| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 目录 | 第9-11页 |
| 第1章 绪论：真核基因初始转录本的剪切 | 第11-47页 |
| ·引言 | 第11-13页 |
| ·初始转录本的剪切 | 第13-15页 |
| ·剪接体的分步组装过程 | 第15-17页 |
| ·选择性剪切 | 第17-28页 |
| ·选择性剪切的生物学意义 | 第17-21页 |
| ·选择性剪切的类型 | 第21-23页 |
| ·顺式作用元件 | 第23-25页 |
| ·反式调节因子 | 第25-28页 |
| ·RBM25蛋白调控BCL-X PRE-MRNA的选择性剪切 | 第28-31页 |
| ·PWI结构域 | 第31-34页 |
| 参考文献 | 第34-47页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第47-71页 |
| ·PWI结构域的克隆 | 第47-53页 |
| ·生物信息学调研 | 第47页 |
| ·PWI结构域及其邻近碱性区域的引物设计 | 第47-48页 |
| ·Touch-down PCR | 第48页 |
| ·目的片段的琼脂糖凝胶电泳 | 第48-49页 |
| ·目的片段的回收 | 第49-50页 |
| ·质粒的抽提 | 第50页 |
| ·酶切和连接 | 第50-51页 |
| ·感受态细胞的制备和转化 | 第51-52页 |
| ·突变体的构建策略 | 第52-53页 |
| ·蛋白的表达纯化及性质测定 | 第53-62页 |
| ·蛋白的表达 | 第53-55页 |
| ·蛋白的纯化 | 第55-57页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第57-60页 |
| ·Western blotting | 第60-61页 |
| ·蛋白质浓度的测定 | 第61-62页 |
| ·圆二色谱(CD谱) | 第62页 |
| ·蛋白结晶,数据收集与结构解析 | 第62-64页 |
| ·蛋白质的结晶 | 第62-63页 |
| ·晶体数据的收集 | 第63页 |
| ·晶体结构的解析 | 第63-64页 |
| ·荧光偏振实验 | 第64页 |
| ·GST PULL-DOWN实验 | 第64-65页 |
| ·细胞的培养与转染 | 第65-66页 |
| ·RT(REVERSE TRANSCRIPTION)-PCR | 第66-67页 |
| ·免疫共沉淀 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-71页 |
| 第3章 实验结果与讨论 | 第71-92页 |
| ·实验结果 | 第71-87页 |
| ·PWI结构域的边界选择 | 第71-72页 |
| ·PWI结构域的克隆与表达 | 第72页 |
| ·PWI的晶体结构 | 第72-76页 |
| ·PWI与同源结构的比对 | 第76-78页 |
| ·邻近碱性区域与PWI结构域的核心H4螺旋紧密结合 | 第78-79页 |
| ·邻近碱性区域是PWI结合核酸时必不可少的合作伙伴 | 第79-82页 |
| ·RBM25 PWI结构域对单链和双链核酸具有相同亲和性 | 第82页 |
| ·RBM25 PWI结构域结合核酸时的重要接触残基 | 第82-85页 |
| ·PWI结构域辅助RBM25调控Bcl-x pre-mRNA的选择性剪切 | 第85-86页 |
| ·RNA分子作为桥梁连接PWI结构域和Luc7AC | 第86-87页 |
| ·讨论 | 第87-90页 |
| ·总结 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-92页 |
| 致谢 | 第92-94页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的研究成果 | 第94页 |
