N端突变的小鼠朊蛋白构建和表达及突变体蛋白对朊蛋白构象转变的影响
| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 综述 | 第11-19页 |
| 第一章 突变体朊蛋白载体构建 | 第19-44页 |
| ·前言 | 第19-21页 |
| ·技术路线 | 第21页 |
| ·实验材料 | 第21-25页 |
| ·实验方法 | 第25-33页 |
| ·实验结果 | 第33-42页 |
| ·引物设计与合成 | 第33-37页 |
| ·朊蛋白N端突变体基因的获得 | 第37-40页 |
| ·朊蛋白N端突变体基因的扩增与测序 | 第40-41页 |
| ·突变体基因与表达载体的连接 | 第41-42页 |
| ·分析与讨论 | 第42-44页 |
| 第二章 突变体朊蛋白重组表达纯化与鉴定 | 第44-64页 |
| ·前言 | 第44-46页 |
| ·技术路线 | 第46页 |
| ·实验材料 | 第46-52页 |
| ·实验方法 | 第52-58页 |
| ·实验结果 | 第58-62页 |
| ·蛋白亲和层析纯化结果 | 第58-60页 |
| ·突变体朊蛋白DC蛋白定量结果 | 第60-61页 |
| ·突变体朊蛋白的SDS-PAGE鉴定 | 第61页 |
| ·突变体朊蛋白的蛋白免疫印迹鉴定 | 第61-62页 |
| ·分析与讨论 | 第62-64页 |
| 第三章 朊蛋白N端突变对朊病毒扩增的影响 | 第64-80页 |
| ·前言 | 第64-65页 |
| ·实验设计 | 第65页 |
| ·实验材料 | 第65-69页 |
| ·实验方法 | 第69-74页 |
| ·实验结果 | 第74-78页 |
| ·野生型朊病毒蛋白酶K抗性鉴定 | 第74-75页 |
| ·野生型朊蛋白PMCA扩增效率 | 第75-76页 |
| ·Del-N6突变体朊蛋白PMCA扩增效率 | 第76-77页 |
| ·Met 4-1突变体朊蛋白PMCA扩增效率 | 第77-78页 |
| ·分析与讨论 | 第78-80页 |
| 参考文献 | 第80-85页 |
| 附录 | 第85-86页 |
| 致谢 | 第86页 |
