摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
缩写词(Abbreviation) | 第8-13页 |
第一章 绪论 | 第13-20页 |
1 黄花蒿青蒿素的开发利用 | 第13-16页 |
1.2 黄花蒿资源的优选与改良 | 第13-14页 |
1.2.1 资源优选 | 第13页 |
1.2.2 资源改良 | 第13-14页 |
1.3 黄花蒿栽培技术的优化 | 第14页 |
1.4 青蒿素提制技术 | 第14-15页 |
1.5 青蒿素质量安全控制技术 | 第15-16页 |
1.5.1 青蒿素分析检测技术 | 第15页 |
1.5.2 质量安全控制技术 | 第15-16页 |
1.6 青蒿素功能与产品开发 | 第16页 |
2 黄花蒿青蒿素耐药性的产生及其与黄酮类物质的协同作用 | 第16-17页 |
3 黄花蒿HMGR研究进展 | 第17页 |
4 黄花蒿黄酮类化合物研究进展 | 第17-18页 |
5 研究目的与意义 | 第18-19页 |
6 研究内容 | 第19页 |
7 技术路线 | 第19-20页 |
第二章 黄花蒿HMGR启动子活性表达及核心序列分析 | 第20-32页 |
1 材料与方法 | 第20-25页 |
1.1 材料 | 第20-21页 |
1.1.1 材料 | 第20页 |
1.1.2 主要仪器设备 | 第20页 |
1.1.3 主要试剂 | 第20-21页 |
1.2 方法 | 第21-25页 |
1.2.1 黄花蒿DNA的提取 | 第21页 |
1.2.2 黄花蒿HMGR系列启动子的克隆 | 第21页 |
1.2.3 HMGR系列重组质粒的构建 | 第21-23页 |
1.2.4 HMGR系列植物表达载体的构建 | 第23-24页 |
1.2.5 HMGR系列启动子表达载体转化烟草 | 第24-25页 |
1.2.6 HMGR启动子的活性分析 | 第25页 |
1.2.7 HMGR启动子核心序列的筛选 | 第25页 |
2 结果与分析 | 第25-30页 |
2.1 黄花蒿DNA提取 | 第25-26页 |
2.2 HMGR系列启动子的克隆和载体质粒酶切片段和重组质粒的获得 | 第26-27页 |
2.3 HMGR系列启动子植物表达载体的PCR验证 | 第27页 |
2.4 HMGR系列启动子表达载体转化烟草的PCR验证 | 第27-28页 |
2.5 HMGR启动子的活性表达 | 第28-29页 |
2.5.1 HMGR启动子在转化烟草中不同部位的活性表达 | 第28-29页 |
2.5.2 胁迫条件对HMGR启动子活性的影响 | 第29页 |
2.6 HMGR启动子核心序列分析 | 第29-30页 |
3 小结 | 第30-31页 |
4 讨论 | 第31-32页 |
第三章 黄花蒿AaF3H基因全长cDNA的克隆及其蛋白质特性分析 | 第32-41页 |
1 材料与方法 | 第32-33页 |
1.1 材料 | 第32页 |
1.1.1 主要仪器 | 第32页 |
1.1.2 主要试剂 | 第32页 |
1.2 方法 | 第32-33页 |
1.2.1 总RNA提取与检测 | 第32页 |
1.2.2 AaF3H5'-RACE-Ready cDNA的合成 | 第32-33页 |
1.2.3 AaF3H3'-RACE-Ready cDNA的合成 | 第33页 |
1.2.4 AaF3H5'-RACE PCR反应 | 第33页 |
1.2.5 AaF3H3'-RACE PCR反应 | 第33页 |
1.2.6 AaF3H基因的生物信息学分析 | 第33页 |
2 结果与分析 | 第33-40页 |
2.1 AaF3H基因全长cDNA克隆 | 第33-34页 |
2.2 AaF3H基因的ORF及其氨基酸序列的预测 | 第34-35页 |
2.3 AaF3H氨基酸序列的同源性分析 | 第35-36页 |
2.4 AaF3H氨基酸组成及理化性质分析 | 第36-37页 |
2.5 AaF3H蛋白亲水/疏水性分析 | 第37页 |
2.6 AaF3H蛋白信号肽预测 | 第37页 |
2.7 AaF3H磷酸化位点预测与分析 | 第37-38页 |
2.8 AaF3H蛋白二级结构和三级结构的预测与分析 | 第38-39页 |
2.9 黄花蒿AaF3H蛋白的保守域分析 | 第39页 |
2.10 黄花蒿AaF3H蛋白的跨膜结构预测与分析 | 第39页 |
2.11 AaF3H蛋白的系统发育树分析 | 第39-40页 |
3 小结 | 第40页 |
4 讨论 | 第40-41页 |
第四章 黄花蒿AaF3H基因和AaFLS基因的克隆及转烟草研究 | 第41-50页 |
1 材料与方法 | 第41-43页 |
1.1 材料 | 第41页 |
1.1.1 主要原料 | 第41页 |
1.1.2 主要仪器设备 | 第41页 |
1.1.3 主要试剂 | 第41页 |
1.2 方法 | 第41-43页 |
1.2.1 黄花蒿RNA的提取 | 第41-42页 |
1.2.2 黄花蒿RNA逆转录成cDNA | 第42页 |
1.2.3 黄花蒿AaF3H和AaFLS基因的克隆 | 第42页 |
1.2.4 AaF3H和AaFLS基因植物表达载体的构建 | 第42页 |
1.2.5 AaF3H和AaFLS基因植物表达载体侵染烟草 | 第42-43页 |
1.2.6 转基因烟草的检测 | 第43页 |
1.2.7 柚皮素缓冲液的制备 | 第43页 |
1.2.8 烟草中AaF3H和AaFLS基因表达产物的检测 | 第43页 |
2 结果与分析 | 第43-49页 |
2.1 黄花蒿KNA的提取 | 第43-44页 |
2.2 黄花蒿AaF3H和AaFLS基因的克隆 | 第44页 |
2.3 AaF3H和AaFLS基因的大肠杆菌验证 | 第44-45页 |
2.4 AaF3H和AaFLS基因植物表达载体的构建 | 第45页 |
2.5 转AaF3H和AaFLS基因烟草的获得 | 第45-46页 |
2.6 转AaF3H和AaFLS基因烟草的检测结果 | 第46-47页 |
2.7 过表达AaF3H和AaFLS基因烟草的柚皮素分析 | 第47-49页 |
2.7.1 过表达AaF3H和AaFLS基因对烟草转化柚皮素的影响 | 第47页 |
2.7.2 AaF3H和AaFLS转化其它成分分析 | 第47-49页 |
3 小结 | 第49页 |
4 讨论 | 第49-50页 |
第五章 研究结论,创新点及展望 | 第50-52页 |
1 研究结论 | 第50页 |
2 创新点 | 第50-51页 |
3 研究展望 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
作者简介 | 第60页 |