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转抗菌肽基因Rs-AFP2和转录因子Pti4玉米抗纹枯病的研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
缩略词表第10-11页
1. 前言第11-31页
   ·植物遗传转化技术的研究进展第11-17页
     ·农杆菌介导法第11-13页
     ·DNA直接引入法第13-17页
   ·农杆菌介导玉米组织培养的研究进展第17-21页
     ·玉米转化受体材料的选择第17-19页
     ·植物基因型的选择第19-20页
     ·培养基成分的选择第20-21页
   ·玉米转基因育种的分类第21-23页
   ·玉米纹枯病的研究进展第23-25页
   ·病程相关蛋白第25-26页
   ·Pti4蛋白的作用机制及在植物遗传育种中的应用第26-28页
     ·转录因子第26-27页
     ·Pti4蛋白作用机理第27页
     ·Pti4基因在植物抗病害中的应用第27-28页
   ·抗菌肽Rs-AFP2的作用机制及在植物遗传育种中的应用第28-30页
     ·抗菌肽的研究进展第28-29页
     ·抗菌肽Rs-AFP2的作用机制第29-30页
     ·Rs-AFP2基因在植物抗病害中的应用第30页
   ·本研究的目的及意义第30-31页
2 材料与方法第31-51页
   ·实验材料第31-35页
     ·植物材料第31页
     ·菌株及质粒载体第31页
     ·各种酶及试剂第31页
     ·实验中所用到的引物第31-32页
     ·常用试剂及组培药品的配制第32-34页
     ·培养基的配制第34-35页
   ·试验方法第35-51页
     ·植物双价表达载体(pCA3301-Pti4-Rs)的构建第35-44页
     ·双价表达载体的验证及保存第44-45页
     ·双价表达载体转化农杆菌EHA1 05第45-46页
     ·农杆菌介导玉米遗传转化第46-49页
     ·转基因玉米分子检测第49-50页
     ·转基因玉米涂抹Basta检测第50页
     ·转基因玉米抗纹枯病检测第50-51页
3. 结果与分析第51-67页
   ·双价表达载体PCAMBIA3301-Pti4-Rs的构建第51-59页
     ·萝卜与番茄总RNA的提取第51页
     ·萝卜Rs-AFP2基因和番茄Pti4基因的RT-PCR第51-52页
     ·Pti4和Rs-AFP2基因的PCR扩增第52页
     ·克隆载体的构建和测序验证第52-55页
     ·双价表达载体的构建第55-58页
     ·双价表达载体转化农杆菌第58-59页
   ·农杆菌介导玉米遗传转化第59-62页
     ·农杆菌侵染玉米幼胚第59页
     ·农杆菌侵染玉米愈伤组织第59-60页
     ·玉米再生植株第60-62页
   ·转基因玉米的分子鉴定第62-64页
   ·转基因玉米涂抹Basta检测第64页
   ·转基因玉米的抗病性检测第64-67页
4. 讨论第67-71页
   ·双价表达载体的构建第67-68页
   ·农杆菌介导的玉米遗传转化第68-69页
   ·转基因玉米的检测第69-71页
     ·涂抹Basta检测第69页
     ·叶片接病检测第69-71页
参考文献第71-80页
致谢第80页

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