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马银花等杜鹃花组织培养及干细胞相关基因克隆与表达

縮写词第1-12页
摘要第12-15页
Abstract第15-19页
第一章 引言第19-27页
 1 杜鹃花概况第19-20页
 2 杜鹃花组织培养研究进展第20-23页
   ·外植体的选取第20-21页
   ·外植体消毒灭菌的方法第21页
   ·基本培养基的选择第21-22页
   ·激素对杜鹃离体培养的影响第22-23页
     ·愈伤组织诱导和芽的分化第22页
     ·芽的诱导第22-23页
     ·根的诱导第23页
   ·其他因素对杜鹃离体培养的影响第23页
 3 植物干细胞研究进展第23-25页
   ·WUSCHEL基因的研究进展第24-25页
   ·CLAVATA1基因的研究进展第25页
   ·WUS-CLV反馈调节环控制茎尖干细胞第25页
 4 本试验研究的意义与内容第25-27页
   ·本试验研究的意义第25-26页
   ·本试验研究的内容第26-27页
第二章 马银花等杜鹃花离体繁殖体系的优化第27-59页
 第一节 马银花的离体繁殖研究第27-47页
  1 材料与方法第27-30页
   ·材料第27-28页
   ·方法第28-30页
     ·正交试验对马银花增殖的影响第28页
     ·正交试验对马银花生根的影响第28-29页
     ·正交试验对马银花愈伤组织诱导的影响第29-30页
  2. 结果与分析第30-45页
   ·不同培养基对马银花增殖的影响第30-35页
   ·不同培养基对马银花生根的影响第35-40页
   ·不同培养基对马银花叶片愈伤组织诱导的影响第40-45页
  3 讨论第45-47页
   ·活性强的细胞分裂素ZT和TDZ有利于马银花的增殖第45页
   ·活性炭和低盐类基本培养基的使用促进马银花的生根第45-46页
   ·ZT和2,4-D搭配使用有利于马银花叶片愈伤组织的诱导第46-47页
 第二节 满山红离体繁殖体系的优化第47-59页
  1 材料与方法第47-48页
   ·材料第47页
   ·方法第47-48页
     ·正交试验对满山红增殖的影响第47-48页
     ·正交试验对满山红生根的影响第48页
  2 结果与分析第48-58页
   ·不同培养基对满山红增殖的影响第48-53页
   ·不同培养基对满山红生根的影响第53-58页
  3 讨论第58-59页
   ·活性强的细胞分裂素促进满山红的增殖第58页
   ·低盐类基本培养基及活性炭的使用有利于满山红的生根第58-59页
第三章 马银花愈伤组织RoWUS基因及其启动子的克隆与分析第59-84页
 第一节 马银花愈伤组织RoWUS基因cDNA克隆及生物信息学分析第59-75页
  1 材料与方法第59-61页
   ·材料第59-60页
   ·方法第60-61页
     ·马银花愈伤组织总RNA的提取第60页
     ·马银花愈伤组织cDNA合成第60页
     ·马银花愈伤组织RoWUS基因cDNA克隆第60-61页
     ·马银花愈伤组织RoWUS基因的生物信息学分析第61页
  2 结果与分析第61-73页
   ·马银花愈伤组织总RNA的提取与检测第61-62页
   ·马银花RoWUS基因保守区的克隆第62-63页
   ·马银花RoWUS基因3’RACE的克隆第63-64页
   ·马银花RoWUS基因5’RACE的克隆第64页
   ·马银花RoWUS基因全长拼接第64-65页
   ·马银花RoWUS基因ORF扩增结果第65-66页
   ·马银花RoWUS生物信息学分析第66-73页
     ·马银花RoWUS编码的蛋白质理化性质预测与分析第66-67页
     ·马银花RoWUS蛋白质信号肽和亚细胞定位分析第67-68页
     ·马银花RoWUS蛋白质跨膜结构的预测第68页
     ·马银花RoWUS蛋白质保守结构域预测第68-69页
     ·马银花RoWUS蛋白质卷曲螺旋预测第69-70页
     ·马银花RoWUS蛋白质磷酸化位点及功能位点预测第70页
     ·马银花RoWUS蛋白质二级结构预测第70-71页
     ·马银花RoWUS蛋白质三维结构预测第71-72页
     ·马银花RoWUS蛋白质系统进化树构建第72-73页
  3 讨论第73-75页
   ·马银花RoWUS基因cDNA全长获得第73-74页
   ·马银花愈伤组织RoWUS的功能推测第74-75页
 第二节 马银花愈伤组织RoWUS基因启动子克隆及生物信息学分析第75-84页
  1 材料与方法第75-76页
   ·材料第75页
   ·方法第75-76页
     ·马银花愈伤组织基因组DNA的提取第75页
     ·马银花愈伤组织RoWUS基因gDNA的克隆第75页
     ·马银花愈伤组织RoWUS基因启动子克隆第75-76页
     ·目的片段的回收、克隆和测序第76页
     ·生物信息学分析第76页
  2 结果与分析第76-83页
   ·马银花愈伤组织基因组DNA的提取第76-77页
   ·马银花RoWUS基因gDNA的克隆第77-78页
   ·马银花/?第78-79页
   ·马银花RoWUS基因内含子分析第79-80页
   ·马银花RoWUS基因启动子序列分析第80-83页
