| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 1 前言 | 第9-22页 |
| ·甘蔗梢腐病研究进展 | 第9-10页 |
| ·甘蔗梢腐病病原菌研究进展 | 第10-15页 |
| ·甘蔗梢腐病病原菌 | 第10页 |
| ·镰刀菌(Fusarium)与寄主互作及镰刀菌致病相关基因研究进展 | 第10-14页 |
| ·镰刀菌基因组学研究进展 | 第14-15页 |
| ·丝状真菌的遗传转化 | 第15-17页 |
| ·CaCl_2-PEG介导转化法 | 第15页 |
| ·基因枪法 | 第15-16页 |
| ·限制性内切酶介导转化法 | 第16页 |
| ·电击转化 | 第16页 |
| ·转座子法 | 第16-17页 |
| ·根癌农杆菌介导转化法 | 第17页 |
| ·农杆菌介导真菌遗传转化研究进展 | 第17-20页 |
| ·农杆菌介导真菌遗传转化的原理 | 第17-18页 |
| ·影响农杆菌介导真菌遗传转化过程的因素 | 第18-19页 |
| ·农杆菌介导真菌遗传转化应用 | 第19-20页 |
| ·鉴定T-DNA插入位点 | 第20-21页 |
| ·研究目的意义 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-33页 |
| ·试验材料 | 第22-25页 |
| ·菌株及其保存 | 第22页 |
| ·培养基的配制 | 第22-23页 |
| ·抗生素及试剂的配置 | 第23-24页 |
| ·供试植物 | 第24-25页 |
| ·试验方法 | 第25-33页 |
| ·SDS法提取真菌基因组DNA | 第25页 |
| ·普通PCR | 第25-26页 |
| ·高效TAIL-PCR | 第26-27页 |
| ·胶回收PCR产物 | 第27-28页 |
| ·TA克隆 | 第28-29页 |
| ·农杆菌介导的甘蔗梢腐病菌的遗传转化 | 第29-30页 |
| ·梢腐病菌对潮霉素抗性的鉴定 | 第30页 |
| ·转化子的PCR鉴定 | 第30页 |
| ·转化子的遗传稳定性鉴定 | 第30页 |
| ·突变体的致病力鉴定 | 第30-31页 |
| ·转化子的表型鉴定 | 第31页 |
| ·孢子悬浮液浓度与其在波长560nm处吸光值的相关性 | 第31页 |
| ·梢腐病菌产孢曲线的测定 | 第31页 |
| ·转化子产孢量鉴定 | 第31页 |
| ·T-DNA插入位点侧翼序列的克隆、测序和分析 | 第31-33页 |
| 3 根癌农杆菌介导转化法构建梢腐病菌突变体 | 第33-48页 |
| ·农杆菌介导转化梢腐病菌CNO-1突变体的构建和分析 | 第33-40页 |
| ·农杆菌介导转化梢腐病菌CNO-1 | 第33-34页 |
| ·比浊法测定孢子浓度 | 第34-35页 |
| ·转化子的PCR鉴定 | 第35-36页 |
| ·转化子遗传稳定性鉴定 | 第36页 |
| ·突变体菌落表型分析 | 第36-37页 |
| ·T-DNA插入位点侧翼序列的克隆和分析 | 第37-39页 |
| ·对表型改变转化子T-DNA插入位点侧翼序列分析 | 第39-40页 |
| ·农杆菌介导的梢腐病菌YN41菌株突变体的构建及鉴定分析 | 第40-48页 |
| ·农杆菌介导转化梢腐病菌YN41 | 第40-41页 |
| ·YN41对潮霉素抗性鉴定 | 第41-42页 |
| ·YN41转化子的PCR鉴定 | 第42页 |
| ·YN41转化子的稳定性鉴定 | 第42-43页 |
| ·YN41表型变异突变体的筛选与鉴定 | 第43-44页 |
| ·YN41转化子的致病性鉴定 | 第44-45页 |
| ·YN41产孢曲线测定 | 第45-46页 |
| ·转化子产孢量鉴定 | 第46-47页 |
| ·YN41表型变异突变体的T-DNA侧翼序列克隆和分析 | 第47-48页 |
| 4 讨论与结论 | 第48-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
