摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
1 前言 | 第11-19页 |
·猪传染性胃肠炎(TGE)和传染性胃肠炎病毒(TGEV)概述 | 第11-16页 |
·TGE 的流行病学特征 | 第11页 |
·TGEV 的病原学特征 | 第11页 |
·TGEV 的基因组特征 | 第11-12页 |
·TGEV 的结构蛋白及其生物学功能 | 第12-16页 |
·抗原表位的研究方法 | 第16-18页 |
·抗原表位的概述 | 第16页 |
·T 细胞抗原表位的研究方法 | 第16页 |
·B 细胞抗原表位的研究方法 | 第16-17页 |
·表位疫苗的研究进展 | 第17-18页 |
·研究目的和意义 | 第18-19页 |
2 材料与方法 | 第19-31页 |
·材料 | 第19-20页 |
·菌株、载体与质粒 | 第19页 |
·细胞与病毒 | 第19页 |
·实验动物 | 第19页 |
·主要试剂 | 第19页 |
·标准参照物 | 第19-20页 |
·主要仪器设备 | 第20页 |
·实验方法 | 第20-31页 |
·TGEV M 基因亚克隆及原核表达 | 第20-25页 |
·TGEV M 蛋白单克隆抗体制备及特性鉴定 | 第25-28页 |
·应用噬菌体展示技术筛选 TGEV M 蛋白抗原表位 | 第28-31页 |
3 结果与分析 | 第31-41页 |
·TGEV M 基因的亚克隆及原核表达 | 第31-33页 |
·重组表达质粒 pGEX-M 的构建与鉴定 | 第31页 |
·TGEV M 蛋白的原核表达、纯化 | 第31-33页 |
·TGEV M 蛋白单克隆抗体制备及特性鉴定 | 第33-38页 |
·融合前抗 M 蛋白抗体效价检测 | 第33页 |
·阳性杂交瘤细胞的筛选 | 第33-34页 |
·单克隆抗体亚类鉴定 | 第34页 |
·间接免疫荧光方法鉴定单克隆抗体与 TGEV 的结合情况 | 第34页 |
·免疫印迹方法鉴定单克隆抗体与 M 蛋白的结合情况 | 第34-35页 |
·7G7 上清针对病毒囊膜内外抗原识别位点的初步鉴定 | 第35-36页 |
·单克隆抗体特异性分析 | 第36页 |
·腹水制备与纯化 | 第36-38页 |
·TGEV M 蛋白抗原表位的筛选 | 第38-41页 |
·噬菌体筛选与扩增 | 第38页 |
·亲和能力检测与测序 | 第38-40页 |
·竞争性阻断实验 | 第40-41页 |
4 讨论 | 第41-45页 |
·TGEV M 蛋白原核表达 | 第41页 |
·TGEV M 单克隆抗体制备及特性鉴定 | 第41-45页 |
·TGEV 颗粒作为免疫原的优越性 | 第41-42页 |
·抗 M 蛋白单克隆抗体 7G7 特性分析 | 第42页 |
·单克隆抗体腹水制备与纯化 | 第42-43页 |
·通过噬菌体展示技术筛选 TGEV M 蛋白抗原表位 | 第43-45页 |
5 结论 | 第45-46页 |
致谢 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-52页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第52页 |