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甘蓝型油菜组织特异性启动子的分离与鉴定

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
1 文献综述第10-20页
   ·植物启动子概述第10页
   ·启动子的结构与分类第10-13页
     ·启动子的结构第10-11页
     ·启动子的分类第11-13页
   ·植物组织特异性启动子的研究动态第13-16页
     ·种子特异启动子第13-14页
     ·根特异启动子第14页
     ·花粉或花药特异启动子第14-15页
     ·维管组织特异性启动子第15页
     ·叶片特异启动子第15-16页
     ·其他组织器官特异启动子第16页
   ·植物启动子的研究方法第16页
   ·甘蓝型油菜组织特异启动子的研究进展第16-18页
   ·本研究的目的意义第18-20页
2 材料与方法第20-38页
   ·材料第20页
     ·植物材料第20页
     ·质粒与菌株第20页
   ·仪器设备与试剂第20-24页
     ·PCR反应引物第20-23页
     ·重要实验设备第23-24页
     ·主要实验试剂第24页
     ·自配试剂第24页
   ·实验方法与步骤第24-38页
     ·核酸提取及cDNA的合成第24-26页
     ·目的片段的亚克隆和测序第26-30页
     ·甘蓝型油菜组织特异表达基因的筛选和基因表达模式检测第30-31页
     ·甘蓝型油菜组织特异基因表达5’RACE克隆第31-32页
     ·甘蓝型油菜组织特异启动子表达载体的构建第32-33页
     ·农杆菌介导的表达载体转化甘蓝型油菜第33-35页
     ·转基因植株分子检测及GUS组织化学染色鉴定第35页
     ·启动子缺失载体构建第35-38页
3 结果与分析第38-64页
   ·组织特异表达候选基因筛选第38页
   ·特异表达基因组织特异性检测第38-42页
   ·特异表达基因5’RACE克隆第42-43页
   ·甘蓝型油菜组织特异启动子片段的克隆第43-51页
     ·甘蓝型油菜根特异启动子RO-4扩增与序列分析第43-45页
     ·甘蓝型油菜叶片特异启动子LE-7扩增与序列分析第45-47页
     ·甘蓝型油菜花特异启动子FL-1扩增与序列分析第47-48页
     ·甘蓝型油菜花蕾特异启动子FL-4扩增与序列分析第48-49页
     ·甘蓝型油菜根、茎秆和角果皮特异启动子ST-7扩增与序列分析第49-51页
   ·甘蓝型油菜组织特异启动子promoter-GUS表达载体构建第51-56页
     ·植物表达载体pCAMBIA1305.1骨架的制备第51-52页
     ·双酶切构建甘蓝型油菜组织特异启动子表达载体第52-55页
     ·重组载体转化根瘤农杆菌及鉴定第55-56页
   ·p1305.1-RO-4P和p1305.1-LE-7P载体遗传转化甘蓝型油菜及转基因植株鉴定第56-60页
     ·甘蓝型油菜的遗传转化第56-57页
     ·转基因再生植株的PCR检测第57-59页
     ·转基因再生植株的组织化学染色第59-60页
   ·缺失载体的克隆第60-64页
4 讨论第64-68页
   ·组织特异表达候选基因的获取第64-65页
   ·启动子顺式元件预测分析第65页
   ·启动子的promoter-GUS载体的构建第65-66页
   ·通过根癌农杆菌介导法转化甘蓝型油菜获得转基因植株第66-67页
   ·RO-4启动子和LE-7启动子表达的时空性第67页
   ·构建RO-4和LE-7缺失启动子的意义第67-68页
5 主要结论第68-70页
参考文献第70-76页
主要缩略词第76-78页
致谢第78-80页
硕士学习期间发表论文第80页
参与课题情况第80页

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