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MiR-221沉默PUMA在膀胱癌免疫逃逸中作用与机制的实验研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-14页
引言第14-17页
第一部分:转染 miR-221 抑制剂抑制膀胱癌 T24、5637、J82 细胞凋亡初的步研究第17-59页
 1 材料与方法第17-34页
   ·细胞与分组第17页
   ·主要仪器第17-18页
   ·主要试剂第18-20页
   ·实验方法第20-34页
   ·统计处理第34页
 2 结果第34-55页
   ·转染效率的检测第34页
   ·转染 24h、48h、72h 后,MTT 检测细胞增殖率第34-37页
   ·提取总 RNA 的完整性和纯度第37-38页
   ·转染 48h 后,qRT-PCR 检测 miR-221 的表达第38-39页
   ·转染 48 小时后,PUMA、Bax、Bcl-2 mRNA 和蛋白表达变化第39-51页
   ·转染 48h 后,流式细胞术和 AO-EB 染色检测细胞凋亡第51-55页
 3 讨论第55-59页
第二部分:转染 miR-221 抑制剂对膀胱癌 T24、5637、J82 细胞侵袭能力影响的研究第59-78页
 1 材料与方法第59-62页
   ·细胞第59页
   ·主要仪器第59页
   ·主要试剂第59页
   ·实验方法第59-62页
   ·统计处理第62页
 2 结果第62-74页
   ·转染效率的检测第62页
   ·转染 48h 后 RT-PCR 检测 MMP-9、MMP-2、VEGF-C mRNA 表达第62-69页
   ·转染 48h 后,western-blot 检测 MMP-9、MMP-2、VEGF-C 蛋白表达水平第69-74页
   ·转染 48h 后,Transwell 检测 T24、5637、J82 细胞侵袭性的改变第74页
 3 讨论第74-78页
全文总结第78页
下一步工作计划及重点第78-79页
致谢第79-81页
参考文献第81-88页
附图第88-93页
攻读学位期间的研究成果第93-94页
综述第94-100页
 参考文献第98-100页

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