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抗草甘膦EPSPS基因克隆、表达载体构建及亚麻的遗传转化

摘要第1-3页
Summary第3-4页
目录第4-6页
第一章 文献综述第6-18页
 1 抗除草剂转基因的研究概况第7-8页
   ·植物转基因的概况第7-8页
 2 抗除草剂转基因作物的研究现状和前景第8-9页
 3 草甘膦及抗草甘膦作物的研究第9-10页
   ·草甘膦的作用机理第9页
   ·抗草甘膦作物遗传改良的策略第9-10页
 4 植物表达载体的构建第10-12页
   ·构建表达载体的方法第10页
   ·Gateway 技术构建表达载体第10-12页
 5 转基因在亚麻的育种的应用第12-16页
   ·关于抗逆基因的研究第12-13页
   ·在改良品质方面的研究第13页
   ·在抗除草剂基因转化方面第13-14页
   ·亚麻转基因遗传转化的方法及特点第14-16页
 6 研究目标、基本思路和技术路线第16-18页
第二章 材料与方法第18-30页
 1 试验材料与试剂第18-20页
   ·材料第18页
   ·试剂第18页
   ·PCR 引物第18-19页
   ·主要仪器设备第19页
   ·培养基第19-20页
 2 试验方法第20-25页
   ·利用 Gateway 构建含 EPSPS 基因的表达载体第20-25页
   ·重组表达载体导入农杆菌第25页
 3 农杆菌介导法进行亚麻的遗传转化第25-28页
   ·外植体的制备第25-26页
   ·根癌农杆菌浸染液的准备第26页
   ·共培养第26页
   ·脱菌培养第26-27页
   ·筛选培养中的抗生素浓度筛选第27页
   ·生根培养基的确定第27-28页
   ·抗性苗的炼苗和移栽第28页
 4 转化亚麻再生苗的检测第28-30页
   ·转化亚麻的 Gus 检测第28页
   ·亚麻总 DNA 的提取第28-29页
   ·转基因亚麻的 PCR 检测第29-30页
第三章 结果与分析第30-41页
 1 利用 Gateway 构建含 EPSPS 基因的表达载体第30-33页
   ·抗草甘膦转基因油菜基因组 DNA 的获得第30页
   ·EPSPS 基因的扩增第30-31页
   ·EPSPS 基因的 TOPO 克隆与鉴定第31页
   ·植物表达载体 pEarlygate100-EPSPS 和 pMDC139-EPSPS 的构建第31-33页
 2 重组表达载体导入农杆菌第33-34页
 3 农杆菌介导法进行亚麻的遗传转化第34-39页
   ·头孢霉素(Cef)抑制农杆菌浓度的确定第34页
   ·亚麻遗传转化适宜筛选条件的研究第34-36页
   ·亚麻再生苗生根培养基的优化第36-38页
   ·农杆菌介导亚麻遗传转化体系的简介第38-39页
 4 转化亚麻的检测第39-41页
   ·转化亚麻的 Gus 检测第39页
   ·转基因亚麻的 PCR 检测第39-41页
第四章 讨论与结论第41-46页
 1 讨论第41-44页
   ·利用 Gateway 构建含 EPSPS 基因的表达载体第41页
   ·农杆菌介导法进行亚麻的遗传转化第41-44页
   ·亚麻遗传转化检测体系的建立第44页
 2 结论第44-45页
   ·利用 Gateway 构建含 EPSPS 基因的表达载体第44页
   ·农杆菌介导法进行亚麻的遗传转化第44-45页
 3 今后的研究方向和目标第45-46页
参考文献第46-50页
致谢第50-51页
导师简介第51-52页
作者简介第52-53页

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