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猪传染性胃肠炎病毒膜蛋白单克隆抗体的制备与抗原表位的鉴定

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
1 前言第11-19页
   ·猪传染性胃肠炎(TGE)和传染性胃肠炎病毒(TGEV)概述第11-16页
     ·TGE 的流行病学特征第11页
     ·TGEV 的病原学特征第11页
     ·TGEV 的基因组特征第11-12页
     ·TGEV 的结构蛋白及其生物学功能第12-16页
   ·抗原表位的研究方法第16-18页
     ·抗原表位的概述第16页
     ·T 细胞抗原表位的研究方法第16页
     ·B 细胞抗原表位的研究方法第16-17页
     ·表位疫苗的研究进展第17-18页
   ·研究目的和意义第18-19页
2 材料与方法第19-31页
   ·材料第19-20页
     ·菌株、载体与质粒第19页
     ·细胞与病毒第19页
     ·实验动物第19页
     ·主要试剂第19页
     ·标准参照物第19-20页
     ·主要仪器设备第20页
   ·实验方法第20-31页
     ·TGEV M 基因亚克隆及原核表达第20-25页
     ·TGEV M 蛋白单克隆抗体制备及特性鉴定第25-28页
     ·应用噬菌体展示技术筛选 TGEV M 蛋白抗原表位第28-31页
3 结果与分析第31-41页
   ·TGEV M 基因的亚克隆及原核表达第31-33页
     ·重组表达质粒 pGEX-M 的构建与鉴定第31页
     ·TGEV M 蛋白的原核表达、纯化第31-33页
   ·TGEV M 蛋白单克隆抗体制备及特性鉴定第33-38页
     ·融合前抗 M 蛋白抗体效价检测第33页
     ·阳性杂交瘤细胞的筛选第33-34页
     ·单克隆抗体亚类鉴定第34页
     ·间接免疫荧光方法鉴定单克隆抗体与 TGEV 的结合情况第34页
     ·免疫印迹方法鉴定单克隆抗体与 M 蛋白的结合情况第34-35页
     ·7G7 上清针对病毒囊膜内外抗原识别位点的初步鉴定第35-36页
     ·单克隆抗体特异性分析第36页
     ·腹水制备与纯化第36-38页
   ·TGEV M 蛋白抗原表位的筛选第38-41页
     ·噬菌体筛选与扩增第38页
     ·亲和能力检测与测序第38-40页
     ·竞争性阻断实验第40-41页
4 讨论第41-45页
   ·TGEV M 蛋白原核表达第41页
   ·TGEV M 单克隆抗体制备及特性鉴定第41-45页
     ·TGEV 颗粒作为免疫原的优越性第41-42页
     ·抗 M 蛋白单克隆抗体 7G7 特性分析第42页
     ·单克隆抗体腹水制备与纯化第42-43页
     ·通过噬菌体展示技术筛选 TGEV M 蛋白抗原表位第43-45页
5 结论第45-46页
致谢第46-47页
参考文献第47-52页
攻读学位期间发表的学术论文第52页

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