| 摘要 | 第1-13页 |
| ABSTRACT | 第13-15页 |
| 縮略词表 | 第15-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-36页 |
| 1 脂肽类抗菌物质Fengycin的研究进展 | 第16-19页 |
| ·Fengycin产生菌 | 第16-17页 |
| ·Fengycin的结构与抑真菌机理 | 第17-18页 |
| ·微生物细胞内Fengycin的合成过程 | 第18-19页 |
| 2 非核糖体肽合成酶的研究进展 | 第19-25页 |
| ·非核糖体肽合成酶的结构与功能 | 第20-22页 |
| ·组合生物合成及其在新药研发中的应用 | 第22-24页 |
| ·腺苷酰化结构域底物选择性的检测方法 | 第24页 |
| ·原核表达蛋白包涵体复性的研究进展 | 第24-25页 |
| 3 脂肽类抗菌物质的应用研究 | 第25-27页 |
| ·在畜牧、植保上的应用 | 第26页 |
| ·在食品、饲料工业上的应用 | 第26-27页 |
| ·临床药用前景 | 第27页 |
| 4 本研究的目的意义及内容 | 第27-29页 |
| 参考文献 | 第29-36页 |
| 第二章 FenE_2-A结构域基因的克隆及诱导表达 | 第36-54页 |
| 1 试验材料与方法 | 第37-44页 |
| ·材料 | 第37-40页 |
| ·试验方法 | 第40-44页 |
| 2 结果与分析 | 第44-51页 |
| ·Fengycin合成酶基因序列分析 | 第44-45页 |
| ·Bacillus subtilis fmbj基因组DNA的提取 | 第45页 |
| ·Bacillus subtilis fmbj菌株FenE_2-A基因片段的扩增 | 第45-46页 |
| ·克隆载体pMD19-E_2A阳性转化子的筛选和鉴定 | 第46-47页 |
| ·重组载体pMD19-E_2A双酶切 | 第47页 |
| ·外源表达目的蛋白一级结构分析 | 第47-48页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第48-49页 |
| ·工程菌生长曲线的测定 | 第49页 |
| ·基因外源表达产物的鉴定 | 第49-51页 |
| 3 讨论 | 第51页 |
| 4 本章小结 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-54页 |
| 第三章 外源表达腺苷酰化结构域包涵体的分离及复性探索 | 第54-68页 |
| 1 材料与方法 | 第54-60页 |
| ·实验材料 | 第54-55页 |
| ·实验方法 | 第55-60页 |
| 2 结果与分析 | 第60-65页 |
| ·工程菌诱导条件优化 | 第60-63页 |
| ·包涵体的洗涤 | 第63-64页 |
| ·包涵体的溶解 | 第64页 |
| ·变性液蛋白含量的确定 | 第64页 |
| ·亲和层析分离包涵体蛋白 | 第64-65页 |
| ·包涵体复性探索 | 第65页 |
| 3 讨论 | 第65-66页 |
| 4 本章小结 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-68页 |
| 第四章 FenE_2-A基因重组整合载体的构建 | 第68-84页 |
| 1 材料和方法 | 第68-75页 |
| ·实验材料 | 第68-69页 |
| ·实验方法 | 第69-75页 |
| 2 结果与分析 | 第75-81页 |
| ·融合目的片段UED的扩增 | 第75-76页 |
| ·重组载体pMD19-UED双酶切 | 第76-77页 |
| ·重组整合质粒阳性转化子验证 | 第77-78页 |
| ·氯霉素抗性基因CrmR的PCR扩增 | 第78页 |
| ·含CrmR基因的重组克隆载体阳性转化子验证 | 第78-79页 |
| ·目的CrmR片段和单酶切pUS-19片段割胶回收 | 第79-80页 |
| ·重组载体pUS19-CrmR及pUS19-UED-CrmR的筛选验证 | 第80-81页 |
| 3 讨论 | 第81-82页 |
| 4 本章小结 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-84页 |
| 第五章 芽孢杆菌脂肽耐受度与其抑菌效果间的关系 | 第84-96页 |
| 1 材料与方法 | 第85-88页 |
| ·材料 | 第85-86页 |
| ·试验方法 | 第86-88页 |
| 2 结果与分析 | 第88-92页 |
| ·Bacillus subtilis fmbj产脂肽粗提物对产生菌自身的影响 | 第88-89页 |
| ·Bacillus amyloliquefaciens产脂肽粗提物中Surfactin的分析 | 第89页 |
| ·Bacillus amyloliquefaciens产脂肽粗提物对产生菌MIC范围的确定 | 第89-90页 |
| ·不同浓度脂肽对产生菌生长的影响 | 第90页 |
| ·脂肽耐受度与抑菌效果之间的关系 | 第90-91页 |
| ·脂肽耐受度与脂肽产量间关系 | 第91-92页 |
| 3 讨论 | 第92页 |
| 4 本章小结 | 第92-94页 |
| 参考文献 | 第94-96页 |
| 全文结论 | 第96-98页 |
| 展望 | 第98-100页 |
| 致谢 | 第100页 |
