| 英文缩略词 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-12页 |
| ABSTRACT | 第12-17页 |
| 第一章 慢病毒转染检测端粒酶逆转录酶基因hTERT在SKOV3中的表达 | 第17-73页 |
| 1. 材料 | 第18-24页 |
| ·质粒、菌株、细胞 | 第18-19页 |
| ·主要设备及仪器 | 第19-20页 |
| ·主要试剂 | 第20-21页 |
| ·主要试剂配制 | 第21-23页 |
| ·引物设计 | 第23-24页 |
| 2. 方法 | 第24-45页 |
| ·pGLV-EF1a-EGFP-hTERT慢病毒表达载体的构建 | 第24-29页 |
| ·携带hTERT基因重组慢病毒的包装、浓缩、感染 | 第29-34页 |
| ·重组慢病毒pGLV-EF1a-EGFP-hTERT在靶细胞中的表达 | 第34-44页 |
| ·统计学处理 | 第44-45页 |
| 3. 结果 | 第45-65页 |
| ·重组慢病毒质粒pGLV-EF1a-EGFP-hTERT的鉴定 | 第45-60页 |
| ·包装细胞293T转导pGLV-EF1a-EGFP-hTERT后GFP的表达 | 第60页 |
| ·病毒滴度测定 | 第60-61页 |
| ·重组慢病毒pGLV-EF1a-EGFP-hTERT感染卵巢癌SKOV3细胞后GFP的表达 | 第61-62页 |
| ·重组慢病毒转导细胞前后端粒酶基因hTERTmRNA的表达 | 第62-63页 |
| ·BCA法测定蛋白浓度 | 第63页 |
| ·重组慢病毒感染SKOV3细胞后hTERT蛋白表达情况 | 第63-65页 |
| 4. 讨论 | 第65-70页 |
| 参考文献 | 第70-73页 |
| 第二章 单细胞PCR检测细胞中端粒酶hTERT基因表达方法的建立 | 第73-91页 |
| 1. 材料 | 第74-76页 |
| ·细胞来源 | 第74页 |
| ·试剂与仪器 | 第74-76页 |
| ·引物设计与合成 | 第76页 |
| 2. 方法 | 第76-81页 |
| ·细胞培养 | 第76-77页 |
| ·单细胞PCR | 第77-80页 |
| ·单卵裂球实时PCR | 第80-81页 |
| ·统计学处理 | 第81页 |
| 3. 结果 | 第81-86页 |
| ·细胞数目的确定 | 第81-82页 |
| ·引物与cDNA含量的确定 | 第82-83页 |
| ·两步法所得结果 | 第83-84页 |
| ·一步法所得结果 | 第84页 |
| ·hTERT基因mRNA表达分析 | 第84-85页 |
| ·单卵裂球PCR体系优化 | 第85-86页 |
| ·单卵裂球PCR结果 | 第86页 |
| 4. 讨论 | 第86-89页 |
| 参考文献 | 第89-91页 |
| 综述 单细胞RT-PCR技术应用进展 | 第91-110页 |
| 1. 单细胞RT-PCR技术研究特点 | 第91-98页 |
| ·单细胞的获得 | 第93-95页 |
| ·单细胞的裂解 | 第95-96页 |
| ·单细胞RT-PCR扩增 | 第96-98页 |
| 2. 单细胞RT-PCR技术的应用 | 第98-102页 |
| ·在基因表达方面的应用 | 第98-99页 |
| ·在植入前基因诊断方面的应用 | 第99-101页 |
| ·在离子通道及受体方面的应用 | 第101-102页 |
| 3. 单细胞RT-PCR的未来发展前景 | 第102-104页 |
| 参考文献 | 第104-110页 |
| 致谢 | 第110-112页 |
| 攻读学位期间参与的课题及发表的学术论文 | 第112页 |
