| 缩略语表 | 第1-7页 |
| 中文摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 1 前言 | 第12-17页 |
| 2 实验材料 | 第17-21页 |
| ·实验细胞株 | 第17页 |
| ·主要试剂和耗材 | 第17-19页 |
| ·主要仪器和设备 | 第19-20页 |
| ·主要溶液和试剂的配制 | 第20-21页 |
| 3 实验方法 | 第21-44页 |
| ·PD-1 基因 pre-mRNA 的制备与靶点筛选 | 第21-26页 |
| ·PD-1 基因 mRNA 的制备与靶点筛选 | 第26-32页 |
| ·靶点有效性的体外验证 | 第32-33页 |
| ·靶点的确认 | 第33页 |
| ·Ribozyme 慢病毒载体的构建 | 第33-36页 |
| ·包装 Ribozyme 慢病毒、测定滴度 | 第36-38页 |
| ·Ribozyme 慢病毒感染 Jurkat 细胞 | 第38页 |
| ·RT-PCR 检测 PD-1 RNA 水平表达 | 第38-40页 |
| ·Western Blot 检测蛋白水平 PD-1 表达 | 第40-42页 |
| ·共培养体系 | 第42页 |
| ·ELISA 检测细胞因子的分泌 | 第42-43页 |
| ·MTS 检测 T 细胞杀伤能力 | 第43-44页 |
| 4 结果 | 第44-66页 |
| ·pre-mRNA 的制备与靶点筛选 | 第44-49页 |
| ·mRNA 的制备与靶点筛选 | 第49-55页 |
| ·初步确认的靶点及有效性的体外验证 | 第55-58页 |
| ·靶点的确定 | 第58-59页 |
| ·Ribozyme 慢病毒载体的构建 | 第59-61页 |
| ·Ribozyme 慢病毒滴度测定与细胞感染 | 第61页 |
| ·Jurkat 细胞 Ribozyme 慢病毒感染结果 | 第61-64页 |
| ·RT-PCR 检测 PD-1 RNA 水平表达 | 第64页 |
| ·Western Blot 检测蛋白水平 PD-1 表达 | 第64页 |
| ·ELISA 检测细胞因子的分泌 | 第64-65页 |
| ·MTS 检测 T 细胞杀伤能力 | 第65-66页 |
| 讨论 | 第66-68页 |
| 结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-74页 |
| 附录 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 文献综述 | 第76-86页 |
| 参考文献 | 第81-86页 |
