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毛果杨PtrMYB-like基因的功能研究

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
1 绪论第8-20页
    1.1 植物MYB转录因子的结构与分类第8-9页
    1.2 植物MYB转录因子的进化过程第9-10页
    1.3 MYB-related转录因子的分类及进化第10-12页
    1.4 植物花青素的生物合成途径第12-15页
        1.4.1 MYB转录因子调控花青素合成第13页
        1.4.2 MBW复合物调控花青素合成第13-15页
    1.5 MYB转录因子对植物次生生长的作用第15-18页
        1.5.1 转录因子调控次生壁合成网络第15-16页
        1.5.2 MYB转录激活因子参与次生壁合成第16-17页
        1.5.3 MYB转录抑制因子参与次生壁合成第17-18页
    1.6 本研究的目的与意义第18-20页
2 材料与方法第20-33页
    2.1 植物材料第20页
    2.2 菌株及载体第20页
    2.3 主要试剂及培养基第20-21页
    2.4 实验仪器第21页
    2.5 实验方法第21-33页
        2.5.1 数据库搜索和序列分析第21页
        2.5.2 植物基因组DNA的提取第21-22页
        2.5.3 植物总RNA的提取第22页
        2.5.4 mRNA反转录合成cDNA第22-23页
        2.5.5 引物设计第23-24页
        2.5.6 载体构建第24-26页
        2.5.7 目的DNA片段胶回收第26页
        2.5.8 大肠杆菌转化第26页
        2.5.9 质粒提取第26-27页
        2.5.10 农杆菌感受态的转化第27页
        2.5.11 拟南芥转化第27-28页
        2.5.12 拟南芥种子的消毒和萌发第28页
        2.5.13 花青素含量的测定第28页
        2.5.14 84K杨树遗传转化第28-29页
        2.5.15 半定量RT-PCR第29-30页
        2.5.16 实时荧光定量PCR第30页
        2.5.17 植物组织石蜡包埋与切片第30-32页
        2.5.18 细胞壁组织化学染色第32页
        2.5.19 显微镜观察第32-33页
3 结果与分析第33-52页
    3.1 毛果杨PtrMYB-like结构域分析第33-34页
    3.2 毛果杨PtrMYB-like组织表达特征第34-35页
    3.3 毛果杨PtrMYB-like基因在拟南芥中过量表达第35-37页
    3.4 毛果杨PtrMYB-like蛋白的亚细胞定位第37-38页
    3.5 毛果杨PtrMYB-like基因正调控拟南芥花青素的合成代谢第38-42页
    3.6 毛果杨PtrMYB-like基因正调控拟南芥次生壁的合成代谢第42-44页
    3.7 毛果杨PtrMYB-like-amiRNA转基因杨树的制备第44-52页
4 讨论第52-54页
    4.1 毛果杨PtrMYB-like是一个1R-MYB蛋白第52页
    4.2 毛果杨PtrMYB-like蛋白定位于细胞核第52页
    4.3 毛果杨PtrMYB-like基因同时参与花青素和次生壁合成第52-53页
    4.4 毛果杨中可能存在与PtrMYB-like功能冗余的基因第53-54页
5 结论第54-55页
参考文献第55-66页
附录 实时荧光定量PCR中所用的引物序列第66-67页
攻读学位期间发表的学术论文第67-68页
致谢第68-69页

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