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SVCV糖蛋白在昆虫细胞中的表达及SVCV和IHNV抗体库的筛选

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
缩略语表第10-12页
第一章 文献综述第12-21页
   ·鲤春病毒血症病毒第12-15页
     ·SVCV的生物学特征第12页
     ·SVCV基因组第12页
     ·结构蛋白特征第12-13页
     ·SVC流行特点及临床特征第13-15页
   ·传染性造血器官坏死病病毒第15-17页
     ·IHNV的生物学特征第15页
     ·IHNV基因组第15页
     ·结构蛋白特征第15-16页
     ·IHN流行特点及临床特征第16-17页
   ·杆状病毒表达系统第17-18页
     ·杆状病毒的生物学特性第17-18页
     ·杆状病毒表达系统的发展第18页
   ·噬菌体展示技术概述第18-19页
     ·噬菌体展示技术的概念第18页
     ·噬菌体展示系统第18-19页
     ·噬菌体抗体库的淘选方法第19页
   ·研究目的与意义第19-21页
第二章 SVCV糖蛋白在昆虫细胞中的表达与鉴定第21-34页
   ·材料和方法第21-29页
     ·毒株和细胞第21-22页
     ·主要试剂和溶液配制第22-23页
     ·引物第23页
     ·实验仪器第23-24页
     ·SVCV病毒的增殖及RNA提取第24页
     ·糖蛋白基因的扩增第24页
     ·质粒pFastBac-G的构建第24-25页
     ·大肠杆菌DH10αBac感受态细胞的制备第25-26页
     ·重组穿梭载体Bacmid-G的构建第26页
     ·重组Bacmid-G的提取第26-27页
     ·脂质体介导转染SF9细胞第27页
     ·重组杆状病毒(AcNPV-G)的扩增及鉴定第27页
     ·表达产物的SDS-PAGE电泳及Western-blot检测第27-28页
     ·间接免疫荧光鉴定目的蛋白的表达第28-29页
   ·结果与分析第29-32页
     ·SVCV-G基因片段的扩增第29页
     ·重组转移载体的双酶切鉴定第29-30页
     ·穿梭载体Bacmid-G的构建第30页
     ·重组杆状病毒的获得第30-31页
     ·重组杆状病毒基因组PCR鉴定第31页
     ·表达产物的SDS-PAGE及Western-blot检测第31-32页
     ·间接免疫荧光鉴定目的蛋白的表达第32页
   ·讨论第32-34页
第三章 抗SVCV噬菌体单链抗体淘选及鉴定第34-47页
   ·材料与方法第34-39页
     ·主要实验材料第34页
     ·主要试剂和溶液配制第34-35页
     ·噬菌体文库扩增第35页
     ·噬菌体展示文库的拯救第35页
     ·抗SVCV单链抗体的淘选第35-36页
     ·阳性克隆鉴定第36-37页
     ·阳性克隆测序第37页
     ·可溶性单链抗体的诱导表达第37页
     ·单链抗体的Western blot分析第37页
     ·可溶性单链抗体与SVCV结合性分析第37-38页
     ·单链抗体的特异性分析第38页
     ·亲和力常数测定第38页
     ·间接免疫荧光试验第38-39页
   ·结果与分析第39-46页
     ·抗SVCV单链抗体库的淘选第39页
     ·阳性克隆鉴定第39-41页
     ·阳性克隆序列测定第41-42页
     ·可溶性抗体的Western blot分析第42-43页
     ·可溶性单链抗体与SVCV结合性分析第43-44页
     ·特异性试验及亲和力常数第44页
     ·免疫荧光试验第44-46页
   ·讨论第46-47页
第四章 抗IHNV噬菌体抗体库的淘选与鉴定第47-59页
   ·材料与方法第48-50页
     ·材料第48页
     ·辅助噬菌体扩增第48页
     ·辅助噬菌体滴度测定第48-49页
     ·IHNV病毒纯化及提纯第49页
     ·IHNV对抗体库的淘选第49页
     ·阳性克隆鉴定第49页
     ·阳性克隆测序第49页
     ·可溶性抗体诱导表达及结合特性分析第49页
     ·特异性分析第49-50页
     ·抗体亲和力常数测定第50页
     ·间接免疫荧光试验第50页
   ·结果与分析第50-57页
     ·抗IHNV噬菌体抗体的淘选第50-51页
     ·阳性克隆鉴定第51-53页
     ·阳性克隆测序第53-54页
     ·可溶性单链抗体诱导表达第54-55页
     ·可溶性单链抗体与IHNV结合性分析第55页
     ·单链抗体特异性分析及亲和力常数测定第55-56页
     ·间接免疫荧光试验第56-57页
   ·讨论第57-59页
参考文献第59-66页
硕士期间发表的论文第66-67页
致谢第67页

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