摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
缩略语表 | 第10-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-21页 |
·鲤春病毒血症病毒 | 第12-15页 |
·SVCV的生物学特征 | 第12页 |
·SVCV基因组 | 第12页 |
·结构蛋白特征 | 第12-13页 |
·SVC流行特点及临床特征 | 第13-15页 |
·传染性造血器官坏死病病毒 | 第15-17页 |
·IHNV的生物学特征 | 第15页 |
·IHNV基因组 | 第15页 |
·结构蛋白特征 | 第15-16页 |
·IHN流行特点及临床特征 | 第16-17页 |
·杆状病毒表达系统 | 第17-18页 |
·杆状病毒的生物学特性 | 第17-18页 |
·杆状病毒表达系统的发展 | 第18页 |
·噬菌体展示技术概述 | 第18-19页 |
·噬菌体展示技术的概念 | 第18页 |
·噬菌体展示系统 | 第18-19页 |
·噬菌体抗体库的淘选方法 | 第19页 |
·研究目的与意义 | 第19-21页 |
第二章 SVCV糖蛋白在昆虫细胞中的表达与鉴定 | 第21-34页 |
·材料和方法 | 第21-29页 |
·毒株和细胞 | 第21-22页 |
·主要试剂和溶液配制 | 第22-23页 |
·引物 | 第23页 |
·实验仪器 | 第23-24页 |
·SVCV病毒的增殖及RNA提取 | 第24页 |
·糖蛋白基因的扩增 | 第24页 |
·质粒pFastBac-G的构建 | 第24-25页 |
·大肠杆菌DH10αBac感受态细胞的制备 | 第25-26页 |
·重组穿梭载体Bacmid-G的构建 | 第26页 |
·重组Bacmid-G的提取 | 第26-27页 |
·脂质体介导转染SF9细胞 | 第27页 |
·重组杆状病毒(AcNPV-G)的扩增及鉴定 | 第27页 |
·表达产物的SDS-PAGE电泳及Western-blot检测 | 第27-28页 |
·间接免疫荧光鉴定目的蛋白的表达 | 第28-29页 |
·结果与分析 | 第29-32页 |
·SVCV-G基因片段的扩增 | 第29页 |
·重组转移载体的双酶切鉴定 | 第29-30页 |
·穿梭载体Bacmid-G的构建 | 第30页 |
·重组杆状病毒的获得 | 第30-31页 |
·重组杆状病毒基因组PCR鉴定 | 第31页 |
·表达产物的SDS-PAGE及Western-blot检测 | 第31-32页 |
·间接免疫荧光鉴定目的蛋白的表达 | 第32页 |
·讨论 | 第32-34页 |
第三章 抗SVCV噬菌体单链抗体淘选及鉴定 | 第34-47页 |
·材料与方法 | 第34-39页 |
·主要实验材料 | 第34页 |
·主要试剂和溶液配制 | 第34-35页 |
·噬菌体文库扩增 | 第35页 |
·噬菌体展示文库的拯救 | 第35页 |
·抗SVCV单链抗体的淘选 | 第35-36页 |
·阳性克隆鉴定 | 第36-37页 |
·阳性克隆测序 | 第37页 |
·可溶性单链抗体的诱导表达 | 第37页 |
·单链抗体的Western blot分析 | 第37页 |
·可溶性单链抗体与SVCV结合性分析 | 第37-38页 |
·单链抗体的特异性分析 | 第38页 |
·亲和力常数测定 | 第38页 |
·间接免疫荧光试验 | 第38-39页 |
·结果与分析 | 第39-46页 |
·抗SVCV单链抗体库的淘选 | 第39页 |
·阳性克隆鉴定 | 第39-41页 |
·阳性克隆序列测定 | 第41-42页 |
·可溶性抗体的Western blot分析 | 第42-43页 |
·可溶性单链抗体与SVCV结合性分析 | 第43-44页 |
·特异性试验及亲和力常数 | 第44页 |
·免疫荧光试验 | 第44-46页 |
·讨论 | 第46-47页 |
第四章 抗IHNV噬菌体抗体库的淘选与鉴定 | 第47-59页 |
·材料与方法 | 第48-50页 |
·材料 | 第48页 |
·辅助噬菌体扩增 | 第48页 |
·辅助噬菌体滴度测定 | 第48-49页 |
·IHNV病毒纯化及提纯 | 第49页 |
·IHNV对抗体库的淘选 | 第49页 |
·阳性克隆鉴定 | 第49页 |
·阳性克隆测序 | 第49页 |
·可溶性抗体诱导表达及结合特性分析 | 第49页 |
·特异性分析 | 第49-50页 |
·抗体亲和力常数测定 | 第50页 |
·间接免疫荧光试验 | 第50页 |
·结果与分析 | 第50-57页 |
·抗IHNV噬菌体抗体的淘选 | 第50-51页 |
·阳性克隆鉴定 | 第51-53页 |
·阳性克隆测序 | 第53-54页 |
·可溶性单链抗体诱导表达 | 第54-55页 |
·可溶性单链抗体与IHNV结合性分析 | 第55页 |
·单链抗体特异性分析及亲和力常数测定 | 第55-56页 |
·间接免疫荧光试验 | 第56-57页 |
·讨论 | 第57-59页 |
参考文献 | 第59-66页 |
硕士期间发表的论文 | 第66-67页 |
致谢 | 第67页 |