| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1 绪论 | 第10-19页 |
| ·食用菌猴头的分类地位及生物学特性 | 第10页 |
| ·食用菌猴头活性成分研究及应用 | 第10-12页 |
| ·多糖物质 | 第10-11页 |
| ·萜类物质 | 第11页 |
| ·甾醇 | 第11-12页 |
| ·甾醇类化合物麦角甾的生物合成及调控机制 | 第12-15页 |
| ·麦角甾醇生物合成途径 | 第12-13页 |
| ·麦角甾醇生物合成途径有关基因的研究 | 第13-15页 |
| ·抑制性消减杂交(SSH)研究进展 | 第15-18页 |
| ·抑制性消减杂交的原理 | 第15-17页 |
| ·抑制性消减杂交的技术评价 | 第17页 |
| ·抑制性消减杂交的应用 | 第17-18页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| 2 MeJA对猴头菌株5L0433麦角甾醇合成的影响 | 第19-28页 |
| ·材料与试剂 | 第19-20页 |
| ·材料 | 第19-20页 |
| ·试剂及仪器 | 第20页 |
| ·方法 | 第20-22页 |
| ·菌丝培养 | 第20-21页 |
| ·最佳茉莉酸甲酯诱导浓度的确定 | 第21页 |
| ·MeJA不同时间诱导情况 | 第21页 |
| ·菌丝产率的测定方法 | 第21页 |
| ·HPLC测定猴头菌丝体中麦角甾醇的含量 | 第21-22页 |
| ·结果与分析 | 第22-27页 |
| ·猴头菌丝体液体发酵培养情况 | 第22-23页 |
| ·不同浓度MeJA对菌丝生长量的影响 | 第23-24页 |
| ·不同浓度MeJA对菌丝麦角甾醇合成的影响 | 第24-25页 |
| ·MeJA诱导不同时间对菌丝生长的影响 | 第25页 |
| ·MeJA诱导不同时间对菌丝麦角甾醇合成的影响 | 第25-26页 |
| ·MeJA诱导不同时间对菌丝麦角甾醇生产量影响 | 第26-27页 |
| ·关于MeJA对猴头菌株5L0433麦角甾醇合成的影响讨论 | 第27-28页 |
| ·本章小结 | 第28页 |
| 3 MeJA诱导下猴头菌株5L0433消减文库构建及分析 | 第28-49页 |
| ·材料与试剂 | 第28-29页 |
| ·实验材料及处理 | 第28-29页 |
| ·酶及化学试剂 | 第29页 |
| ·实验方法 | 第29-30页 |
| ·猴头5L0433菌丝体总RNA提取 | 第29页 |
| ·mRNA纯化 | 第29-30页 |
| ·消减文库的构建 | 第30-36页 |
| ·cDNA第一链合成 | 第30-31页 |
| ·cDNA第二链合成 | 第31页 |
| ·Rsa Ⅰ酶切 | 第31-32页 |
| ·接头的连接 | 第32-33页 |
| ·第一轮杂交 | 第33页 |
| ·第二轮杂交 | 第33-34页 |
| ·第一次PCR反应 | 第34页 |
| ·第二次PCR反应 | 第34-35页 |
| ·PCR产物纯化 | 第35页 |
| ·载体的连接及转化 | 第35页 |
| ·重组体插入片段长度PCR检测 | 第35-36页 |
| ·文库的测序和EST生物信息学分析 | 第36页 |
| ·EST序列提交Genbank | 第36页 |
| ·结果与分析 | 第36-46页 |
| ·总RNA的提取和mRNA的分离 | 第36-37页 |
| ·SSH文库的构建质量检测 | 第37-38页 |
| ·SSH产物的电泳鉴定 | 第38-39页 |
| ·PCR扩增检测插入片段长度 | 第39-40页 |
| ·ESTs序列测定及分析结果 | 第40-41页 |
| ·ESTs序列分析结果 | 第41-46页 |
| ·消减文库构建及ESTs分析相关问题讨论 | 第46-48页 |
| ·消减文库的构建 | 第46-47页 |
| ·文库的假阳性 | 第47页 |
| ·文库的GO分类结果 | 第47页 |
| ·文库的COG分类结果 | 第47-48页 |
| ·本章小结 | 第48-49页 |
| 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 附录 | 第54-60页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
