| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 英文缩略词表 | 第9-10页 |
| 前言 | 第10-11页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-18页 |
| ·奶牛乳房炎的危害及其防制 | 第11-12页 |
| ·链球菌性奶牛乳房炎及其致病机制 | 第12-14页 |
| ·GapC 蛋白的特性及其应用 | 第14-15页 |
| ·单交换同源重组概述 | 第15-16页 |
| ·本论文的设计思路 | 第16-18页 |
| 第2章 新疆南疆地区乳房链球菌 gapC 基因原核表达载体的构建及诱导表达 | 第18-28页 |
| ·材料 | 第18-19页 |
| ·菌株及质粒 | 第18页 |
| ·实验药品与试剂 | 第18-19页 |
| ·主要仪器 | 第19页 |
| ·方法 | 第19-23页 |
| ·引物的设计与合成 | 第19-20页 |
| ·S. uberis 基因组 DNA 的提取 | 第20页 |
| ·gapC 基因的 PCR 扩增 | 第20-21页 |
| ·重组表达质粒的构建 | 第21-22页 |
| ·GapC 重组蛋白的诱导表达 | 第22页 |
| ·GapC 重组蛋白最佳诱导条件的确定 | 第22-23页 |
| ·结果 | 第23-26页 |
| ·目的基因 gapC 的扩增与序列分析 | 第23页 |
| ·重组表达质粒的构建与鉴定 | 第23-24页 |
| ·GapC 重组蛋白最佳诱导条件的确定 | 第24-26页 |
| ·讨论 | 第26-28页 |
| 第3章 GapC 重组蛋白的纯化及其动物的免疫保护性试验 | 第28-45页 |
| ·材料 | 第29-30页 |
| ·实验材料 | 第29页 |
| ·主要仪器 | 第29页 |
| ·主要试剂 | 第29-30页 |
| ·方法 | 第30-37页 |
| ·镍离子亲和层析法进行目的蛋白的纯化 | 第30-31页 |
| ·纯化蛋白浓度的确定 | 第31-33页 |
| ·重组 GapC 蛋白多克隆抗血清的制备 | 第33页 |
| ·Western Blot 进行抗体特性分析 | 第33-34页 |
| ·间接 ELISA 法测定抗体的效价 | 第34-36页 |
| ·GapC 重组蛋白的小鼠免疫保护性 | 第36-37页 |
| ·结果 | 第37-43页 |
| ·GapC 重组蛋白的纯化 | 第37-39页 |
| ·GapC 蛋白的 Western Blotting 分析 | 第39-40页 |
| ·ELISA 法测定抗体的效价 | 第40-41页 |
| ·GapC 重组蛋白的免疫保护性 | 第41-43页 |
| ·讨论 | 第43-45页 |
| 第4章 乳房链球菌 gapC 基因缺失突变株的构建 | 第45-55页 |
| ·材料 | 第46-47页 |
| ·实验材料 | 第46页 |
| ·主要仪器 | 第46页 |
| ·药品与试剂 | 第46-47页 |
| ·方法 | 第47-50页 |
| ·gapC 基因失活重组质粒的构建 | 第47-49页 |
| ·gapC 基因缺失突变株的构建[77] | 第49-50页 |
| ·结果 | 第50-53页 |
| ·gapC 基因失活重组质粒的构建与鉴定 | 第50-52页 |
| ·gapC 基因失活突变株的筛选与鉴定 | 第52-53页 |
| ·讨论 | 第53-55页 |
| 第5章 总结与展望 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 作者简介 | 第62页 |