  3. 讨论第83-84页
   ·马银花RoWUS基因启动子含有丰富的调控元件第83页
   ·马银花RoWUS基因启动子的潜在功能第83-84页
第四章 马银花愈伤组织RoCLV1基因克隆及分析第84-104页
 第一节 马银花愈伤组织RoCLV1基因的克隆第84-94页
  1 材料与方法第84-85页
   ·材料第84-85页
   ·方法第85页
     ·总RNA提取以及纯度、完整性鉴定第85页
     ·cDNA逆转录第85页
     ·马银花愈伤组织RoCLV1基因cDNA克隆第85页
  2 结果与分析第85-93页
   ·马银花愈伤组织总RNA的提取与检测第85-86页
   ·马银花RoCLV1基因保守区的克隆第86-87页
   ·马银花RoCLV1基因3’RACE的克隆第87-88页
   ·马银花RoCLV1基因5’RACE的克隆第88-89页
   ·马银花RoCLV1基因全长拼接第89-92页
   ·马银花RoCLV1基因ORF扩增结果第92-93页
  3 讨论第93-94页
   ·马银花RoCLV1基因cDNA全长获得第93-94页
   ·马银花愈伤组织RoCLV1克隆的意义第94页
 第二节 马银花RoCLV1基因的生物信息学分析第94-104页
  1 材料与方法第94-95页
   ·材料第94页
   ·方法第94-95页
  2 结果与分析第95-103页
   ·马银花RoCLV1编码的蛋白质理化性质预测与分析第95-96页
   ·马银花RoCLV1蛋白质信号肽和亚细胞定位分析第96-97页
   ·马银花RoCLV1蛋白质跨膜结构的预测第97页
   ·马银花RoCLV1蛋白质保守结构域预测第97-98页
   ·马银花RoCLV1蛋白质卷曲螺旋预测第98-99页
   ·马银花RoCLV1蛋白质磷酸化位点及功能位点预测第99页
   ·马银花RoCLV1蛋白质二级结构预测第99-101页
   ·马银花RoCLV1蛋白质三维结构预测第101页
   ·马银花RoCLV1蛋白系统进化树的构建第101-103页
  3 讨论第103-104页
   ·马银花RoCLV1基因可能是亮氨酸重复序列受体激酶第103页
   ·马银花RoCLV1基因的功能推测第103-104页
第五章 马银花愈伤组织生长过程中干细胞相关基因的定量表达分析第104-115页
 第一节 马银花愈伤组织不同生长时期干细胞相关基因的定量表达分析第104-110页
  1. 材料与方法第104-107页
   ·材料第104-105页
   ·方法第105-107页
     ·马银花愈伤组织一个继代周期内不同天数RoWUS和RoCLV1的qPCR表达第105页
     ·马银花愈伤组织不同继代周期RoWUS和RoCLV1的qPCR表达第105页
     ·总RNA的提取和质量检测第105页
     ·cDNA的合成第105页
     ·实时荧光定量PCR第105-107页
  2 结果与分析第107-108页
   ·马银花愈伤组织一个继代周期内不同天数RoWUS和RoCLV1的qPCR分析第107页
   ·马银花愈伤组织不同继代周期RoWUS和RoCLV1的qPCR分析第107-108页
  3 讨论第108-110页
   ·马银花愈伤组织一个继代周期中RoWUS和RoCLV1的表达模式第108-109页
   ·RoWUS基因可能在马银花愈伤组织不同继代周期中起主要调控作用第109-110页
 第二节 马银花愈伤组织在不同激素处理下干细胞相关基因的定量表达分析第110-115页
  1. 材料与方法第110-111页
   ·材料第110页
   ·方法第110-111页
     ·赤霉素(GA_3)处理第110页
     ·水杨酸(SA)处理第110-111页
     ·脱落酸(ABA)处理第111页
     ·总RNA的提取和质量检测第111页
     ·cDNA的合成第111页
     ·实时荧光定量PCR第111页
  2 结果与分析第111-113页
   ·马银花愈伤组织在不同浓度GA3处理下RoWUS和RoCLV1的qPCR分析第111-112页
   ·马银花愈伤组织在不同浓度SA处理下RoWUS和RoCLV1的qPCR表达分析第112-113页
   ·马银花愈伤组织在不同浓度ABA处理下RoWUS和RoCLV1的qPCR表达分析第113页
  3 讨论第113-115页
   ·RoWUS和RoCLV1基因在赤霉素处理下表达模式具有相似性第113-114页
   ·RoCLV1基因可能在参与响应水杨酸中起主要调控作用第114页
   ·RoWUS和RoCLV1基因在脱落酸处理下表达模式具有相似性第114-115页
第六章 小结第115-119页
 1 马银花等杜鹃花离体繁殖体系的优化第115-116页
 2 马银花愈伤组织RoWUS基因及其启动子的克隆与分析第116-117页
 3 马银花愈伤组织RoCLV1基因的克隆与分析第117页
 4 马银花愈伤组织生长过程中干细胞相关基因的定量表达分析第117-119页
参考文献第119-125页
附录 图版及图版说明第125-127页
Appendix第127-129页
图版第129-134页
致谢第134页

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