摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-12页 |
主要符号说明 | 第12-14页 |
第一章 引言 | 第14-42页 |
第一节 沙粒病毒研究现状概述 | 第14-29页 |
·选题背景及意义 | 第14-15页 |
·沙粒病毒科研究概况 | 第15-19页 |
·沙粒病毒简介与分类 | 第15-17页 |
·沙粒病毒生活周期 | 第17-18页 |
·沙粒病毒引发的疾病 | 第18-19页 |
·胡宁病毒研究概况 | 第19-21页 |
·胡宁病毒分布、研究概况 | 第19页 |
·胡宁病毒病毒结构和基因组构成 | 第19-21页 |
·NP在胡宁病毒生活周期中的重要作用 | 第21页 |
·单股负链RNA(-ssRNA)病毒NP的结构与功能研究概况 | 第21-29页 |
·单节段-ssRNA病毒(the order Mononegavirales)NP结构与功能研究概况 | 第22-23页 |
·多节段-ssRNA病毒NP结构与功能研究概况 | 第23-29页 |
·本部分的课题内容与意义 | 第29页 |
第二节 冠状病毒研究现状概述 | 第29-41页 |
·选题背景及意义 | 第29-30页 |
·冠状病毒科研究概况 | 第30-34页 |
·冠状病毒的简介与分类 | 第30-32页 |
·冠状病毒的生活周期 | 第32-33页 |
·冠状病毒引发的疾病 | 第33-34页 |
·SARS病毒研究概况 | 第34-36页 |
·SARS病毒研究概况 | 第34-35页 |
·SARS病毒病毒结构和基因组组成 | 第35-36页 |
·冠状病毒科蛋白质结构与功能研究概况 | 第36-40页 |
·非结构蛋白结构与功能研究 | 第36-39页 |
·结构蛋白结构与功能研究 | 第39-40页 |
·附属蛋白的研究 | 第40页 |
·本部分的课题内容与意义 | 第40-41页 |
第三节 文章结构安排 | 第41-42页 |
第二章 胡宁病毒核蛋白NP表达、纯化与结构解析 | 第42-66页 |
第一节 胡宁病毒NP生物信息学分析及预测 | 第42-46页 |
·核苷酸序列分析 | 第42页 |
·蛋白质序列基本信息 | 第42-43页 |
·蛋白质序列其他分析 | 第43-44页 |
·蛋白质同源序列比对 | 第44-46页 |
第二节 胡宁病毒NP的基因克隆与融合蛋白的构建 | 第46-49页 |
第三节 胡宁病毒NP的蛋白质表达与纯化 | 第49-53页 |
·融合蛋白试表达 | 第49页 |
·融合蛋白大量表达 | 第49-50页 |
·融合蛋白的纯化 | 第50-53页 |
·细胞的破碎 | 第50页 |
·GST亲和层析 | 第50-51页 |
·离子交换层析 | 第51-53页 |
第四节 胡宁病毒NP△340的蛋白质结晶与数据收集 | 第53-59页 |
·蛋白质的结晶 | 第53-57页 |
·蛋白质结晶原理 | 第53-55页 |
·胡宁病毒NP△340蛋白质晶体的初步筛选 | 第55-56页 |
·胡宁病毒NP△340蛋白质晶体的优化 | 第56-57页 |
·数据的收集 | 第57-59页 |
第五节 胡宁病毒NP△340的蛋白质晶体数据相位的确定与结构修正 | 第59-66页 |
·解决蛋白质晶体数据相位的方法 | 第59页 |
·胡宁病毒NP△340相位的确定与精修 | 第59-60页 |
·最终结构模型的质量评估 | 第60-66页 |
第三章 胡宁病毒NP△340的三维结构分析 | 第66-79页 |
第一节 胡宁病毒NP△340的总体结构的描述 | 第66-67页 |
第二节 胡宁病毒NP△340与拉沙热病毒NP的结构比较 | 第67-69页 |
第三节 胡宁病毒NP△340结构中金属离子的存在情况 | 第69-72页 |
第四节 胡宁病毒NP△340功能分析 | 第72-79页 |
·溶液状态下的胡宁病毒NP△340结合二价金属离子情况 | 第72-73页 |
·胡宁病毒NP△340的3’-5’核酸外切酶活性测定 | 第73-79页 |
第四章 SARS冠状病毒非结构蛋白7与非结构蛋白8 C端结构域的复合物 | 第79-93页 |
第一节 非结构蛋白8的C端结构域的证实 | 第79-82页 |
第二节 非结构蛋白8的C端结构域的克隆构建 | 第82-83页 |
第三节 非结构蛋白7与8的C端结构域的蛋白质共纯化 | 第83-86页 |
·非结构蛋白7与8C的大量表达 | 第83页 |
·非结构蛋白7与8C的菌体破碎 | 第83-84页 |
·亲和层析 | 第84页 |
·凝胶排阻层析 | 第84-86页 |
第四节 非结构蛋白7与8的C端结构域复合物的结构解析与分析 | 第86-93页 |
·复合物的结晶 | 第86-87页 |
·复合物的数据收集与处理 | 第87-89页 |
·非结构蛋白7-8C复合物结构分析 | 第89-93页 |
第五章 结论 | 第93-94页 |
参考文献 | 第94-105页 |
致谢 | 第105-106页 |
附录A 胡宁病毒核蛋白核苷酸序列与氨基酸序列 | 第106-108页 |
附录B 非结构蛋白7与非结构蛋白8相关核苷酸序列与氨基酸序列 | 第108-110页 |
个人简历在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第110页 |