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云南红梨果皮转录因子MYB、bHLH和WD40互作及调控果皮着色机理研究

摘要第1-6页
Abstract第6-9页
目录第9-12页
插图和附表清单第12-16页
第一章 文献综述第16-32页
   ·云南红梨简介及研究进展第16页
   ·红梨及其它植物中花青素生物合成途径的研究进展第16-21页
   ·影响花青素合成的环境因素第21-24页
     ·光照的影响第22页
     ·温度的影响第22-23页
     ·其它因素的影响第23-24页
   ·植物中花青素生物合成途径调控模式第24-25页
   ·MYB、bHLH和WD40转录因子研究进展第25-30页
     ·MYB转录因子第25-27页
     ·bHLH转录因子第27-28页
     ·WD40转录因子第28-29页
     ·MYB-bHLH-WD40蛋白复合物的作用与功能第29-30页
   ·本研究的目的及意义第30-32页
第二章 云南红梨“云红梨1号”果皮转录因子MYB、bHLH和WD40互作的研究第32-55页
   ·材料和方法第32-41页
     ·植物材料及套袋处理第32-33页
     ·菌株及载体第33页
     ·酶与试剂第33页
     ·PyMYB、PybHLH和PyWD40基因的TA克隆第33-35页
     ·PyMYB、PybHLH和PyWD40基因的原核表达载体的构建及诱导表达第35-37页
     ·亲和层析柱分离纯化目的蛋白的方法第37-38页
     ·蛋白质的提取、Western blotting和免疫共沉淀分析第38-39页
     ·双分子荧光互补载体的构建、洋葱转化和荧光定位观察第39-40页
     ·GST融合蛋白pull-down分析第40-41页
     ·Far Western blotting检测第41页
   ·结果与分析第41-52页
     ·PyMYB、PybHLH和PyWD40基因的克隆第41-42页
     ·PyMYB、PybHLH和PyWD40重组蛋白的表达及纯化第42-47页
       ·PyMYB、PybHLH和PyWD40重组蛋白表达条件的优化第42-44页
       ·PyMYB、PybHLH和PyWD40重组蛋白表达形式的鉴定第44-45页
       ·PyMYB、PybHLH和PyWD40重组蛋白的纯化第45-47页
     ·PyMYB,PybHLH和PyWD40表达水平检测第47-48页
     ·体内实验验证PyMYB、PybHLH和PyWD40之间的相互作用第48-50页
     ·体外实验验证PyMYB、PybHLH和PyWD40的相互作用第50-52页
   ·讨论第52-55页
第三章 云南红梨“云红梨1号”果皮MYB转录因子结合花青素结构基因启动子的分析第55-73页
   ·材料和方法第55-62页
     ·植物材料第55-56页
     ·菌株及质粒第56页
     ·酶和试剂第56页
     ·PyANS、PyDFR、PyUFGT和PyF3H基因启动子的扩增及序列分析第56-58页
     ·染色质免疫共沉淀技术分离MYB蛋白结合的花青素结构基因第58-59页
     ·电泳迁移率实验分析MYB蛋白结合的靶DNA第59-62页
   ·结果分析第62-71页
     ·PyANS、PyDFR、PyUFGT和PyF3H基因启动子的克隆第62-63页
     ·启动子序列分析第63-67页
     ·体内分析MYB蛋白与花青素结构基因转录启动子的结合第67-69页
     ·体外分析MYB蛋白与PyANS、PyDFR和PyUFGT启动子的结合第69-71页
   ·讨论第71-73页
第四章 总结和展望第73-75页
致谢第75-76页
参考文献第76-89页
附录A 攻读硕士期间发表论文第89页

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