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黄花蒿抗疟成分基因克隆与功能分析

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
缩写词(Abbreviation)第8-13页
第一章 绪论第13-20页
    1 黄花蒿青蒿素的开发利用第13-16页
        1.2 黄花蒿资源的优选与改良第13-14页
            1.2.1 资源优选第13页
            1.2.2 资源改良第13-14页
        1.3 黄花蒿栽培技术的优化第14页
        1.4 青蒿素提制技术第14-15页
        1.5 青蒿素质量安全控制技术第15-16页
            1.5.1 青蒿素分析检测技术第15页
            1.5.2 质量安全控制技术第15-16页
        1.6 青蒿素功能与产品开发第16页
    2 黄花蒿青蒿素耐药性的产生及其与黄酮类物质的协同作用第16-17页
    3 黄花蒿HMGR研究进展第17页
    4 黄花蒿黄酮类化合物研究进展第17-18页
    5 研究目的与意义第18-19页
    6 研究内容第19页
    7 技术路线第19-20页
第二章 黄花蒿HMGR启动子活性表达及核心序列分析第20-32页
    1 材料与方法第20-25页
        1.1 材料第20-21页
            1.1.1 材料第20页
            1.1.2 主要仪器设备第20页
            1.1.3 主要试剂第20-21页
        1.2 方法第21-25页
            1.2.1 黄花蒿DNA的提取第21页
            1.2.2 黄花蒿HMGR系列启动子的克隆第21页
            1.2.3 HMGR系列重组质粒的构建第21-23页
            1.2.4 HMGR系列植物表达载体的构建第23-24页
            1.2.5 HMGR系列启动子表达载体转化烟草第24-25页
            1.2.6 HMGR启动子的活性分析第25页
            1.2.7 HMGR启动子核心序列的筛选第25页
    2 结果与分析第25-30页
        2.1 黄花蒿DNA提取第25-26页
        2.2 HMGR系列启动子的克隆和载体质粒酶切片段和重组质粒的获得第26-27页
        2.3 HMGR系列启动子植物表达载体的PCR验证第27页
        2.4 HMGR系列启动子表达载体转化烟草的PCR验证第27-28页
        2.5 HMGR启动子的活性表达第28-29页
            2.5.1 HMGR启动子在转化烟草中不同部位的活性表达第28-29页
            2.5.2 胁迫条件对HMGR启动子活性的影响第29页
        2.6 HMGR启动子核心序列分析第29-30页
    3 小结第30-31页
    4 讨论第31-32页
第三章 黄花蒿AaF3H基因全长cDNA的克隆及其蛋白质特性分析第32-41页
    1 材料与方法第32-33页
        1.1 材料第32页
            1.1.1 主要仪器第32页
            1.1.2 主要试剂第32页
        1.2 方法第32-33页
            1.2.1 总RNA提取与检测第32页
            1.2.2 AaF3H5'-RACE-Ready cDNA的合成第32-33页
            1.2.3 AaF3H3'-RACE-Ready cDNA的合成第33页
            1.2.4 AaF3H5'-RACE PCR反应第33页
            1.2.5 AaF3H3'-RACE PCR反应第33页
            1.2.6 AaF3H基因的生物信息学分析第33页
    2 结果与分析第33-40页
        2.1 AaF3H基因全长cDNA克隆第33-34页
        2.2 AaF3H基因的ORF及其氨基酸序列的预测第34-35页
        2.3 AaF3H氨基酸序列的同源性分析第35-36页
        2.4 AaF3H氨基酸组成及理化性质分析第36-37页
        2.5 AaF3H蛋白亲水/疏水性分析第37页
        2.6 AaF3H蛋白信号肽预测第37页
        2.7 AaF3H磷酸化位点预测与分析第37-38页
        2.8 AaF3H蛋白二级结构和三级结构的预测与分析第38-39页
        2.9 黄花蒿AaF3H蛋白的保守域分析第39页
        2.10 黄花蒿AaF3H蛋白的跨膜结构预测与分析第39页
        2.11 AaF3H蛋白的系统发育树分析第39-40页
    3 小结第40页
    4 讨论第40-41页
第四章 黄花蒿AaF3H基因和AaFLS基因的克隆及转烟草研究第41-50页
    1 材料与方法第41-43页
        1.1 材料第41页
            1.1.1 主要原料第41页
            1.1.2 主要仪器设备第41页
            1.1.3 主要试剂第41页
        1.2 方法第41-43页
            1.2.1 黄花蒿RNA的提取第41-42页
            1.2.2 黄花蒿RNA逆转录成cDNA第42页
            1.2.3 黄花蒿AaF3H和AaFLS基因的克隆第42页
            1.2.4 AaF3H和AaFLS基因植物表达载体的构建第42页
            1.2.5 AaF3H和AaFLS基因植物表达载体侵染烟草第42-43页
            1.2.6 转基因烟草的检测第43页
            1.2.7 柚皮素缓冲液的制备第43页
            1.2.8 烟草中AaF3H和AaFLS基因表达产物的检测第43页
    2 结果与分析第43-49页
        2.1 黄花蒿KNA的提取第43-44页
        2.2 黄花蒿AaF3H和AaFLS基因的克隆第44页
        2.3 AaF3H和AaFLS基因的大肠杆菌验证第44-45页
        2.4 AaF3H和AaFLS基因植物表达载体的构建第45页
        2.5 转AaF3H和AaFLS基因烟草的获得第45-46页
        2.6 转AaF3H和AaFLS基因烟草的检测结果第46-47页
        2.7 过表达AaF3H和AaFLS基因烟草的柚皮素分析第47-49页
            2.7.1 过表达AaF3H和AaFLS基因对烟草转化柚皮素的影响第47页
            2.7.2 AaF3H和AaFLS转化其它成分分析第47-49页
    3 小结第49页
    4 讨论第49-50页
第五章 研究结论,创新点及展望第50-52页
    1 研究结论第50页
    2 创新点第50-51页
    3 研究展望第51-52页
参考文献第52-59页
致谢第59-60页
作者简介第60页

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