| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-19页 |
| ·课题背景 | 第11-12页 |
| ·奶牛乳腺炎 | 第11页 |
| ·奶牛乳腺炎的病因 | 第11-12页 |
| ·金葡菌引起的奶牛乳腺炎研究现状 | 第12-13页 |
| ·金葡菌综述 | 第12页 |
| ·金葡菌引起的奶牛乳腺炎的研究现状 | 第12页 |
| ·耐药金葡菌 | 第12-13页 |
| ·MRSA的生物学特性 | 第12-13页 |
| ·MRSA的耐药机制 | 第13页 |
| ·奶牛乳腺炎的治疗 | 第13页 |
| ·IFN-γ的研究进展 | 第13-16页 |
| ·IFN的来源 | 第13-14页 |
| ·IFN的结构和分类 | 第14-15页 |
| ·IFN-γ的生物学活性 | 第15-16页 |
| ·IFN-γ调节免疫的作用 | 第15页 |
| ·IFN-γ的抗肿瘤活性 | 第15页 |
| ·IFN-γ抗病毒活性 | 第15-16页 |
| ·γ-干扰素在奶牛乳腺炎上的应用 | 第16页 |
| ·防治乳腺炎的生物制剂 | 第16页 |
| ·奶牛乳腺炎疫苗的佐剂 | 第16页 |
| ·存在的问题和展望 | 第16-17页 |
| ·研究的内容和意义 | 第17-19页 |
| ·研究内容 | 第17页 |
| ·研究的意义 | 第17-19页 |
| 第二章 多重耐药金葡菌的筛选及耐药基因的检测 | 第19-29页 |
| ·实验材料 | 第19-21页 |
| ·菌种和材料 | 第19页 |
| ·试剂 | 第19页 |
| ·主要仪器设备 | 第19-20页 |
| ·主要试剂的配制 | 第20-21页 |
| ·实验方法 | 第21-23页 |
| ·金葡菌的复苏及重新鉴定 | 第21页 |
| ·药敏试验 | 第21页 |
| ·最低抑菌浓度法(MIC)测定金葡菌对消毒剂的耐受性 | 第21页 |
| ·耐药基因检测 | 第21-23页 |
| ·引物设计及合成 | 第21-22页 |
| ·金葡菌基因组DNA的提取 | 第22页 |
| ·PCR 检测 | 第22-23页 |
| ·电泳检测 | 第23页 |
| ·结果与分析 | 第23-27页 |
| ·金葡菌对抗生素的耐药结果 | 第23-24页 |
| ·金葡菌对消毒剂敏感性检测 | 第24-26页 |
| ·基因检测 | 第26-27页 |
| ·讨论 | 第27-28页 |
| ·小结 | 第28-29页 |
| 第三章 重组BoIFN-γ的基因克隆、载体构建、诱导表达及蛋白纯化 | 第29-41页 |
| ·材料和方法 | 第29-36页 |
| ·实验动物 | 第29页 |
| ·菌株和载体 | 第29页 |
| ·工具酶和试剂 | 第29页 |
| ·引物 | 第29-30页 |
| ·主要仪器设备 | 第30页 |
| ·主要试剂的配制 | 第30页 |
| ·实验方法 | 第30-36页 |
| ·牛外周血淋巴细胞的分离与诱导培养 | 第30-31页 |
| ·牛外周血总RNA的提取 | 第31页 |
| ·反转录获得牛的cDNA | 第31-32页 |
| ·PCR扩增BoIFN-γ | 第32页 |
| ·PCR产物的回收 | 第32-33页 |
| ·目的片段与T载体的连接 | 第33页 |
| ·重组质粒的转化 | 第33页 |
| ·重组质粒的提取 | 第33页 |
| ·重组质粒的双酶切鉴定 | 第33-34页 |
| ·重组质粒和载体的双酶切 | 第34页 |
| ·目的片段与表达载体pET-32a(+)的连接 | 第34-35页 |
| ·重组质粒的转化 | 第35页 |
| ·重组质粒的提取 | 第35页 |
| ·重组载体的PCR鉴定和双酶切鉴定 | 第35页 |
| ·重组BoIFN-γ基因的诱导表达 | 第35页 |
| ·SDS-PAGE凝胶电泳 | 第35-36页 |
| ·western blot验证 | 第36页 |
| ·重组BolFN-γ融合蛋白的纯化 | 第36页 |
| ·结果 | 第36-40页 |
| ·牛外周血淋巴细胞总RNA完整性检测 | 第36-37页 |
| ·cDNA的PCR扩增结果 | 第37页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第37-38页 |
| ·双酶切鉴定结果 | 第38-39页 |
| ·BoIFN-γ的诱导表达和蛋白纯化 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40页 |
| ·小结 | 第40-41页 |
| 第四章 重组BoIFN-γ对临床奶牛乳腺炎的治疗效果 | 第41-45页 |
| ·材料 | 第41页 |
| ·实验动物 | 第41页 |
| ·主要仪器设备 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-42页 |
| ·肌肉注射实验动物 | 第41页 |
| ·血常规检测 | 第41-42页 |
| ·DHI测定牛奶的体细胞数 | 第42页 |
| ·数据处理 | 第42页 |
| ·结果和分析 | 第42-44页 |
| ·对血常规指标的影响 | 第42-43页 |
| ·对白细胞总数的影响 | 第42页 |
| ·对中性粒细胞百分比(%)的影响 | 第42-43页 |
| ·对淋巴细胞百分比(%)的影响 | 第43页 |
| ·对体细胞总数的影响 | 第43-44页 |
| ·讨论 | 第44页 |
| ·IFN-γ对临床奶牛乳腺炎治疗效果 | 第44页 |
| ·IFN-γ对奶牛血常规的变化趋势影响 | 第44页 |
| ·体细胞变化趋势 | 第44页 |
| ·小结 | 第44-45页 |
| 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-49页 |
| 附录A | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50页 |
