中文摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
第一章 综述 | 第15-23页 |
1.1 结构基元模型概述 | 第15-16页 |
1.2 蛋白质解折叠机理研究 | 第16-19页 |
1.2.1 蛋白质结构与解折叠 | 第16-17页 |
1.2.2 蛋白质解折叠中间态的研究 | 第17-18页 |
1.2.3 实验方法 | 第18页 |
1.2.4 理论方法 | 第18页 |
1.2.5 问题的提出 | 第18-19页 |
1.3 所选模型蛋白概述 | 第19-23页 |
1.3.1 溶菌酶 | 第19-20页 |
1.3.2 牛碳酸酐酶 | 第20-23页 |
第二章 结构基元模型 | 第23-35页 |
2.1 引言 | 第23页 |
2.2 蛋白质解折叠自由能计算方法 | 第23-24页 |
2.2.1 Tanford's模型 | 第23页 |
2.2.2 变性剂分子键合模型 | 第23-24页 |
2.2.3 线性外推法 | 第24页 |
2.3 结构基元模型 | 第24-34页 |
2.3.1 基本假定 | 第25-28页 |
2.3.2 物种分布 | 第28-34页 |
2.4 结论 | 第34-35页 |
第三章 结构基元模型在溶菌酶解折叠机理中的应用 | 第35-49页 |
3.1 引言 | 第35页 |
3.2 实验试剂和仪器 | 第35-36页 |
3.2.1 实验试剂 | 第35页 |
3.2.2 实验仪器 | 第35-36页 |
3.3 实验方法 | 第36-37页 |
3.3.1 溶液的配制 | 第36页 |
3.3.2 荧光光谱的测定 | 第36页 |
3.3.3 荧光相图法 | 第36-37页 |
3.3.4 荧光寿命的测定 | 第37页 |
3.4 结果与讨论 | 第37-47页 |
3.4.1 盐酸胍诱导溶菌酶解折叠 | 第37-42页 |
3.4.2 还原脲诱导溶菌酶解折叠 | 第42-46页 |
3.4.3 不同变性剂下溶菌酶的荧光寿命 | 第46-47页 |
3.5 结论 | 第47-49页 |
第四章 结构基元模型在牛碳酸酐酶解折叠研究中的应用 | 第49-65页 |
4.1 引言 | 第49页 |
4.2 实验试剂和仪器 | 第49-50页 |
4.2.1 实验试剂 | 第49-50页 |
4.2.2 实验仪器 | 第50页 |
4.3 实验方法 | 第50-54页 |
4.3.1 溶液的配制 | 第50页 |
4.3.2 荧光光谱的测定 | 第50页 |
4.3.3 牛碳酸酐酶残余活性的测定 | 第50-54页 |
4.3.4 荧光寿命的测定 | 第54页 |
4.3.5 圆二色谱(CD) | 第54页 |
4.4 结果与讨论 | 第54-62页 |
4.4.1 盐酸胍诱导牛碳酸酐酶解折叠 | 第54-60页 |
4.4.2 脲和还原脲诱导牛碳酸酐酶解折叠 | 第60-61页 |
4.4.3 不同变性剂下牛碳酸酐酶的荧光寿命 | 第61-62页 |
4.5 结论 | 第62-65页 |
第五章 总结与展望 | 第65-67页 |
参考文献 | 第67-73页 |
附 溶菌酶和牛碳酸酐酶热变性过程疏水作用探讨 | 第73-84页 |
1 引言 | 第73页 |
2 实验试剂和仪器 | 第73页 |
2.1 实验试剂 | 第73页 |
2.2 实验仪器 | 第73页 |
3 实验方法 | 第73-75页 |
3.1 溶菌酶热变性和热复性 | 第73-74页 |
3.2 牛碳酸酐酶(或apo-牛碳酸酐酶)热变性 | 第74页 |
3.3 硫磺素T检测蛋白纤维的形成 | 第74页 |
3.4 荧光共振光散射 | 第74页 |
3.5 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术 | 第74-75页 |
4 结果与讨论 | 第75-82页 |
4.1 温度诱导溶菌酶变性和复性 | 第75-78页 |
4.2 温度诱导BCA和BCA-EDTA变性 | 第78-81页 |
4.3 牛碳酸酐酶较溶菌酶更容易发生聚集原因探究 | 第81-82页 |
5 结论 | 第82-83页 |
参考文献 | 第83-84页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第84-85页 |
致谢 | 第85-86页 |
个人简况及联系方式 | 第86-88页 |