| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 综述 | 第11-23页 |
| 1 引言 | 第11页 |
| 2 苯并(a)芘概述 | 第11-13页 |
| ·苯并(a)芘的性质及来源 | 第11-12页 |
| ·苯并(a)芘的检测 | 第12页 |
| ·苯并(a)芘的毒性 | 第12-13页 |
| 3 生物标志物在污染物环境监测中的应用 | 第13-14页 |
| 4 鱼类胆汁PAHs代谢物的检测及在环境检测中的应用 | 第14-15页 |
| ·鱼类胆汁中PAHs代谢物的检测方法 | 第14-15页 |
| ·鱼类胆汁PAHs代谢物在环境监测中的应用 | 第15页 |
| 5 细胞色素P450 | 第15-17页 |
| ·CYP450酶系简介 | 第15-16页 |
| ·CYP450在环境监测中的应用 | 第16-17页 |
| 6 谷胱甘肽S-转移酶(GST) | 第17-18页 |
| ·GST简介 | 第17页 |
| ·GST在环境监测中的应用 | 第17-18页 |
| 7 单细胞凝胶电泳(SCGE)概述 | 第18-19页 |
| ·SCGE简介 | 第18-19页 |
| ·SCGE在环境监测中的应用 | 第19页 |
| 8 卵黄蛋白原概述 | 第19-21页 |
| ·卵黄蛋白原简介 | 第20页 |
| ·卵黄蛋白原在环境监测中的应用 | 第20-21页 |
| 9 本课题的立题依据及研究内容 | 第21-23页 |
| 第二章 罗非鱼胆汁中苯并(a)芘代谢物的动态变化 | 第23-31页 |
| 1 前言 | 第23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-24页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第23页 |
| ·试验动物及试验用水 | 第23页 |
| ·染毒方案 | 第23-24页 |
| ·FF法测定胆汁中BaP代谢物 | 第24页 |
| ·FF法的建立 | 第24页 |
| ·FF测BaP代谢物 | 第24页 |
| ·统计分析 | 第24页 |
| 3 结果 | 第24-27页 |
| ·FF法的建立 | 第24-25页 |
| ·罗非鱼胆汁BaP代谢物荧光强度与BaP暴露浓度的时间-效应及剂量-效应关系 | 第25-27页 |
| 4 讨论 | 第27-28页 |
| ·内滤效应 | 第27-28页 |
| ·胆汁中BaP代谢物与BaP暴露的时间和剂量-效应关系 | 第28页 |
| 5 结论 | 第28-31页 |
| 第三章 苯并(a)芘对罗非鱼肝细胞DNA损伤的影响 | 第31-39页 |
| 1 前言 | 第31页 |
| 2 材料与方法 | 第31-32页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第31页 |
| ·试验动物及试验用水 | 第31页 |
| ·染毒方案 | 第31-32页 |
| ·彗星试验 | 第32页 |
| ·单细胞悬液的制备 | 第32页 |
| ·制片 | 第32页 |
| ·细胞裂解 | 第32页 |
| ·DNA解旋及电泳 | 第32页 |
| ·中和及染色 | 第32页 |
| ·统计分析 | 第32页 |
| 3 结果 | 第32-35页 |
| ·肝细胞DNA受损形态 | 第32-33页 |
| ·苯并(a)芘对罗非鱼肝细胞DNA的损伤作用 | 第33-35页 |
| 4 讨论 | 第35-36页 |
| 5 结论 | 第36-39页 |
| 第四章 苯并(a)芘对罗非鱼肝脏CYP1A1及GST酶活性的影响 | 第39-47页 |
| 1 前言 | 第39页 |
| 2 材料与方法 | 第39-40页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第39页 |
| ·试验动物及试验用水 | 第39-40页 |
| ·染毒方案 | 第40页 |
| ·酶活性的测定 | 第40页 |
| ·统计分析 | 第40页 |
| 3 结果 | 第40-45页 |
| ·BaP暴露对罗非鱼肝脏CYP1A1活性的影响 | 第40-41页 |
| ·BaP暴露对罗非鱼肝脏GST活性的影响 | 第41-42页 |
| ·罗非鱼肝脏CYP1A1与GST之间的关系 | 第42-45页 |
| 4 讨论 | 第45-46页 |
| 5 结论 | 第46-47页 |
| 第五章 苯并(a)芘对雄性罗非鱼肝脏卵黄蛋白原(Vtg)基因表达的影响 | 第47-61页 |
| 第一节 罗非鱼卵黄蛋白原mRNA片段的扩增 | 第47-55页 |
| 1 材料与方法 | 第47-50页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第47页 |
| ·试验动物 | 第47页 |
| ·样本采集 | 第47页 |
| ·RNA提取 | 第47-48页 |
| ·RNA浓度测定和完整性检测 | 第48页 |
| ·RNA浓度测定 | 第48页 |
| ·RNA完整性检测 | 第48页 |
| ·反转录体系 | 第48页 |
| ·引物设计 | 第48-49页 |
| ·PCR反应 | 第49-50页 |
| ·PCR凝胶条带的纯化与测序 | 第50页 |
| 2 结果 | 第50-54页 |
| ·总RNA提取 | 第50-51页 |
| ·PCR条件优化 | 第51-52页 |
| ·PCR扩增条带的纯化与测序 | 第52-53页 |
| ·罗非鱼肝脏cDNA片段特异性比对 | 第53-54页 |
| 3 讨论 | 第54-55页 |
| 第二节 苯并(a)芘对雄性罗非鱼肝脏Vtg基因表达的影响 | 第55-61页 |
| 1 材料与方法 | 第55-56页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第55页 |
| ·试验动物及试验用水 | 第55页 |
| ·染毒方案 | 第55页 |
| ·肝脏总RNA的提取和反转录 | 第55页 |
| ·引物 | 第55-56页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第56页 |
| ·扩增效率的鉴定 | 第56页 |
| ·实时荧光定量PCR检测雄性罗非鱼肝脏Vtg的表达 | 第56页 |
| ·统计分析 | 第56页 |
| 2 结果 | 第56-59页 |
| ·总RNA提取 | 第56-57页 |
| ·实时荧光定量PCR扩增效率鉴定 | 第57-59页 |
| ·实时荧光定量PCR检测雄性罗非鱼Vtg基因表达 | 第59页 |
| 3 讨论 | 第59-60页 |
| 4 结论 | 第60-61页 |
| 全文总结 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-75页 |
| 致谢 | 第75-77页 |
| 科研情况 | 第77页 |
