摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
第一章 绪论 | 第8-16页 |
1.1 L-丝氨酸的概述 | 第8-10页 |
1.1.1 L-丝氨酸的理化性质 | 第8页 |
1.1.2 L-丝氨酸的生理意义及应用 | 第8-9页 |
1.1.3 L-丝氨酸的生产方法 | 第9-10页 |
1.2 谷氨酸棒杆菌产L-丝氨酸的研究 | 第10-11页 |
1.2.1 谷氨酸棒杆菌中L-丝氨酸的合成代谢途径 | 第10-11页 |
1.2.2 谷氨酸棒杆菌产L-丝氨酸的代谢工程改造 | 第11页 |
1.3 谷氨酸棒杆菌碳源利用概述 | 第11-14页 |
1.3.1 磷酸转移酶系统介导的糖质转运 | 第11-13页 |
1.3.2 非磷酸转移酶系统介导的葡萄糖转运 | 第13页 |
1.3.3 谷氨酸棒杆菌糖质利用的代谢调控 | 第13-14页 |
1.4 本论文立题依据 | 第14-15页 |
1.5 研究内容 | 第15-16页 |
第二章材料与方法 | 第16-25页 |
2.1 实验材料 | 第16-19页 |
2.1.1 菌株和质粒 | 第16页 |
2.1.2 引物 | 第16-18页 |
2.1.3 培养基 | 第18页 |
2.1.4 仪器设备 | 第18-19页 |
2.1.5 实验试剂 | 第19页 |
2.2 实验方法 | 第19-25页 |
2.2.1 菌株培养 | 第19页 |
2.2.2 感受态制备及转化 | 第19页 |
2.2.3 基因组DNA与质粒DNA提取 | 第19页 |
2.2.4 DNA片段的回收 | 第19-20页 |
2.2.5 表达质粒构建 | 第20-21页 |
2.2.6 敲除及基因组过表达质粒构建 | 第21-22页 |
2.2.7 重组菌株构建 | 第22页 |
2.2.8 分析方法 | 第22-25页 |
第三章 结果与讨论 | 第25-44页 |
3.1 非磷酸转移酶(非PTS)葡萄糖利用途径的激活 | 第25-28页 |
3.1.1 谷氨酸棒杆菌△SSAAI利用蔗糖和葡萄糖发酵性能比较 | 第25-26页 |
3.1.2 重组菌S△ptsH的构建 | 第26-27页 |
3.1.3 重组菌S△ptsH的发酵性能 | 第27页 |
3.1.4 分析与讨论 | 第27-28页 |
3.2 不同强化策略对非PTS重组菌生长和产酸的影响 | 第28-34页 |
3.2.1 iolT1过表达、ppgK过表达或iol R敲除重组菌的构建 | 第28-30页 |
3.2.2 iolT1基因过表达对非PTS重组菌的影响 | 第30-31页 |
3.2.3 ppgK基因过表达对非PTS重组菌的影响 | 第31-32页 |
3.2.4 iol R敲除过表达对非PTS重组菌的影响 | 第32-33页 |
3.2.5 分析与讨论 | 第33-34页 |
3.3 强化策略整合对非PTS重组菌的影响 | 第34-39页 |
3.3.1 强化策略整合重组菌的构建 | 第34-35页 |
3.3.2 基因组整合表达iolT1和ppgK基因对重组菌的影响 | 第35-36页 |
3.3.3 敲除iol R基因对重组菌的影响 | 第36-37页 |
3.3.4 胞内PEP、PYR含量及相关酶活测定 | 第37-39页 |
3.3.5 分析与讨论 | 第39页 |
3.4 糖酵解途径基因过表达对非PTS重组菌的影响 | 第39-44页 |
3.4.1 糖酵解途径基因过表达重组菌的构建 | 第40-41页 |
3.4.2 糖酵解途径基因过表达重组菌的相关酶活测定 | 第41页 |
3.4.3 糖酵解途径基因过表达重组菌发酵性能 | 第41-42页 |
3.4.4 分析与讨论 | 第42-44页 |
主要结论与展望 | 第44-46页 |
主要结论 | 第44页 |
展望 | 第44-46页 |
致谢 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-51页 |
附录1:作者在攻读硕士期间发表的论文 | 第51页 |