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十字花科黑腐病菌中表达受酸碱影响的小RNA的鉴定和功能研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-15页
第一章 前言第15-26页
   ·细菌小RNA研究进展第15-20页
     ·细菌小RNA的发现第15页
     ·细菌小RNA的生物学功能第15-18页
     ·细菌小RNA的作用机制第18-19页
     ·细菌小RNA的鉴定方法第19-20页
   ·与细菌的酸碱胁迫相关的细菌小RNA的研究概况第20-23页
   ·黄单胞菌小RNA的研究概况第23-25页
   ·本研究的目的和意义第25-26页
第二章 材料方法第26-44页
   ·实验材料第26-32页
     ·本研究所用的主要菌株和质粒第26页
     ·本研究所用引物第26-28页
     ·本研究所用的杂交探针第28-29页
     ·本研究所用的抗生素第29-30页
     ·本研究所使用的主要培养基第30页
     ·菌株的培养和保存第30-31页
     ·常用的试剂和缓冲液第31-32页
     ·常用的试剂盒第32页
   ·实验方法第32-44页
     ·细菌总DNA的提取第32页
     ·细菌总RNA的提取第32-33页
     ·总RNA的消化第33-34页
     ·小RNA的胶回收第34页
     ·小RNA的Northern Blotting验证第34-36页
     ·小RNA的RT-PCR验证第36-38页
     ·小RNA缺失突变体或者过量表达株构建过程中所用的方法第38-41页
     ·缺失突变体和过量表达株的胞外酶和胞外多糖的平板检测第41-43页
     ·致病性实验第43页
     ·HR实验第43页
     ·对pH值耐受性的检测第43页
     ·对各种金属离子耐受性的检测第43页
     ·对SDS和NaCl的抗性检测第43-44页
第三章 Xcc 8004中表达受酸碱影响的小RNA的全基因组鉴定第44-59页
   ·在全基因组水平上鉴定表达受酸碱影响的小RNA的策略第44页
   ·代表酸性和碱性培养条件的PH值、培养基及生长期的确定第44-46页
   ·表达受酸碱影响的小RNA的鉴定第46-59页
     ·Xcc 8004的培养及总RNA提取第46-47页
     ·小分子RNA(50-200 nt和201-500 nt)的分离和纯化第47页
     ·50-200 nt和201-500 nt RNA的Solexa测序cDNA库的构建第47页
     ·Solexa测序及序列分析第47-50页
     ·表达受酸碱影响的候选小RNA的确定第50-53页
     ·表达受酸碱影响的候选小RNA的验证第53-59页
第四章 表达受酸碱影响的小RNA的功能研究第59-88页
   ·鉴定小RNA功能的策略第59页
   ·小RNA缺失突变体构建第59-66页
     ·小RNA缺失突变体构建策略第60-61页
     ·小RNA缺失突变体构建过程第61-66页
   ·小RNA过量表达株的构建第66-71页
     ·小RNA过量表达株的构建策略第66页
     ·小RNA缺失突变体构建过程第66-71页
   ·小RNA缺失突变体和过量表达菌株的表型分析第71-87页
     ·对酸碱的耐受能力检测第71-73页
     ·对SDS及NaCl的耐受能力检测第73-76页
     ·对重金属的耐受能力检测第76-80页
     ·对寄主植物的致病力检测第80-82页
     ·胞外酶和胞外多糖的检测第82-85页
     ·对非寄主植物的HR反应能力检测第85-87页
   ·小结第87-88页
第五章 总结与讨论第88-92页
   ·总结第88-89页
   ·讨论第89-91页
   ·后续工作第91-92页
参考文献第92-102页
附录第102-103页
致谢第103-104页
攻读硕士学位期间发表的学术论文目录第104页

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