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CRAd.pEgrl-TRAIL-Smac联合放射对MDA-MB-231细胞杀伤效应的研究

内容提要第1-6页
中文摘要第6-12页
Abstract第12-21页
第1章 绪论第21-47页
   ·肿瘤的基因治疗第21-28页
     ·基因治疗的发展及现状第21-22页
     ·肿瘤基因治疗第22-28页
   ·肿瘤放射治疗第28页
   ·肿瘤的基因放射治疗第28-34页
     ·肿瘤基因-放射治疗的种类第29-31页
     ·由Egr-1启动子介导的肿瘤基因-放射治疗第31-34页
   ·溶瘤病毒与肿瘤治疗第34-40页
     ·腺病毒的基本生物学特征第35-36页
     ·腺病毒载体发展过程第36-37页
     ·条件复制型腺病毒载体第37-39页
     ·条件复制型腺病毒与肿瘤的治疗第39-40页
   ·TRAIL基因与肿瘤治疗第40-43页
     ·TRAIL基因的分子结构与生物学特性第40-41页
     ·TRAIL基因与细胞凋亡第41-42页
     ·TRAIL基因与肿瘤治疗第42-43页
   ·SMAC基因与肿瘤治疗第43-46页
     ·Smac基因的分子结构及及生物学特性第43-44页
     ·Smac与细胞凋亡第44页
     ·Smac与肿瘤治疗第44-46页
   ·立题依据第46-47页
第2章 材料与方法第47-69页
   ·主要试剂及实验器材第47-50页
     ·试剂第47-49页
     ·实验器材第49-50页
   ·主要实验仪器第50-51页
   ·细胞株第51页
   ·质粒与菌株第51页
   ·照射条件第51-52页
   ·细胞生物学实验方法第52-54页
     ·培养液配制第52页
     ·胎牛血清的制备第52页
     ·平衡盐溶液的配制第52-53页
     ·0.25%胰酶溶液的配制第53页
     ·细胞培养第53页
     ·细胞冻存第53页
     ·细胞复苏第53-54页
     ·CCK-8试剂盒检测细胞增殖第54页
     ·检测细胞凋亡第54页
     ·FCM法检测细胞周期第54页
   ·分子生物学实验方法第54-68页
     ·细菌培养技术第54-57页
     ·重组穿梭载体的构建第57-59页
     ·重组腺病毒的包装与鉴定第59-63页
     ·目的基因蛋白表达水平的检测第63-68页
   ·统计学方法第68-69页
第3章 实验结果第69-107页
   ·重组质粒的构建及鉴定第69-73页
     ·目的基因的获得第69-71页
     ·重组质粒pShuttle-Egr1-TRAIL-Smac-hTERT-E1A-E1Bp-E1B55K的构建及鉴定第71-73页
   ·重组腺病毒的包装及鉴定第73-78页
     ·重组腺病毒质粒构建第73-75页
     ·重组腺病毒的包装第75页
     ·重组腺病毒的扩增第75-76页
     ·重组腺病毒滴度的测定第76-77页
     ·重组腺病毒的鉴定第77-78页
   ·重组腺病毒联合X射线照射对MDA-MB-231细胞的杀伤作用第78-89页
     ·重组腺病毒对MDA-MB-231细胞增殖的影响第78-80页
     ·重组腺病毒联合X射线照射对MDA-MB- 231细胞增殖的影响第80-83页
     ·重组腺病毒联合2.0GyX射线照射对MDA-MB- 231细胞凋亡的影响第83-85页
     ·重组腺病毒联合2.0GyX射线照射对MDA-MB- 231细胞周期进程的影响第85-89页
   ·重组腺病毒在乳腺癌MDA-MB-231细胞中的辐射诱导表达规律第89-107页
     ·2.0GyX射线照射后重组腺病毒感染的MDA- MB- 231细胞中TRAIL、Sm ac、DR5 、Cytc 、caspase-8、-9和- 3基因mRNA的表达变化第89-100页
     ·2.0GyX射线照射后重组腺病毒感染的MDA-MB-231细胞中TRAIL、smac、Cytc、DR5、caspase-9、-8和-3基因蛋白表达的变化第100-107页
第4章 讨论第107-115页
   ·条件复制型腺病毒载体构建及病毒包装第109-110页
   ·重组腺病毒联合2.0GYX射线照射对乳腺癌MDA-MB-231细胞的杀伤作用第110-115页
     ·重组腺病毒联合X射线照射对MDA-MB-231细胞的生长抑制作用第110-111页
     ·重组腺病毒联合X射线照射对乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡及其周期进程的影响第111-112页
     ·重组腺病毒联合X射线照射对MDA-MB-231细胞中凋亡相关基因的表达影响第112-115页
结论第115-117页
参考文献第117-129页
攻读学位期间发表的学术论文及其他成果第129-131页
致谢第131页

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