| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第12-34页 |
| 1.1 引言 | 第12页 |
| 1.2 NK细胞的发育 | 第12-34页 |
| 1.2.1 干细胞向NK细胞前体的发育 | 第15-18页 |
| 1.2.1.1 细胞因子指导干细胞向NKP转化 | 第15-17页 |
| 1.2.1.2 NKP细胞发育的转录调控 | 第17-18页 |
| 1.2.2 NKP向成熟NK细胞的发育 | 第18-21页 |
| 1.2.2.1 IL-15促进成熟NK细胞的分化 | 第19-21页 |
| 1.2.2.2 T-bet和Eomes促进成熟NK细胞的分化 | 第21页 |
| 1.2.3 NK细胞功能的极化 | 第21-30页 |
| 1.2.3.1 IL-2和IL-15诱发NK细胞的应答 | 第22-23页 |
| 1.2.3.2 IL-12,IL-18和IL-21增强NK细胞的杀伤能力 | 第23-24页 |
| 1.2.3.3 TGF-β和IL-10促进耐受性NK细胞的发育 | 第24-26页 |
| 1.2.3.4 TGF-β和IL-15维持调节性NK细胞的发育 | 第26-27页 |
| 1.2.3.5 NK细胞活化及功能的转录调控 | 第27-30页 |
| 1.2.4 NK细胞扩增 | 第30-34页 |
| 1.2.4.1 原代NK细胞扩增 | 第30-31页 |
| 1.2.4.2 骨髓及脐血CD34+细胞分化扩增NK细胞 | 第31页 |
| 1.2.4.3 改善NK细胞存活及功能 | 第31-34页 |
| 第二章 NK细胞的程序性扩增及功能鉴定 | 第34-88页 |
| 2.1 引言 | 第34页 |
| 2.2 实验材料 | 第34-46页 |
| 2.2.1 临床标本 | 第34-40页 |
| 2.2.2 细胞系 | 第40页 |
| 2.2.3 培养基及血清 | 第40页 |
| 2.2.4 流式抗体及刺激剂 | 第40-41页 |
| 2.2.5 淋巴细胞分离液 | 第41页 |
| 2.2.6 磷酸盐缓冲液 | 第41页 |
| 2.2.7 逆转录PCR试剂 | 第41-42页 |
| 2.2.8 电泳试剂 | 第42页 |
| 2.2.9 质粒及转染试剂 | 第42页 |
| 2.2.10 CD48,CD244,NTBA和CRACC序列 | 第42-44页 |
| 2.2.11 质粒抽提试剂 | 第44页 |
| 2.2.12 电转仪及电转试剂 | 第44页 |
| 2.2.13 CFSE | 第44页 |
| 2.2.14 细胞因子 | 第44-45页 |
| 2.2.15 胶原酶 | 第45页 |
| 2.2.16 MACS试剂 | 第45页 |
| 2.2.17 LB/LA培养基及LA平板 | 第45-46页 |
| 2.3 实验方法 | 第46-52页 |
| 2.3.1 脐血及外周血单个核细胞分离 | 第46页 |
| 2.3.2 蜕膜单个核细胞分离 | 第46页 |
| 2.3.3 MACS分离NK细胞 | 第46页 |
| 2.3.4 MACS分离CD34+干细胞 | 第46-47页 |
| 2.3.5 NK细胞体外分化扩增培养 | 第47页 |
| 2.3.6 细胞系培养 | 第47页 |
| 2.3.7 流式细胞术 | 第47-48页 |
| 2.3.8 质粒转化 | 第48页 |
| 2.3.9 质粒抽提 | 第48页 |
| 2.3.10 293T细胞过表达NTBA,CRACC,CD48和CD244 | 第48页 |
| 2.3.11 细胞结合实验 | 第48-49页 |
| 2.3.12 细胞杀伤实验 | 第49页 |
| 2.3.13 细胞干扰实验 | 第49页 |
| 2.3.14 抽提RNA | 第49-50页 |
| 2.3.15 反转录 | 第50页 |
| 2.3.16 PCR | 第50页 |
| 2.3.17 荧光定量PCR | 第50页 |
| 2.3.18 琼脂糖核酸电泳 | 第50页 |
| 2.3.19 酶联免疫吸附测定法(ELISA) | 第50-51页 |
| 2.3.20 基因芯片数据分析 | 第51页 |
| 2.3.21 数据分析 | 第51-52页 |
| 2.4 实验结果 | 第52-85页 |
| 2.4.1 NK细胞发育体系的建立 | 第52-56页 |
| 2.4.2 NK细胞程序性发育分化的特征 | 第56-58页 |
| 2.4.3 转录因子调控NK细胞的程序性发育分化 | 第58-63页 |
| 2.4.4 分化的NK细胞获得成熟NK细胞表型 | 第63-68页 |
| 2.4.5 分化的NK细胞获得杀伤性功能 | 第68-73页 |
| 2.4.6 分化的NK细胞表达SLAM家族相关受体 | 第73-76页 |
| 2.4.7 白血病细胞表达SLAM家族受体相关的配体 | 第76-80页 |
| 2.4.8 SLAM-SLAML相互作用促进NK细胞杀伤白血病细胞 | 第80-85页 |
| 2.5 总结与讨论 | 第85-88页 |
| 参考文献 | 第88-112页 |
| 致谢 | 第112-114页 |
| 在读期间的研究成果 | 第114页 |
