| 摘要 | 第1-4页 |
| SUMMARY | 第4-7页 |
| 主要缩略词英汉对照表 | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-17页 |
| 1 PKR基因及蛋白结构的性状 | 第9-11页 |
| ·基因特征 | 第9页 |
| ·蛋白结构 | 第9-11页 |
| 2 PKR生物学活性的激活与抑制 | 第11-14页 |
| ·激酶激活 | 第11-12页 |
| ·配体激活 | 第12-13页 |
| ·活性抑制因子 | 第13-14页 |
| 3 PKR在信号传导及疾病发展中的作用 | 第14-17页 |
| ·信号传导 | 第14-15页 |
| ·疾病发展 | 第15-17页 |
| 第二章 蛋白激酶R的原核表达、纯化及多克隆抗体制备 | 第17-34页 |
| 1 材料与方法 | 第17-27页 |
| ·主要仪器设备 | 第17-18页 |
| ·主要试剂耗材 | 第18页 |
| ·溶液、培养基的配制 | 第18-19页 |
| ·细胞、质粒及实验动物 | 第19页 |
| ·PKR基因的RT-PCR扩增 | 第19-22页 |
| ·重组质粒pGEX-6P1PKR的克隆 | 第22-25页 |
| ·GST-PKR融合蛋白的诱导表达、纯化 | 第25-26页 |
| ·PKR多克隆抗体的制备 | 第26页 |
| ·PKR多克隆抗体特异性鉴定 | 第26-27页 |
| 2 结果 | 第27-32页 |
| ·PKR基因片段的扩增与鉴定 | 第27页 |
| ·重组质粒的双酶切鉴定 | 第27-28页 |
| ·GST-PKR融合蛋白的可溶性分析 | 第28-29页 |
| ·GST-PKR融合蛋白的酶切处理 | 第29-30页 |
| ·PKR蛋白的纯化 | 第30-31页 |
| ·多克隆抗体效价检测 | 第31页 |
| ·多克隆抗体特异性检测 | 第31-32页 |
| 3 讨论 | 第32-34页 |
| 第三章 蛋白激酶R单克隆抗体的制备 | 第34-50页 |
| 1 材料与方法 | 第34-42页 |
| ·实验动物及细胞 | 第34-35页 |
| ·主要试剂 | 第35页 |
| ·主要仪器与设备 | 第35页 |
| ·ELISA溶液配制 | 第35-36页 |
| ·动物免疫 | 第36页 |
| ·间接ELISA检测方法的建立 | 第36-37页 |
| ·杂交瘤细胞的获得 | 第37-40页 |
| ·单克隆抗体腹水的制备及纯化 | 第40-41页 |
| ·杂交瘤细胞及单克隆抗体的鉴定 | 第41-42页 |
| 2 结果 | 第42-48页 |
| ·PKR蛋白最佳工作条件的建立 | 第42-43页 |
| ·动物免疫与抗体水平检测 | 第43页 |
| ·阳性克隆细胞形态观察 | 第43-44页 |
| ·腹水型单克隆抗体的收集 | 第44-45页 |
| ·腹水型单克隆抗体的纯化 | 第45页 |
| ·ELISA测定腹水及细胞上清的抗体效价 | 第45-46页 |
| ·单克隆抗体亚型的鉴定 | 第46页 |
| ·染色体计数结果 | 第46-47页 |
| ·间接免疫荧光（IFA）鉴定特异性 | 第47-48页 |
| 3 讨论 | 第48-50页 |
| 第四章 全文结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 作者简历 | 第60-61页 |
| 导师简介 | 第61-62页 |