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胡宁病毒核蛋白结构与功能的研究

摘要第1-6页
Abstract第6-12页
主要符号说明第12-14页
第一章 引言第14-42页
 第一节 沙粒病毒研究现状概述第14-29页
     ·选题背景及意义第14-15页
     ·沙粒病毒科研究概况第15-19页
       ·沙粒病毒简介与分类第15-17页
       ·沙粒病毒生活周期第17-18页
       ·沙粒病毒引发的疾病第18-19页
     ·胡宁病毒研究概况第19-21页
       ·胡宁病毒分布、研究概况第19页
       ·胡宁病毒病毒结构和基因组构成第19-21页
       ·NP在胡宁病毒生活周期中的重要作用第21页
     ·单股负链RNA(-ssRNA)病毒NP的结构与功能研究概况第21-29页
       ·单节段-ssRNA病毒(the order Mononegavirales)NP结构与功能研究概况第22-23页
       ·多节段-ssRNA病毒NP结构与功能研究概况第23-29页
     ·本部分的课题内容与意义第29页
 第二节 冠状病毒研究现状概述第29-41页
     ·选题背景及意义第29-30页
     ·冠状病毒科研究概况第30-34页
       ·冠状病毒的简介与分类第30-32页
       ·冠状病毒的生活周期第32-33页
       ·冠状病毒引发的疾病第33-34页
     ·SARS病毒研究概况第34-36页
       ·SARS病毒研究概况第34-35页
       ·SARS病毒病毒结构和基因组组成第35-36页
     ·冠状病毒科蛋白质结构与功能研究概况第36-40页
       ·非结构蛋白结构与功能研究第36-39页
       ·结构蛋白结构与功能研究第39-40页
       ·附属蛋白的研究第40页
     ·本部分的课题内容与意义第40-41页
 第三节 文章结构安排第41-42页
第二章 胡宁病毒核蛋白NP表达、纯化与结构解析第42-66页
 第一节 胡宁病毒NP生物信息学分析及预测第42-46页
     ·核苷酸序列分析第42页
     ·蛋白质序列基本信息第42-43页
     ·蛋白质序列其他分析第43-44页
     ·蛋白质同源序列比对第44-46页
 第二节 胡宁病毒NP的基因克隆与融合蛋白的构建第46-49页
 第三节 胡宁病毒NP的蛋白质表达与纯化第49-53页
     ·融合蛋白试表达第49页
     ·融合蛋白大量表达第49-50页
     ·融合蛋白的纯化第50-53页
       ·细胞的破碎第50页
       ·GST亲和层析第50-51页
       ·离子交换层析第51-53页
 第四节 胡宁病毒NP△340的蛋白质结晶与数据收集第53-59页
     ·蛋白质的结晶第53-57页
       ·蛋白质结晶原理第53-55页
       ·胡宁病毒NP△340蛋白质晶体的初步筛选第55-56页
       ·胡宁病毒NP△340蛋白质晶体的优化第56-57页
     ·数据的收集第57-59页
 第五节 胡宁病毒NP△340的蛋白质晶体数据相位的确定与结构修正第59-66页
     ·解决蛋白质晶体数据相位的方法第59页
     ·胡宁病毒NP△340相位的确定与精修第59-60页
     ·最终结构模型的质量评估第60-66页
第三章 胡宁病毒NP△340的三维结构分析第66-79页
 第一节 胡宁病毒NP△340的总体结构的描述第66-67页
 第二节 胡宁病毒NP△340与拉沙热病毒NP的结构比较第67-69页
 第三节 胡宁病毒NP△340结构中金属离子的存在情况第69-72页
 第四节 胡宁病毒NP△340功能分析第72-79页
     ·溶液状态下的胡宁病毒NP△340结合二价金属离子情况第72-73页
     ·胡宁病毒NP△340的3’-5’核酸外切酶活性测定第73-79页
第四章 SARS冠状病毒非结构蛋白7与非结构蛋白8 C端结构域的复合物第79-93页
 第一节 非结构蛋白8的C端结构域的证实第79-82页
 第二节 非结构蛋白8的C端结构域的克隆构建第82-83页
 第三节 非结构蛋白7与8的C端结构域的蛋白质共纯化第83-86页
     ·非结构蛋白7与8C的大量表达第83页
     ·非结构蛋白7与8C的菌体破碎第83-84页
     ·亲和层析第84页
     ·凝胶排阻层析第84-86页
 第四节 非结构蛋白7与8的C端结构域复合物的结构解析与分析第86-93页
     ·复合物的结晶第86-87页
     ·复合物的数据收集与处理第87-89页
     ·非结构蛋白7-8C复合物结构分析第89-93页
第五章 结论第93-94页
参考文献第94-105页
致谢第105-106页
附录A 胡宁病毒核蛋白核苷酸序列与氨基酸序列第106-108页
附录B 非结构蛋白7与非结构蛋白8相关核苷酸序列与氨基酸序列第108-110页
个人简历在学期间发表的学术论文与研究成果第110页

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