| 缩略语表 | 第1-8页 |
| 中文摘要 | 第8-14页 |
| ABSTRACT | 第14-23页 |
| 前言 | 第23-24页 |
| 第一部分 Intermedin 在糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤中的保护作用及其机制研究 | 第24-66页 |
| 第一章 Intermedin 对糖尿病大鼠缺血再灌注心肌组织氧化应激的影响 | 第24-41页 |
| 引言 | 第24页 |
| ·材料 | 第24-26页 |
| ·实验动物 | 第24页 |
| ·主要实验药品及试剂 | 第24-25页 |
| ·主要实验仪器 | 第25-26页 |
| ·方法 | 第26-32页 |
| ·建立糖尿病大鼠模型 | 第26页 |
| ·建立心肌缺血再灌注模型 | 第26页 |
| ·实验分组 | 第26-27页 |
| ·检测的指标 | 第27-32页 |
| ·统计学处理 | 第32页 |
| ·结果 | 第32-36页 |
| ·血糖和体重的变化 | 第32-34页 |
| ·血清 LDH 和 CK-MB 活性的变化 | 第34-35页 |
| ·心肌组织 SOD 活性和 MDA 含量的变化 | 第35页 |
| ·各组大鼠心肌组织中 NOS、NO 的变化 | 第35页 |
| ·各组大鼠心肌组织 p22、p67 和 gp91mRNA 表达结果的比较 | 第35-36页 |
| ·讨论 | 第36-40页 |
| 小结 | 第40-41页 |
| 第二章 Intermedin 对糖尿病大鼠缺血再灌注心肌组织细胞凋亡的影响 | 第41-53页 |
| 引言 | 第41页 |
| ·材料 | 第41-42页 |
| ·实验动物 | 第41页 |
| ·主要实验药品及试剂 | 第41页 |
| ·主要实验仪器 | 第41-42页 |
| ·主要溶液配制 | 第42页 |
| ·方法 | 第42-45页 |
| ·建立糖尿病模型 | 第42页 |
| ·建立缺血再灌注模型 | 第42页 |
| ·实验分组 | 第42页 |
| ·检测指标 | 第42-45页 |
| ·统计学处理 | 第45页 |
| ·结果 | 第45-50页 |
| ·讨论 | 第50-52页 |
| 小结 | 第52-53页 |
| 第三章 Intermedin 对糖尿病大鼠心肌缺血再灌注炎性细胞因子的影响 | 第53-66页 |
| 引言 | 第53页 |
| ·材料 | 第53-54页 |
| ·实验动物 | 第53页 |
| ·主要实验试剂 | 第53页 |
| ·主要实验仪器 | 第53-54页 |
| ·方法 | 第54-59页 |
| ·建立大鼠糖尿病模型 | 第54页 |
| ·建立缺血再灌注模型 | 第54页 |
| ·实验分组 | 第54页 |
| ·检测指标 | 第54-59页 |
| ·统计学处理 | 第59页 |
| ·结果 | 第59-63页 |
| ·血清中 TNF-α、IL-1β和 IL-6 含量 | 第59-60页 |
| ·心肌组织中 TNF-α、IL-1β和 IL-6mRNA 的表达 | 第60-61页 |
| ·心肌组织中 NF-κB 表达的变化 | 第61-62页 |
| ·Western blot 检测心肌组织 NF-κB 蛋白的表达 | 第62-63页 |
| ·讨论 | 第63-65页 |
| 小结 | 第65-66页 |
| 第二部分 Intermedin 对高糖孵育 H9c2 细胞缺氧-复氧性损伤的保护作用 | 第66-95页 |
| 引言 | 第66页 |
| 第一章 Intermedin（IMD）真核表达质粒的构建及鉴定 | 第66-83页 |
| 引言 | 第66页 |
| ·材料 | 第66-68页 |
| ·实验用细胞株 | 第66页 |
| ·主要实验仪器 | 第66-67页 |
| ·实验主要试剂 | 第67-68页 |
| ·主要溶液的配置 | 第68页 |
| ·方法 | 第68-76页 |
| ·大鼠 IMD 的 CDS 区全长的合成 | 第68-69页 |
| ·pMD19-TSimple 载体的构建 | 第69页 |
| ·质粒 DNA 提取62 | 第69-70页 |
| ·质粒 DNA 酶切及凝胶电泳分离、鉴定 | 第70页 |
| ·质粒抽提与测序 | 第70页 |
| ·表达质粒 plRES2-EGFP 的构建 | 第70页 |
| ·重组质粒的中量制备 | 第70-71页 |
| ·大鼠心肌细胞培养及实验分组 | 第71页 |
| ·细胞转染 | 第71-72页 |
| ·转染效率的测定[11] | 第72页 |
| ·实时荧光定量 PCR 检测转染前后 IMDmRNA表达 | 第72-74页 |
| ·westernblot检测检测转染前后 IMD 蛋白表达 | 第74-75页 |
| ·统计学方法 | 第75-76页 |
| ·结果 | 第76-81页 |
| ·重组质粒 plRES2-EGFP 构建模式图 | 第76页 |
| ·重组质粒测序结果 | 第76-77页 |
| ·重组质粒酶切结果 | 第77页 |
| ·倒置相差显微镜观察细胞形态 | 第77页 |
| ·荧光显微镜观察不同转染条件下的转染情况 | 第77-78页 |
| ·流式细胞仪检测测不同转染条件下的转染效率 | 第78-79页 |
| ·转染后各组细胞 IMDmRNA 的表达变化 | 第79-80页 |
| ·转染后各组细胞 IMD 蛋白的表达变化 | 第80-81页 |
| ·讨论 | 第81-82页 |
| 小结 | 第82-83页 |
| 第二章 IMD 对高糖孵育 H9c2 细胞缺氧-复氧损伤的影响 | 第83-95页 |
| 引言 | 第83页 |
| ·材料 | 第83-84页 |
| ·主要实验试剂 | 第83页 |
| ·主要实验仪器 | 第83页 |
| ·主要试剂的配置 | 第83-84页 |
| ·方法 | 第84-88页 |
| ·细胞培养 | 第84页 |
| ·细胞转染 | 第84页 |
| ·缺氧-复氧模型建立 | 第84页 |
| ·实验分组 | 第84-85页 |
| ·检测指标及方法 | 第85-87页 |
| ·统计学分析 | 第87-88页 |
| ·结果 | 第88-94页 |
| ·心肌细胞的活力 | 第88页 |
| ·细胞上清液 LDH 活性变化 | 第88-89页 |
| ·细胞上清液 SOD 活性变化 | 第89-90页 |
| ·细胞上清液 MDA 含量变化 | 第90-91页 |
| ·细胞凋亡率变化 | 第91-93页 |
| ·Western blot 检测结果 | 第93-94页 |
| ·讨论 | 第94-95页 |
| 小结 | 第95页 |
| 结论 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-104页 |
| 综述 | 第104-113页 |
| 参考文献 | 第109-113页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第113-114页 |
| 致谢 | 第114-115页 |
| 个人简介 | 第115-116页 |
