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SRBSDV非结构蛋白P6在病毒侵染白背飞虱过程中的功能分析

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
1 引言第10-22页
   ·南方水稻黑条矮缩病的研究现状第10-14页
     ·病害的症状特点第10页
     ·病害的发生分布及危害第10页
     ·病害的自然寄主和传播介体第10-11页
     ·SRBSDV病毒粒体特征及分类地位第11页
     ·病毒基因组功能研究第11-14页
   ·呼肠孤病毒的复制研究第14-15页
   ·昆虫细胞培养及应用第15-18页
     ·昆虫细胞培养体系的建立第15-16页
     ·昆虫细胞的应用第16-17页
     ·昆虫细胞在虫传植物病毒研究中的应用第17-18页
   ·免疫荧光技术第18-19页
   ·RNAi的原理及应用第19-21页
     ·RNAi的发现及原理第19-20页
     ·RNAi技术的应用第20-21页
   ·本研究的目的和意义第21-22页
2 材料和方法第22-36页
   ·材料第22-23页
     ·水稻病株和介体昆虫第22页
     ·菌株与载体第22页
     ·实验试剂与抗体第22-23页
   ·实验方法第23-36页
     ·SRBSDV P6抗体制备第23-31页
     ·白背飞虱细胞培养第31页
     ·P6在病毒侵染的白背飞虱培养细胞中的表达第31-34页
     ·P6在白背飞虱体内的定位第34页
     ·dsP6对SRBSDV在白背飞虱细胞中复制的影响第34-36页
3 结果分析第36-46页
   ·P6抗体制备第36-40页
     ·RT-PCR扩增目的片段第36-37页
     ·中间载体pDONR221-P6的构建第37页
     ·表达载体pDEST17-P6的构建第37-38页
     ·Rosetta菌液PCR检测第38页
     ·P6蛋白原核表达第38-39页
     ·Western blot检测P6抗体第39-40页
   ·白背飞虱细胞培养第40页
   ·P6在侵染后白背飞虱培养细胞中表达第40-42页
     ·非结构蛋白P6与纤维状和颗粒状基质均共定位第40-41页
     ·电镜观察P6蛋白在介体培养细胞中定位于病毒原质第41-42页
   ·P6在白背飞虱体内的定位第42-43页
   ·dsP6对SRBSDV在白背飞虱细胞中复制的影响第43-45页
     ·dsRNA的合成第43-44页
     ·dsP6抑制SRBSDV在培养细胞内的侵染第44-45页
   ·小结第45-46页
4 讨论第46-49页
参考文献第49-58页
附录1第58-66页
附录2第66-67页
致谢第67页

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