| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-24页 |
| ·腺病毒相关知识简介 | 第11-14页 |
| ·腺病毒颗粒形态及其结构 | 第11-12页 |
| ·病毒基因组构成及功能 | 第12-13页 |
| ·腺病毒衣壳蛋白结构与功能 | 第13-14页 |
| ·腺病毒感染细胞的过程 | 第14-16页 |
| ·粘附和进入细胞 | 第14-16页 |
| ·转录与复制及病毒的释放 | 第16页 |
| ·腺病毒作为基因治疗载体的简介 | 第16-17页 |
| ·腺病毒载体的特点 | 第16-17页 |
| ·基因治疗在癌症治疗中的应用 | 第17-19页 |
| ·自杀基因疗法治疗癌症策略 | 第17-18页 |
| ·人类端粒酶启动子 hTERT | 第18-19页 |
| ·论文设计与实验方案 | 第19-24页 |
| ·论文立题依据 | 第19页 |
| ·论文构思 | 第19-21页 |
| ·实验方案与技术路线 | 第21-24页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第24-37页 |
| ·材料、仪器和试剂 | 第24-26页 |
| ·菌种、质粒、细胞以及动物 | 第24页 |
| ·主要化学试剂 | 第24-26页 |
| ·主要仪器 | 第26页 |
| ·实验方法 | 第26-37页 |
| ·质粒的小量提取 | 第26-27页 |
| ·质粒的大量提取 | 第27-28页 |
| ·DNA 的 PCR 扩增 | 第28-29页 |
| ·提取病毒基因组 DNA | 第29-30页 |
| ·腺病毒的包装 | 第30页 |
| ·重组腺病毒的筛选 | 第30-31页 |
| ·腺病毒的扩增 | 第31-32页 |
| ·纯化腺病毒--氯化铯密度梯度离心法 | 第32-33页 |
| ·衣壳蛋白染色法测定重组腺病毒载体的滴度 | 第33页 |
| ·重组腺病毒的检测 | 第33-34页 |
| ·流式细胞仪检测人源肿瘤细胞表面 CAR 受体的表达 | 第34页 |
| ·Luciferase 活性的检测 | 第34页 |
| ·实时定量 PCR 检测重组腺病毒在小鼠体内分布 | 第34-35页 |
| ·重组腺病毒载体在小鼠体内的生物学分布 | 第35-36页 |
| ·重组腺病毒对于肿瘤细胞生长的特异性抑制 | 第36-37页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第37-60页 |
| ·构建腺病毒骨架质粒 Ad-mu-RGD 和 Ad-HVR26-mu-RGD | 第37-46页 |
| ·质粒 Adeno-X-mu-RGD 的构建及鉴定 | 第37-39页 |
| ·穿梭载体 pRSETB 的改造及鉴定 | 第39-40页 |
| ·pRSETB-AdMax6k 的构建及鉴定 | 第40-42页 |
| ·pRSETB9k 的构建及鉴定 | 第42-44页 |
| ·Ad5-mu-RGD 和 Ad5-HVR26-mu-RGD 的构建及鉴定 | 第44-46页 |
| ·重组腺病毒 Ad5-mu-RGD-luc 和 Ad5-mu-RGD-hTERT-TK 的包装与纯化 | 第46-50页 |
| ·重组腺病毒的包装 | 第46-48页 |
| ·重组腺病毒的鉴定 | 第48-49页 |
| ·重组腺病毒滴度的检测 | 第49-50页 |
| ·流式细胞仪检测肿瘤细胞表面 CAR 受体表达 | 第50-51页 |
| ·重组腺病毒在体外感染细胞能力的评价 | 第51-53页 |
| ·重组腺病毒载体在生物体内的分布特点 | 第53-56页 |
| ·重组腺病毒载体在体外对肿瘤细胞杀伤效果的评价 | 第56-57页 |
| ·结论 | 第57-60页 |
| 参考文献 | 第60-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
