病理表现 | 第9-10页 |
| 1.4.2 放射性肠纤维化的发生发展及治疗手段 | 第10-11页 |
| 1.4.3 干细胞与放射性肠纤维化的关系 | 第11页 |
| 1.4.4 MMP-3 与放射性肠纤维化的关系 | 第11-12页 |
| 1.5 过表达MMP-3 蛋白作为修复放射性肠纤维化的靶点 | 第12-14页 |
| 1.5.1 基因修饰干细胞治疗方法的研究进展 | 第12页 |
| 1.5.2 基因修饰干细胞修复放射性肠纤维化的可能性 | 第12-14页 |
| 第2章 材料与方法 | 第14-26页 |
| 2.1 试剂、仪器与实验材料 | 第14-15页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第14-15页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第15页 |
| 2.1.3 实验材料 | 第15页 |
| 2.2 培养基及主要试剂配方 | 第15-17页 |
| 2.2.1 细胞培养液配方 | 第15页 |
| 2.2.2 菌体培养基配方 | 第15-16页 |
| 2.2.3 其他试剂配方 | 第16-17页 |
| 2.3 细胞培养 | 第17-18页 |
| 2.3.1 feeder饲养层细胞的制作 | 第17页 |
| 2.3.2 细胞复苏 | 第17页 |
| 2.3.3 细胞传代 | 第17-18页 |
| 2.3.4 细胞冻存 | 第18页 |
| 2.4 载体构建 | 第18-22页 |
| 2.4.1 目的基因扩增 | 第18-20页 |
| 2.4.2 表达载体构建 | 第20-22页 |
| 2.5 细胞转染 | 第22-24页 |
| 2.5.1 瞬时转染 | 第22-23页 |
| 2.5.2 稳定转染 | 第23-24页 |
| 2.6 Western Blot | 第24页 |
| 2.6.1 细胞总蛋白的提取 | 第24页 |
| 2.6.2 Western Blot免疫印迹法检测蛋白表达量 | 第24页 |
| 2.7 构建 3T3细胞纤维化模型 | 第24-25页 |
| 2.8 照射后 3T3细胞与病毒感染的BM-MSCs共培养后形态变化 | 第25页 |
| 2.9 MTT实验 | 第25-26页 |
| 第3章 实验结果 | 第26-37页 |
| 3.1 MMP-3 基因钓取及测序鉴定 | 第26-28页 |
| 3.1.1 MMP-3 基因扩增 | 第26-27页 |
| 3.1.2 MMP-3 基因测序鉴定 | 第27-28页 |
| 3.2 LV-MMP3EGFP过表达慢病毒表达质粒的构建及鉴定 | 第28-30页 |
| 3.3 慢病毒载体质粒转染GP2-293T细胞 | 第30-31页 |
| 3.4 病毒感染ES和瞬时转染BM-MSCs细胞中GFP蛋白的表达 | 第31-32页 |
| 3.5 病毒感染ES细胞中MMP-3 蛋白的表达 | 第32页 |
| 3.6 3T3细胞与修饰的干细胞共培养 | 第32-34页 |
| 3.6.1 3T3细胞与修饰的ES细胞共培养后TGF-β的表达 | 第32-33页 |
| 3.6.2 3T3细胞与修饰的BM-MSCs细胞共培养后细胞变化 | 第33-34页 |
| 3.7 3T3细胞纤维化模型建立 | 第34页 |
| 3.8 照射后 3T3与BM-MSCs共培养形态变化 | 第34-36页 |
| 3.9 MTT | 第36-37页 |
| 第4章 讨论 | 第37-39页 |
| 第5章 结论 | 第39-40页 |
| 致谢 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-45页 |
| 作者简介 | 第45页 |
| 攻读硕士学位期间研究成果 | 第45页 |
