| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-16页 |
| ·副猪嗜血杆菌研究进展 | 第10-12页 |
| ·副猪嗜血杆菌 | 第10页 |
| ·副猪嗜血杆菌流行病学 | 第10-11页 |
| ·副猪嗜血杆菌功能基因 | 第11-12页 |
| ·荚膜多糖的研究进展 | 第12-16页 |
| ·荚膜多糖的结构及组成 | 第13-16页 |
| ·荚膜多糖与细菌的粘附相关 | 第16页 |
| ·荚膜多糖与细菌的抗吞噬相关 | 第16页 |
| 2 研究的目的与意义 | 第16-17页 |
| 3 材料与方法 | 第17-41页 |
| ·试验材料 | 第17-21页 |
| ·菌株、质粒载体和细胞 | 第17页 |
| ·酶、试剂、试剂盒 | 第17-18页 |
| ·培养基及抗生素的配制 | 第18-21页 |
| ·引物 | 第21页 |
| ·试验方法 | 第21-41页 |
| ·副猪嗜血杆菌基因组DNA的提取 | 第21-22页 |
| ·自杀性质粒pK18-wza-UKD的构建 | 第22-26页 |
| ·将自杀性质粒pK18-wza-UKD自然转化入副猪嗜血杆菌 | 第26-27页 |
| ·wza基因缺失突变株的鉴定 | 第27-38页 |
| ·生长曲线的测定 | 第38页 |
| ·透射电子显微镜观察细菌的荚膜 | 第38页 |
| ·检测副猪嗜血杆菌FX0103和FX0103-△wza的荚膜多糖表达情况 | 第38-39页 |
| ·FX0103和FX0103-△wza的血清分型试验 | 第39-40页 |
| ·FX0103和FX0103-△wza与PK-15细胞作用后粘附能力的比较 | 第40页 |
| ·小鼠单核巨噬细胞对FX0103和FX0103-△wza吞噬能力的比较 | 第40-41页 |
| ·FX0103与FX0103-△wza被小鼠单核巨噬细胞吞噬后存活能力的比较 | 第41页 |
| 4 结果与分析 | 第41-58页 |
| ·自然转化法筛选wza基因缺失突变株 | 第41-43页 |
| ·自杀性质粒pK18-wza-UKD的构建 | 第41-43页 |
| ·重组质粒pK18-wza-UKD自然转化入副猪嗜血杆菌 | 第43页 |
| ·wza基因缺失突变株的鉴定 | 第43-52页 |
| ·wza基因缺失突变株的PCR鉴定 | 第43-44页 |
| ·wza基因缺失突变株的Southern Blot鉴定 | 第44-46页 |
| ·RT-PCR检测极性效应 | 第46-48页 |
| ·wza基因缺失突变株的Western Blot鉴定 | 第48-52页 |
| ·野生株FX0103与基因缺失突变株FX0103-△wza生长曲线的绘制 | 第52页 |
| ·透射电子显微镜观察细菌荚膜的形态 | 第52-53页 |
| ·副猪嗜血杆菌FX0103和FX0103-△wza多糖的表达 | 第53-55页 |
| ·副猪嗜血杆菌FX0103和FX0103-△wza总多糖的提取 | 第53-54页 |
| ·副猪嗜血杆菌FX0103和FX0103-△wza胞外多糖的提取 | 第54-55页 |
| ·FX0103和FX0103-△wza的血清分型试验 | 第55页 |
| ·FX0103和FX0103-△wza与PK-15细胞作用后粘附能力的比较 | 第55-56页 |
| ·FX0103和FX0103-△wza与小鼠单核巨噬细胞作用后抗吞噬能力的比较 | 第56-57页 |
| ·FX0103和FX0103-△wza在小鼠单核巨噬细胞内存活能力的比较 | 第57-58页 |
| 5 讨论 | 第58-61页 |
| ·自然转化法筛选副猪嗜血杆菌中wza基因缺失突变株 | 第58-59页 |
| ·野生株与wza基因缺失突变株的生物学特性的比较 | 第59页 |
| ·野生株和wza基因缺失突变株与猪肾上皮细胞(PK-15)的粘附能力 | 第59-60页 |
| ·野生株和缺失株与小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7)的相互作用 | 第60-61页 |
| 6 小结 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
