| 致谢 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| 1. 文献综述 | 第9-17页 |
| ·黄瓜霜霉病的危害 | 第9页 |
| ·黄瓜霜霉病的防治措施 | 第9-10页 |
| ·黄瓜霜霉病研究进展 | 第10-12页 |
| ·黄瓜抗霜霉病生理机理的研究 | 第10页 |
| ·黄瓜霜霉病抗性分子机理的研究 | 第10-12页 |
| ·泛素蛋白酶体途径及其功能 | 第12-17页 |
| ·泛素蛋白酶体途径的组成及其降解 | 第12-13页 |
| ·泛素 | 第12-13页 |
| ·泛素活化酶（Ub-activating enzyme，E1） | 第13页 |
| ·泛素结合酶（Ub-conjugating enzyme，E2） | 第13页 |
| ·泛素连接酶（Ub-ligating enzyme，E3） | 第13页 |
| ·26S 蛋白酶体（26S proteasomes） | 第13页 |
| ·泛素蛋白酶体途径的降解 | 第13-14页 |
| ·泛素 E3 连接酶家族蛋白的分类与功能 | 第14-17页 |
| ·泛素 E3 连接酶家族蛋白的分类 | 第14页 |
| ·HECT 结构域家族泛素 E3 连接酶的结构及功能 | 第14-15页 |
| ·RING-finger 结构域家族泛素 E3 连接酶的结构及功能 | 第15页 |
| ·F-BOX 结构域家族泛素 E3 连接酶的结构及功能 | 第15-17页 |
| 2. 引言 | 第17-18页 |
| 3. 材料与方法 | 第18-29页 |
| ·实验材料 | 第18-19页 |
| ·植物材料 | 第18页 |
| ·试验所用试剂 | 第18页 |
| ·主要仪器 | 第18页 |
| ·PCR 引物 | 第18-19页 |
| ·常用培养基配制 | 第19页 |
| ·质粒载体和菌株 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-29页 |
| ·植物材料处理方法 | 第19-20页 |
| ·播种育苗 | 第19页 |
| ·病原菌接种 | 第19-20页 |
| ·不同组织处理（根、茎、叶、花、果实） | 第20页 |
| ·非生物胁迫因子诱导 | 第20页 |
| ·黄瓜不同组织总 RNA 的提取 | 第20-21页 |
| ·实验前准备 | 第20页 |
| ·黄瓜不同组织总 RNA 的提取步骤 | 第20-21页 |
| ·RNA 的质量及纯度检测 | 第21页 |
| ·cDNA 第一条链的合成 | 第21页 |
| ·黄瓜 DNA 的提取 | 第21-22页 |
| ·DNA 提取过程中所用溶液及试剂 | 第22页 |
| ·DNA 提取步骤 | 第22页 |
| ·DNA 浓度和质量的检测 | 第22页 |
| ·引物设计与筛选 | 第22页 |
| ·CsFBXL 基因的克隆 | 第22-25页 |
| ·基因片段的 PCR 扩增 | 第22-23页 |
| ·PCR 扩增产物的检测和回收纯化 | 第23页 |
| ·回收产物与 PMD19-T 载体的连接与转化 | 第23-24页 |
| ·重组克隆的验证及序列测定 | 第24-25页 |
| ·实时荧光定量 RCR 分析基因表达 | 第25-26页 |
| ·实时荧光定量 PCR 标准曲线浓度梯度的配置 | 第25页 |
| ·实时荧光定量 RT-PCR 反应 | 第25-26页 |
| ·重组原核表达载体的构建和目的蛋白的表达 | 第26-27页 |
| ·原核表达重组质粒载体的构建 | 第26页 |
| ·重组质粒转化 BL21 感受态细胞 | 第26页 |
| ·融合蛋白的诱导表达 | 第26-27页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）鉴定重组蛋白的表达 | 第27页 |
| ·亚细胞定位载体的构建及瞬时表达 | 第27-29页 |
| ·亚细胞定位重组质粒载体的构建 | 第27-28页 |
| ·PEG 介导的拟南芥叶肉细胞原生质体瞬时表达 | 第28-29页 |
| ·共聚焦显微镜观察 GFP 与叶绿体自发荧光共定位 | 第29页 |
| ·重组质粒的鉴定方法 | 第29页 |
| ·菌液 PCR 鉴定 | 第29页 |
| ·双酶切鉴定 | 第29页 |
| 4. 结果分析 | 第29-47页 |
| ·黄瓜 CSFBXL 基因的克隆及序列分析 | 第29-39页 |
| ·RNA、DNA 的提取以及质量检测 | 第29-30页 |
| ·黄瓜泛素 E3 连接酶基因的克隆 | 第30-31页 |
| ·黄瓜泛素 E3 连接酶基因序列的分析 | 第31-35页 |
| ·生物信息学分析 | 第35-39页 |
| ·黄瓜 CSFBXL 基因诱导表达模式 | 第39-43页 |
| ·黄瓜 CsFBXL 基因在霜霉病病菌诱导表达模式 | 第39-40页 |
| ·组织特异性对黄瓜 CsFBXL 基因表达的影响 | 第40-41页 |
| ·不同激素处理对黄瓜 CsFBXL 基因表达的影响 | 第41-42页 |
| ·低温和热激对黄瓜 CsFBXL 基因表达的影响 | 第42页 |
| ·盐胁迫对黄瓜 CsFBXL 基因表达的影响 | 第42-43页 |
| ·黄瓜重组原核载体 CSFBXL::PMAL-C2X 的构建和重组蛋白的表达 | 第43-45页 |
| ·黄瓜 CsFBXL 基因原核表达重组质粒的构建及重组质粒的鉴定 | 第43-44页 |
| ·目的蛋白的诱导表达 | 第44-45页 |
| ·黄瓜 CSFBXL 基因的亚细胞定位 | 第45-47页 |
| ·黄瓜 CsFBXL::pHBT-GFP-NOS 载体的构建及重组质粒的鉴定 | 第45-46页 |
| ·黄瓜 CsFBXL 基因的亚细胞定位分析 | 第46-47页 |
| 5. 结论与讨论 | 第47-53页 |
| ·结论 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-53页 |
| ·泛素蛋白酶体途径可能参与黄瓜霜霉病的过敏性反应 | 第48-49页 |
| ·CsFBXL 基因可能参与 ABA、SA、JA 激素诱导的信号传导调控 | 第49-50页 |
| ·CSFBXL 基因可能参与盐胁迫反应 | 第50-51页 |
| ·黄瓜泛素 CSFBXL 蛋白的诱导表达 | 第51页 |
| ·黄瓜泛素 CSFBXL 蛋白的亚细胞定位 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-62页 |
| ABSTRACT | 第62-63页 |
