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斯氏艾美耳球虫TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立

摘要第3-4页
Abstract第4页
缩略语表第8-9页
1 前言第9-24页
    1.1 兔球虫概述第10-14页
        1.1.1 兔球虫病流行特点第10-11页
        1.1.2 兔球虫种类第11-12页
        1.1.3 兔球虫卵囊形态特征第12-13页
        1.1.4 兔球虫基因组特点第13-14页
    1.2 斯氏艾美球虫概述第14-18页
        1.2.1 斯氏艾美耳球虫国内流行状况第14页
        1.2.2 斯氏艾美耳球虫卵囊形态特征第14-15页
        1.2.3 斯氏艾美耳球虫的发育史第15-17页
        1.2.4 斯氏艾美耳球虫病临床症状与病理变化第17-18页
        1.2.5 斯氏艾美耳球虫病诊断第18页
    1.3 兔球虫分子生物学鉴定第18-21页
        1.3.1 基于核基因组的鉴定技术第18-20页
        1.3.2 基于线粒体基因组的鉴定技术第20页
        1.3.3 基于顶质体基因组的鉴定技术第20页
        1.3.4 不同鉴定技术的特点第20-21页
    1.4 实时荧光定量PCR原理第21-24页
        1.4.1 RT-PCR的定量原理第22页
        1.4.2 Ct值与荧光域值第22页
        1.4.3 TaqMan探针检测方法第22-24页
2 材料与方法第24-33页
    2.1 材料第24页
        2.1.1 虫种来源第24页
        2.1.2 主要试剂第24页
        2.1.3 主要仪器设备第24页
    2.2 方法第24-33页
        2.2.1 引物设计第24-25页
        2.2.2 艾美耳球虫卵囊DNA提取第25页
        2.2.3 艾美耳球虫COI序列PCR扩增与测序第25页
        2.2.4 兔艾美耳球虫COI序列分析比对第25页
        2.2.5 兔艾美耳球虫TaqMan荧光探针及引物设计第25页
        2.2.6 重组参比质粒构建第25-29页
        2.2.7 艾美耳球虫TaqMan探针实时荧光定量PCR检测体系建立第29-30页
        2.2.8 特异性试验第30页
        2.2.9 敏感性试验第30页
        2.2.10 标准曲线制作第30页
        2.2.11 重复性试验第30页
        2.2.12 动物试验第30-33页
3 结果第33-44页
    3.1 COI序列扩增结果第33-34页
    3.2 特异性检测结果第34-35页
    3.3 敏感性检测结果第35-36页
    3.4 标准曲线制作结果第36页
    3.5 重复性检测结果第36-37页
    3.6 动物样本检测结果第37-38页
    3.7 被检动物临床症状及肝脏病理变化第38-44页
4 讨论第44-46页
5 结论第46-47页
致谢第47-48页
参考文献第48-52页
作者简介第52页

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