| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 引言 | 第11-16页 |
| 1.1 鲍鱼养殖现状 | 第11页 |
| 1.2 贝类动物免疫机制 | 第11-12页 |
| 1.3 丝氨酸蛋白酶 | 第12-13页 |
| 1.4 丝氨酸蛋白酶参与的免疫反应途径 | 第13-15页 |
| 1.5 本研究的目的与意义 | 第15-16页 |
| 第2章 材料与方法 | 第16-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第16-19页 |
| 2.1.1 动物 | 第16页 |
| 2.1.2 实验试剂及材料 | 第16-17页 |
| 2.1.3 溶液及培养基配制 | 第17-19页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-34页 |
| 2.2.1 皱纹盘鲍SP的基因克隆 | 第19-22页 |
| 2.2.2 生物信息学分析 | 第22页 |
| 2.2.3 重组蛋白的原核表达及纯化 | 第22-25页 |
| 2.2.4 多克隆抗体的制备 | 第25页 |
| 2.2.5 重组蛋白的昆虫细胞-杆菌表达 | 第25-27页 |
| 2.2.6 重组蛋白性质的分析 | 第27-28页 |
| 2.2.7 皱纹盘鲍Hdh-SP、Rel/NF-κB、ALIn Fa、MEP和Caspase-8 基因表达量分析 | 第28-30页 |
| 2.2.8 皱纹盘鲍 Hdh-SP 蛋白的相对表达量分析 | 第30-31页 |
| 2.2.9 siRNA干扰 | 第31-33页 |
| 2.2.10 数据处理 | 第33页 |
| 2.2.11 皱纹盘鲍淋巴血细胞凋亡 | 第33-34页 |
| 第3章 结果与分析 | 第34-53页 |
| 3.1 Hdh-SP基因cDNA克隆 | 第34页 |
| 3.2 Hdh-SP生物信息学分析 | 第34-39页 |
| 3.2.1 Hdh-SP序列分析 | 第34-36页 |
| 3.2.2 Hdh-SP蛋白质理化参数 | 第36-37页 |
| 3.2.3 Hdh-SP二级结构与三级结构分析 | 第37-38页 |
| 3.2.4 丝氨酸蛋白酶序列相似性与系统进化树分析 | 第38-39页 |
| 3.3 Hdh-SP的重组表达 | 第39-45页 |
| 3.3.1 Hdh-SP的原核表达 | 第39-40页 |
| 3.3.2 重组Hdh-SP的表达与纯化 | 第40-41页 |
| 3.3.3 重组Hdh-SP多克隆抗体制备 | 第41-42页 |
| 3.3.4 Hdh-SP的细胞表达 | 第42-45页 |
| 3.4 基因相对表达量分析 | 第45-49页 |
| 3.4.1 Hdh-SP基因与蛋白的各组织表达差异性分析 | 第45-46页 |
| 3.4.2 Hdh-SP基因与蛋白在副溶血弧菌刺激后的表达分析 | 第46-47页 |
| 3.4.3 Rel/NF-κB、ALIn Fa、MEP和Caspase-8 基因在副溶血弧菌刺激后的表达分析 | 第47-49页 |
| 3.5 RNAi在皱纹盘鲍血淋巴细胞中抑制SP表达的结果 | 第49-51页 |
| 3.6 皱纹盘鲍血淋巴细胞的凋亡检测 | 第51-52页 |
| 3.7 Hdh-SP参与皱纹盘鲍免疫调节的机理 | 第52-53页 |
| 第4章 讨论 | 第53-57页 |
| 第5章 结论与展望 | 第57-59页 |
| 5.1 结论 | 第57-58页 |
| 5.2 展望 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-68页 |
| 在学期间发表的学术论文 | 第68页 |
