| 中文摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-28页 |
| 1 转基因作物商业化发展态势 | 第11-12页 |
| 2 转基因大豆的发展 | 第12-13页 |
| 3 转基因食品安全性管理和产品标识制度 | 第13-15页 |
| 4 转基因生物检测方法 | 第15-19页 |
| ·核酸水平上的检测方法 | 第15-18页 |
| ·定性PCR检测方法 | 第15-16页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第16-17页 |
| ·基因芯片 | 第17-18页 |
| ·蛋白质水平上的检测法 | 第18-19页 |
| 5 转基因检测用标准物质 | 第19-20页 |
| 6 MON87705背景材料 | 第20-25页 |
| 7 转基因大豆MON87705的实验方案 | 第25-28页 |
| ·本论文选题的意义 | 第25页 |
| ·研究内容、目标与拟解决的关键问题 | 第25-26页 |
| ·研究步骤 | 第26页 |
| ·预期结果及成果形式 | 第26-27页 |
| ·主要创新点 | 第27-28页 |
| 第二章 转基因大豆MON87705定性PCR检测 | 第28-39页 |
| 1 前言 | 第28-29页 |
| 2 材料与方法 | 第29-32页 |
| ·材料 | 第29页 |
| ·主要试剂 | 第29页 |
| ·主要实验仪器 | 第29页 |
| ·样品DNA提取 | 第29-30页 |
| ·定性检测引物设计及筛选 | 第30页 |
| ·定性PCR反应体系优化 | 第30-31页 |
| ·特异性检测 | 第31页 |
| ·灵敏度检测 | 第31页 |
| ·检出限稳定性测试 | 第31页 |
| ·转基因大豆MON87705定性检测标准化 | 第31-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-38页 |
| ·DNA提取 | 第32页 |
| ·引物设计与筛选 | 第32-33页 |
| ·定性PCR反应体系和条件的优化结果 | 第33-34页 |
| ·特异性验证 | 第34页 |
| ·灵敏度验证 | 第34-35页 |
| ·检出限稳定性测试 | 第35页 |
| ·转基因大豆MON87705定性检测标准化结果 | 第35-38页 |
| 4 小结 | 第38-39页 |
| 第三章 实时荧光定量PCR方法检测转基因大豆MON87705 | 第39-46页 |
| 1 前言 | 第39页 |
| 2 材料与方法 | 第39-41页 |
| ·实验材料 | 第39-40页 |
| ·主要试剂 | 第40页 |
| ·仪器与设备 | 第40页 |
| ·样品DNA提取 | 第40页 |
| ·实时荧光PCR引物及探针设计、筛选 | 第40页 |
| ·定量PCR方法特异性检测 | 第40-41页 |
| ·定量PCR方法标准曲线 | 第41页 |
| ·实时荧光PCR方法的检出限 | 第41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-45页 |
| ·DNA提取质量 | 第41页 |
| ·定量PCR检测方法引物探针设计 | 第41-43页 |
| ·实时荧光PCR方法特异性测试 | 第43-44页 |
| ·实时荧光PCR方法线性区间测试 | 第44页 |
| ·实时荧光PCR方法的检出限 | 第44-45页 |
| 4 小结 | 第45-46页 |
| 第四章 阳性质粒分子的构建与应用研究 | 第46-59页 |
| 1 前言 | 第46页 |
| 2 材料与方法 | 第46-51页 |
| ·材料 | 第46页 |
| ·实验试剂 | 第46-47页 |
| ·主要仪器与设备 | 第47页 |
| ·质粒分子构建 | 第47-50页 |
| ·培养基配制 | 第47页 |
| ·DNA提取 | 第47-48页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第48页 |
| ·重组PCR引物设计 | 第48-49页 |
| ·PCR扩增 | 第49页 |
| ·PCR产物与克隆载体连接 | 第49页 |
| ·重组质粒转化 | 第49-50页 |
| ·重组质粒鉴定 | 第50页 |
| ·质粒分子用于定性检测 | 第50-51页 |
| ·特异性验证 | 第50-51页 |
| ·灵敏度验证 | 第51页 |
| ·质粒分子用于定量检测 | 第51页 |
| ·建立标准曲线 | 第51页 |
| ·转基因大豆MON87705混合样品定量分析 | 第51页 |
| 3 结果与分析 | 第51-58页 |
| ·质粒验证结果 | 第51-52页 |
| ·质粒分子定性检测结果 | 第52-53页 |
| ·特异性验证 | 第52-53页 |
| ·灵敏度验证 | 第53页 |
| ·质粒分子用于定量检测结果 | 第53-58页 |
| ·标准曲线 | 第53-58页 |
| ·转基因大豆MON87705混合样品定量分析 | 第58页 |
| 4 小结 | 第58-59页 |
| 第五章 总结 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-68页 |
| 致谢 | 第68页 |