| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 1 引言 | 第9-21页 |
| ·油茶的食用、营养保健价值及在国家粮油安全战略中的重要地位 | 第9-10页 |
| ·植物 PCG 的类别及在发育生物学上的功能 | 第10-16页 |
| ·植物 PcG 基因 | 第10-13页 |
| ·H3K27me3 的维持与去除 | 第13-16页 |
| ·RNAI技术的原理及应用 | 第16-18页 |
| ·RNAi 的原理与特点 | 第16-17页 |
| ·RNAi 的作用机制 | 第17页 |
| ·RNAi 在植物中的应用研究 | 第17-18页 |
| ·油茶高频再生体系是限制油茶分子生物学研究的瓶颈 | 第18-19页 |
| ·本研究的目的、意义与技术路线 | 第19-21页 |
| 2 油茶叶片体细胞胚诱导的优化尝试 | 第21-28页 |
| ·材料 | 第21页 |
| ·方法 | 第21-23页 |
| ·外植体消毒 | 第21页 |
| ·愈伤组织快速诱导研究 | 第21-22页 |
| ·愈伤组织分化诱导研究 | 第22页 |
| ·分化芽的增殖培养研究 | 第22-23页 |
| ·结果与分析 | 第23-27页 |
| ·愈伤组织快速诱导研究 | 第23-24页 |
| ·愈伤组织分化诱导研究 | 第24页 |
| ·分化芽的增殖培养研究 | 第24-27页 |
| ·小结与讨论 | 第27-28页 |
| 3 油茶 PCG 基因的克隆 | 第28-54页 |
| ·材料 | 第28-29页 |
| ·植物材料 | 第28页 |
| ·菌株和质粒 | 第28页 |
| ·酶及试剂 | 第28-29页 |
| ·仪器设备 | 第29页 |
| ·方法 | 第29-38页 |
| ·油茶嫩叶总 RNA 的提取 | 第29-30页 |
| ·3`RACE 引物设计及 3`RACE | 第30-34页 |
| ·5`RACE 引物设计及 5`RACE | 第34-36页 |
| ·目的片段回收 | 第36页 |
| ·大肠杆菌转化 | 第36-37页 |
| ·质粒 DNA 提取 | 第37-38页 |
| ·测序及生物信息学分析 | 第38页 |
| ·结果与分析 | 第38-52页 |
| ·油茶嫩叶片总 RNA 的提取 | 第38页 |
| ·电泳检测结果 | 第38-41页 |
| ·测序结果分析 | 第41-46页 |
| ·油茶 EMF2 基因的全长 cDNA 克隆及生物信息学分析 | 第46-52页 |
| ·小结与讨论 | 第52-54页 |
| 4 PCG 基因的 RNAI 载体构建及农杆菌转化 | 第54-62页 |
| ·材料 | 第54-55页 |
| ·菌株和质粒 | 第54-55页 |
| ·酶、抗生素及试剂 | 第55页 |
| ·仪器设备 | 第55页 |
| ·方法 | 第55-59页 |
| ·干扰片段引物设计 | 第55-56页 |
| ·PCR 扩增含 attB 接头序列的目的片段 | 第56页 |
| ·BP 重组反应 | 第56-57页 |
| ·LR 重组反应 | 第57-58页 |
| ·LBA4404 农杆菌感受态细胞的制备 | 第58页 |
| ·LR 重组质粒冻融法转化 LBA4404 | 第58-59页 |
| ·结果与分析 | 第59-61页 |
| ·加 attB 接头的片段电泳检测 | 第59-60页 |
| ·BP 重组反应电泳检测 | 第60页 |
| ·LR 重组反应电泳检测 | 第60-61页 |
| ·农杆菌转化的鉴定 | 第61页 |
| ·小结与讨论 | 第61-62页 |
| 5 农杆菌介导的油茶叶片快速侵染的可行性 | 第62-67页 |
| ·材料 | 第62-63页 |
| ·植物材料 | 第62页 |
| ·基因材料、发夹结构构建及农杆菌转化 | 第62-63页 |
| ·方法 | 第63-64页 |
| ·侵染用工程菌的制备 | 第63页 |
| ·油茶对 Basta 的耐受性试验 | 第63页 |
| ·农杆菌田间侵染及共培养 | 第63-64页 |
| ·RNAi 效应的检测 | 第64页 |
| ·结果调查与分析 | 第64-66页 |
| ·油茶可一定程度耐受 Basta 药害 | 第64-65页 |
| ·油茶嫩叶快速侵染可能导致 RNAi 效应 | 第65-66页 |
| ·小结与讨论 | 第66-67页 |
| 6 几个关键 PCG 基因在不同器官中的表达分析 | 第67-71页 |
| ·材料 | 第67页 |
| ·植物材料 | 第67页 |
| ·酶及试剂、仪器设备 | 第67页 |
| ·方法 | 第67-68页 |
| ·RNA 的制备 | 第67页 |
| ·实时荧光定量 PCR | 第67-68页 |
| ·结果与分析 | 第68-70页 |
| ·小结与讨论 | 第70-71页 |
| 7 总结 | 第71-72页 |
| ·本研究的主要结论 | 第71页 |
| ·展望与建议 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 作者简介 | 第82页 |
| 在读研究生期间发表的文章 | 第82页 |
