| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 主要英文缩略词对照表 | 第10-11页 |
| 第1章 前言 | 第11-37页 |
| 1.1 PRDX3的研究现状 | 第11-21页 |
| 1.1.1 细胞的氧化应激保护机制 | 第11页 |
| 1.1.2 PRDX家族成员及调节活性 | 第11-17页 |
| 1.1.3 PRDX与细胞信号传导研究进展 | 第17-20页 |
| 1.1.4 PRDX3相关研究进展 | 第20-21页 |
| 1.2 PRDX3与HCC的发展研究现状 | 第21-22页 |
| 1.3 MMP的功能及与肿瘤的关系研究进展 | 第22-23页 |
| 1.4 UNG1研究现状 | 第23-35页 |
| 1.4.1 UNG1的概述 | 第23-24页 |
| 1.4.2 UNG家族的功能 | 第24-25页 |
| 1.4.3 UNG家族成员及DNA修复功能 | 第25-28页 |
| 1.4.4 线粒体氧化损伤与疾病的关系 | 第28-30页 |
| 1.4.5 氧化应激与mt DNA损伤 | 第30-31页 |
| 1.4.6 mt DNA损伤的检测方法 | 第31-32页 |
| 1.4.7 参与DNA修复相关蛋白的研究进展 | 第32-34页 |
| 1.4.8 Lonp1介导线粒体蛋白降解 | 第34-35页 |
| 1.4.9 PRDX3与UNG1的相互作用 | 第35页 |
| 1.5 研究目的 | 第35-37页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第37-61页 |
| 2.1 实验材料 | 第37-38页 |
| 2.1.1 抗体 | 第37页 |
| 2.1.2 细胞培养 | 第37页 |
| 2.1.3 分子生物学实验试剂 | 第37-38页 |
| 2.1.4 蛋白质组学实验试剂 | 第38页 |
| 2.2 实验仪器 | 第38-39页 |
| 2.3 实验方法 | 第39-61页 |
| 2.3.1 细胞培养 | 第39页 |
| 2.3.2 UNG1过表达稳定转染细胞系的建立 | 第39页 |
| 2.3.3 PRDX3过表达稳转细胞系的建立 | 第39-46页 |
| 2.3.4 PRDX3沉默稳转细胞系的建立 | 第46-50页 |
| 2.3.5 细胞瞬时转染 | 第50页 |
| 2.3.6 免疫共沉淀（Co-IP）实验 | 第50-51页 |
| 2.3.7 免疫荧光实验 | 第51页 |
| 2.3.8 细胞生长曲线测定（CCK-8法） | 第51-52页 |
| 2.3.9 H2O2刺激下半数致死率（IC_(50)）的测定 | 第52页 |
| 2.3.10 H_2O_2刺激下胞内ROS的测定 | 第52页 |
| 2.3.11 线粒体及mtDNA的分离 | 第52-53页 |
| 2.3.12 DNA氧化产物 8-OH-dG的检测 | 第53-54页 |
| 2.3.13 胞内ATP含量的检测 | 第54页 |
| 2.3.14 细胞划痕实验 | 第54-55页 |
| 2.3.15 Transwell实验 | 第55页 |
| 2.3.16 明胶酶谱实验 | 第55-56页 |
| 2.3.17 Pulldown UNG1相互作用蛋白 | 第56页 |
| 2.3.18 含Uoligo DNA pulldown相互作用蛋白 | 第56-57页 |
| 2.3.19 小鼠肝脏实质细胞的分离 | 第57页 |
| 2.3.20 蛋白样品处理与质谱测定 | 第57-61页 |
| 第3章 ROS介导PRDX3与UNG1的相互作用 | 第61-77页 |
| 3.1 UNG1过表达降低mtDNA的氧化损伤 | 第61-64页 |
| 3.1.1 mtDNA提取及纯度验证 | 第61-62页 |
| 3.1.2 ELISA标准曲线的绘制 | 第62页 |
| 3.1.3 A549wt细胞中8-OH-dG的水平测定 | 第62-63页 |
| 3.1.4 UNG1（+）中8-OH-dG的水平测定 | 第63-64页 |
| 3.2 氧化应激介导PRDX3-UNG1的相互作用 | 第64-67页 |
| 3.2.1 H_2O_2介导UNG1与PRDX3形成复合体 | 第64-65页 |
| 3.2.2 反向沉淀PRDX3验证PRDX3-UNG1相互作用 | 第65页 |
| 3.2.3 含U的oligo DNA pull down PRDX3-UNG1复合体 | 第65-66页 |
| 3.2.4 原代细胞中验证ROS介导的PRDX3-UNG1相互作用 | 第66-67页 |
| 3.3 PRDX3-UNG1通过二硫键相互结合 | 第67-69页 |
| 3.3.1 Non-reducing条件验证二硫键结合方式 | 第67页 |
| 3.3.2 pLink鉴定PRDX3-UNG1肽段交联位点 | 第67-69页 |
| 3.4 PRDX3负调控UNG1的降解 | 第69-70页 |
| 3.5 ROS介导UNG1的降解 | 第70-73页 |
| 3.5.1 A549wt细胞中验证ROS介导的UNG1降解 | 第70页 |
| 3.5.2 原代细胞中验证ROS介导的UNG1降解 | 第70-71页 |
| 3.5.3 UNG1降解机制探索 | 第71-72页 |
| 3.5.4 Lonp1在ROS介导的UNG1降解中发挥作用 | 第72-73页 |
| 3.6 讨论 | 第73-76页 |
| 3.7 小结 | 第76-77页 |
| 第4章 PRDX3影响HCC发生的作用机制研究 | 第77-99页 |
| 4.1 PRDX3敲低稳转细胞系的构建与验证 | 第77-79页 |
| 4.2 PRDX3过表达稳转细胞系的构建与验证 | 第79-81页 |
| 4.3 PRDX3对细胞增殖速度的影响 | 第81-82页 |
| 4.4 PRDX3对抗氧化应激能力的影响 | 第82-87页 |
| 4.4.1 PRDX3改变细胞对氧化应激的敏感度 | 第82-84页 |
| 4.4.2 PRDX3调节胞内ROS水平 | 第84-85页 |
| 4.4.3 PRDX3保护线粒体DNA不受氧化 | 第85-87页 |
| 4.5 敲低PRDX3的蛋白质组学分析 | 第87-96页 |
| 4.5.1 敲低PRDX3的组学验证 | 第87-88页 |
| 4.5.2 组学数据GO分析和STRING分析 | 第88-90页 |
| 4.5.3 敲低PRDX3降低胞内ATP的合成 | 第90-92页 |
| 4.5.4 敲低PRDX3提升肿瘤细胞的迁移能力 | 第92-96页 |
| 4.6 讨论 | 第96-98页 |
| 4.7 小结 | 第98-99页 |
| 第5章 总结与展望 | 第99-106页 |
| 5.1 论文总结 | 第99-104页 |
| 5.1.1 PRDX3-UNG1相互作用的机制研究 | 第99-102页 |
| 5.1.2 PRDX3参与HCC发生的作用机制研究 | 第102-104页 |
| 5.2 论文展望 | 第104-106页 |
| 5.2.1 对PRDX3-UNG1相互作用功能的思考 | 第104页 |
| 5.2.2 对ROS与PRDX3保护机制的关系的思考 | 第104-106页 |
| 参考文献 | 第106-122页 |
| 致谢 | 第122-124页 |
| 附录A | 第124-144页 |
| 附录B | 第144-145页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第145页 |
