| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 英文缩写 | 第14-18页 |
| 第一章 引言 | 第18-58页 |
| 第一节 HIV研究概况 | 第18-22页 |
| ·HIV的发现与起源 | 第18-19页 |
| ·HIV的流行病学 | 第19页 |
| ·HIV的发病机制 | 第19-22页 |
| ·急性感染和CD4~+T细胞耗竭 | 第20-21页 |
| ·病毒潜伏库的形成 | 第21-22页 |
| 第二节 HIV引起的固有免疫应答 | 第22-42页 |
| ·细胞中的模式识别受体 | 第22-28页 |
| ·TLR家族 | 第23-24页 |
| ·NLR家族 | 第24-26页 |
| ·RLR家族 | 第26-27页 |
| ·CLR家族 | 第27-28页 |
| ·模式识别受体识别HIV病毒 | 第28-32页 |
| ·Toll样受体 | 第28-31页 |
| ·细胞质中的RNA识别元件 | 第31页 |
| ·细胞质中的DNA识别元件 | 第31-32页 |
| ·IFN应答 | 第32-42页 |
| ·HIV感染中IFN-I的细胞来源 | 第32-35页 |
| ·IFN-I在靶细胞中产生的效应 | 第35-42页 |
| 第三节 HIV感染中的微生物移位 | 第42-55页 |
| ·微生物移位简介 | 第43-44页 |
| ·TLR通路参与微生物移位中的信号转导 | 第44-48页 |
| ·MyD88依赖的TLR信号通路 | 第44-47页 |
| ·TRIF依赖的TLR信号通路 | 第47-48页 |
| ·微生物移位的检测 | 第48-50页 |
| ·引起微生物移位的原因 | 第50-51页 |
| ·微生物移位的后果 | 第51-54页 |
| ·免疫活化 | 第51-53页 |
| ·CD4~+T细胞耗竭以及病毒RNA水平升高 | 第53-54页 |
| ·ART治疗对微生物移位的影响 | 第54-55页 |
| 第四节 本研究的目的和意义 | 第55-58页 |
| 第二章 材料与方法 | 第58-75页 |
| 第一节 实验材料 | 第58-65页 |
| ·研究对象 | 第58-61页 |
| ·细胞 | 第61页 |
| ·菌株 | 第61-62页 |
| ·质粒 | 第62页 |
| ·主要试剂 | 第62-64页 |
| ·酶类 | 第62-63页 |
| ·抗体 | 第63页 |
| ·试剂盒 | 第63-64页 |
| ·其他试剂 | 第64页 |
| ·主要仪器和设备 | 第64-65页 |
| 第二节 实验方法 | 第65-75页 |
| ·普通聚合酶链式反应 | 第65-66页 |
| ·引物设计及合成 | 第65页 |
| ·扩增反应 | 第65-66页 |
| ·荧光定量PCR(Real-time PCR) | 第66-67页 |
| ·人外周血CD4~+T细胞绝对计数 | 第67页 |
| ·外周血单个核细胞(PBMC)分离 | 第67-68页 |
| ·单核细胞分离 | 第68-69页 |
| ·细胞培养 | 第69页 |
| ·细胞系培养 | 第69页 |
| ·原代细胞培养 | 第69页 |
| ·细胞转染 | 第69-70页 |
| ·THP-1细胞转染 | 第69页 |
| ·原代单核细胞转染 | 第69-70页 |
| ·流式细胞分析 | 第70页 |
| ·细胞表面抗体染色 | 第70页 |
| ·细胞内抗体染色 | 第70页 |
| ·结果分析 | 第70页 |
| ·荧光素酶活性测定 | 第70页 |
| ·细胞因子检测 | 第70-72页 |
| ·微量样本多指标流式蛋白定量检测(Cytometric Bead Array,CBA) | 第70-71页 |
| ·酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA) | 第71-72页 |
| ·反转录PCR(Reverse transcription PCR,RT-PCR) | 第72页 |
| ·免疫印迹(Western blotting) | 第72-73页 |
| ·LY6E稳定敲除的THP-1细胞系构建 | 第73页 |
| ·shRNA质粒转染 | 第73页 |
| ·稳定整合细胞筛选 | 第73页 |
| ·慢病毒转导 | 第73-74页 |
| ·慢病毒包装 | 第73-74页 |
| ·慢病毒转导 | 第74页 |
| ·芯片数据分析 | 第74页 |
| ·统计学分析 | 第74-75页 |
| 第三章 结果与分析 | 第75-112页 |
| 第一节 LY6E是与HIV-1疾病相关的干扰素诱导基因 | 第75-88页 |
| ·与HIV-1疾病相关的ISGs分析 | 第75-79页 |
| ·LY6E能被IFN-α诱导表达上调 | 第79-82页 |
| ·LY6E与疾病进展的相关性 | 第82-88页 |
| 第二节 LY6E调节CD14的表达 | 第88-94页 |
| ·沉默LY6E的THP-1细胞系的构建 | 第88-89页 |
| ·转录组芯片分析 | 第89-92页 |
| ·流式细胞术分析THP-1-shLY6E和THP-1-shCtrl细胞表面分子的表达 | 第92-94页 |
| 第三节 LY6E下调单核细胞中LPS诱导的免疫应答 | 第94-107页 |
| ·单核细胞中LY6E抑制LPS诱导的免疫应答 | 第94-102页 |
| ·LY6E抑制LPS诱导的免疫应答功能是通过改变CD14的表达实现 | 第102-104页 |
| ·参与LY6E调控免疫应答的信号通路 | 第104-107页 |
| 第四节 HIV-1慢性感染中LY6E限制单核细胞对LPS的过度反应 | 第107-112页 |
| ·HIV-1感染者的单核细胞中CD14表达与LY6E具有负相关性 | 第107-109页 |
| ·LY6E减弱HIV-1感染者的单核细胞对LPS刺激的免疫应答 | 第109-112页 |
| 第四章 讨论 | 第112-117页 |
| 第一节 LY6E的相关研究 | 第112-113页 |
| 第二节 微生物移位导致系统免疫活化 | 第113-114页 |
| 第三节 LY6E在固有免疫系统中的作用 | 第114-115页 |
| 第四节 IFN-I在病毒感染中的双重效应 | 第115-117页 |
| 第五章 结论与展望 | 第117-119页 |
| 第一节 结论 | 第117-118页 |
| 第二节 展望 | 第118-119页 |
| 参考文献 | 第119-143页 |
| 致谢 | 第143-145页 |
| 个人简历 | 第145-146页 |
| 在学期间发表论文 | 第146页 |
