中英文缩略词表 | 第1-9页 |
中文摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
1 引言 | 第13-17页 |
·结肠癌的表观遗传学研究 | 第13-16页 |
·结肠癌的概述 | 第13-14页 |
·表观遗传学概念 | 第14页 |
·DNA 异常甲基化在肿瘤发生发展中的作用 | 第14-16页 |
·BCL6B 基因概况 | 第16-17页 |
2 BCL6B 在结肠癌细胞系和组织中的表达及甲基化改变 | 第17-41页 |
·实验试剂及材料 | 第17-21页 |
·实验材料 | 第17页 |
·实验仪器 | 第17-18页 |
·实验试剂及耗材 | 第18-20页 |
·主要缓冲液的制备 | 第20-21页 |
·实验方法 | 第21-35页 |
·细胞培养及药物诱导去甲基化 | 第21-22页 |
·结肠癌细胞系 DNA 提取及甲基化特异性 PCR(MSP) | 第22-27页 |
·细胞总 RNA 提取及 RT‐PCR | 第27-30页 |
·亚硫酸盐基因组测序(bisulfite sequencing,BGS)29 | 第30-32页 |
·结肠癌组织标本提取 DNA 及 MSP | 第32页 |
·结肠癌组织 BCL6B 免疫化学染色 | 第32-34页 |
·免疫组织化学染色结果判定 | 第34-35页 |
·统计学分析 | 第35页 |
·实验结果 | 第35-40页 |
·BCL6B 在结肠癌细胞系和结肠癌组织中的甲基化改变 | 第35-36页 |
·5‐Aza 对 7 株结肠癌细胞系中 BCL6B mRNA 表达的影响 | 第36页 |
·亚硫酸盐基因组测序结果 | 第36-37页 |
·BCL6B 在原发性结肠癌和癌旁组织中的表达情况 | 第37-38页 |
·结肠癌患者的临床指证与 BCL6B 基因启动子区甲基化关系 | 第38-40页 |
·讨论 | 第40-41页 |
·本章小结 | 第41页 |
3 BCL6B 在体外实验中的抑癌作用 | 第41-55页 |
·试剂材料 | 第42-44页 |
·实验材料和设备 | 第42-43页 |
·实验试剂和耗材 | 第43-44页 |
·实验方法 | 第44-49页 |
·瞬时转染恢复 BCL6B 表达 | 第44-45页 |
·蛋白收取及浓度测定 | 第45-46页 |
·细胞周期检测 | 第46-47页 |
·细胞凋亡检测 | 第47页 |
·细胞增殖实验 | 第47-48页 |
·克隆形成实验 | 第48-49页 |
·统计方法 | 第49页 |
·结果 | 第49-53页 |
·瞬时转染能恢复 BCL6B 表达 | 第49页 |
·BCL6B 对细胞周期的影响 | 第49-51页 |
·BCL6B 对细胞凋亡的影响 | 第51页 |
·BCL6B 对细胞增殖的影响 | 第51-52页 |
·BCL6B 抑制细胞克隆形成能力 | 第52-53页 |
·讨论 | 第53-54页 |
·本章小结 | 第54-55页 |
4 结论 | 第55页 |
参考文献 | 第55-61页 |
附录 | 第61-62页 |
致谢 | 第62-64页 |
综述 | 第64-73页 |
参考文献 | 第69-73页 |